罗桂飞
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：广东药学院更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金广东省自然科学基金更多>>
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- 丙肝病毒核心基因靶向性M1GS核酶的体外抗病毒活性被引量：3
- 2013年
- 【目的】丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是引起病毒性肝炎的重要病原。目前临床HCV感染多采用干扰素联合病毒唑进行治疗,但其应答率低且感染易反复,探索新型抗HCV治疗策略与药物具有紧迫的现实意义。【方法】基于大肠埃希菌来源的核糖核酸酶P(RNase P),针对HCV核心基因的序列,设计一小段与之互补的外部引导序列(Guide Sequence,GS),通过PCR将其共价连接至大肠埃希菌RNase P催化性亚基(M1 RNA)的3'末端,从而构建一种靶向性的核酶——M1GS。【结果】构建的M1GS-HCV/C52核酶在体外可对靶RNA片段产生特异性切割;在HCV感染的Huh7.5.1细胞,该人工核酶也能够显著抑制HCV核心基因的表达,并使培养上清中HCV RNA的拷贝数减少约1500倍。【结论】本研究构建的M1GS-HCV/C52核酶具有显著的体外抗病毒活性,从而为HCV的治疗研究提供了一条潜在途径。
- 张文军李喜芳罗桂飞黄志文刘映乐
- 关键词：丙型肝炎病毒核心基因抗病毒
- 人工靶向性M1GS核酶胞内抗HCV活性的研究
- 2013年
- 目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一种靶向性M1GS核酶。结果胞内切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C76）对HCV 5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列77~89 n t之间,属于特异性切割,具有胞内抗病毒活性。结论构建了一种对HCV 5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,且具有胞内抗病毒活性,为动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。
- 罗桂飞李喜芳黄志文张文军
- 关键词：丙型肝炎病毒
- M1GS-HCV/C_(141)核酶的构建及其体外抗病毒活性测定被引量：3
- 2013年
- 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是引起慢性肝炎的重要病因之一,严重危害公众健康。目前临床HCV感染常采用干扰素联合病毒唑进行治疗,然而应答率不高且易反复。因此,探索新型抗HCV治疗策略及药物显得尤为迫切。针对HCV核心基因的序列,设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),通过PCR的方法将其共价连接于大肠杆菌核糖核酸酶P(RNase P)催化性亚基(M1 RNA)的3?末端,成功构建了一种靶向性M1GS核酶(M1GS-HCV/C141)。经体外切割试验、胞内反义效应及胞内毒性研究,结果表明:M1GS-HCV/C141核酶不仅能够在体外对靶RNA片段产生特异性切割,在HCV感染的Huh7.5.1细胞中,也能显著抑制病毒核心蛋白的表达,进而使HCV RNA的拷贝数减少约1 000倍。因此,文中构建的M1GS-HCV/C141核酶在体外具有显著的抗HCV活性,这为HCV治疗研究提供了一条新的潜在途径。
- 李喜芳张文军黄志文张成成罗桂飞
- 关键词：丙型肝炎病毒核心基因抗病毒
