王金恒
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：新乡医学院免疫学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胞外高迁移率组蛋白1对HTLV-1感染的T细胞中病毒复制的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨胞外的高迁移率组蛋白1（high mobility group box 1，HMGB1）对人T淋巴细胞白血病病毒1型（human T-cell leukemi int1，HTLV-1）感染的T细胞中病毒复制的影响。方法ELISA检测HTLV．1病毒阴性T细胞系Jurkat、MOLT4细胞及HTLV-1病毒阳性的T细胞系MT2、MT4细胞培养上清中的HMGBl水平；将HTLV-1的长末端重复序列荧光素酶报告基因pHTLV-1-LTR-luc转染病毒阳性细胞MT2，随后加入终浓度为0．25、0．50、0．75μs／ml的HMGBl多克隆抗体（PcAb）及其同型对照抗体，30、100、300ns／ml的重组人HMGB1蛋白（rhHMGB1）及其对照PBS，48h后检测荧光素酶活性；在病毒阳性细胞MT2中加入终浓度为0．25斗晷／ml的HMGBlPcAb及同型对照抗体，300ng／ml的rhHMGB1及对照PBS，real．timePCR检测病毒编码基因tax、poll、pol2、p19、gag、env。结果HTLv．1病毒阴性T细胞系和HTLV．1病毒阳性细胞系培养上清中的HMGBI水平无明显差异；0．25μg／ml的HMGBlPcAb可明显抑制HTLV-1-LTR的转录活性，而300ng／ml的rhHMGB1可明显促进HTLV．1．LTR的转录活性；real．timePCR检测显示0．25恤g／ml的HMGBlPcAb可明显抑制病毒编码基因poll,po／2、gag、e删的表达，300ns／ml的rhHMGB1可明显促进pol1、pol2、gag、env的表达。结论胞外的HMGB1可促进HTLV-1病毒感染T细胞的病毒复制。
- 王霞牛志国高彩孙启蒙王金恒宋向凤高志涛韩静贤王辉
- 关键词：病毒复制
- HMGB1对HTLV-1病毒感染T细胞中病毒复制的影响
- <正>目的:探讨胞外的HMGB1对HTLV-1感染的T细胞中病毒复制的影响。方法:ELISA检测HTLV-1病毒阴性T细胞系Jurkat、MOLT4细胞及HTLV-1病毒阳性的T细胞系MT2、MT4细胞培养上清中的HMG...
- 牛志国王霞孙启蒙高彩王金恒宋向凤王辉
- 文献传递
- 通路抑制剂对Tax诱导的Bcl-3的影响及其在NF-κB激活中作用的研究
- 2012年
- 目的:通过研究不同通路的抑制剂在TaxP细胞(稳定表达Tax的Jurkat亚细胞系)中对Bcl-3(Human B-cellleukemia protein 3)表达的影响和shRNA Bcl-3对NF-κB转录激活作用的影响,探讨Tax阳性细胞中调控Bcl-3的通路及Bcl-3在NF-κB通路中的作用。方法:将TaxP细胞分别用NF-κB(Nuclear factor-κB)抑制剂、GSK(Glycogen synthase kinase)抑制剂和蛋白酶抑制剂处理后,Western blot检测Bcl-3蛋白的表达情况;将Bcl-3的shRNA质粒转入TaxP细胞中,RT-PCR检测Bcl-3mRNA的表达抑制情况;共转染Bcl-3的shRNA和pNF-κB-luc质粒至Jurkat和TaxP细胞中,检测抑制Bcl-3表达后对NF-κB转录活性的影响。结果:Bcl-3的表达不受GSK抑制剂的影响,但在蛋白酶抑制后有明显的升高;RT-PCR的结果表明,在转染Bcl-3 shRNA质粒后,Bcl-3的mRNA表达有明显的下降,荧光素酶活性结果显示Bcl-3在Jurkat和TaxP细胞中被抑制后NF-κB的转录活性明显下降(P<0.05)。结论:Tax诱导的Bcl-3表达不依赖于GSK通路,而NF-κB通路参与了Bcl-3的调控,说明Bcl-3在NF-κB的激活中发挥着促进作用。
- 黄艳梅张莉莉王金恒吕壮伟张新宁王辉
- 关键词：TAX抑制剂
- HTLV-1病毒Tax蛋白对T淋巴细胞DcR3基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨H1]LV-1病毒Tax蛋白对T淋巴细胞DeR3基因表达的影响。方法构建pGL3-DeR3-luc（-1010bp-＋114bp）荧光素酶报告基因；利用脂质体介导的方法将pGL3-DcR3-luc转染到MT-2、TaxP、Jurkat细胞中，48h后检测DcR3荧光素酶报告基因的活性；利用脂质体介导的方法将梯度剂量的pCMV-Tax转染入Jurkat细胞，48h后提RNA逆转录，real-timePCR检测DeR3mRNA的表达的变化；选用流式细胞技术检测MT-2、TaxP、Jurkat细胞表面DeR3蛋白的表达。结果成功构建DcR3基因调控序列荧光素酶报告基因pGL3-DeR3．1ue；荧光素酶活性的检测显示，与对照组相比，MT2细胞荧光素酶活性升高了32．07±12．43倍，TaxP细胞荧光素酶活性升高了13．27＋4．04倍，Jurkat细胞荧光素酶活性升高了1．26_＋0．49倍。与Jurkat细胞相比，MT2细胞和TaxP细胞的相对荧光素酶活性明显升高（P〈0．01）；Real-timePCR结果显示，4组Ct内参／Ct目的基因的值依次是0．40±0．02、0．44±0．01、0．47±O．02、0．53±0．02；DeR3mRNA的表达与转染pCMV-Tax存在着剂量依赖性（P〈0．05）。流式细胞技术检测，MT2和TaxP细胞实验组DcR3蛋白的表达较对照组Jurkat细胞表达的高（P〈0．05）。MT2细胞的结果是33．1±9．9，Ta）‘P细胞的结果是35．1±4．8，Jurkat细胞的结果是16．9±2．3。结论Tax蛋白能够促进DeR3基因在T细胞中的表达。
- 吕壮伟牛志国陈丽媛王金恒陈琳王辉
- 关键词：DCR3
- 嘧啶类似物FNC有效抑制HTLV-1感染细胞的增殖和病毒蛋白的合成
- <正>人类T细胞白血病病毒1型(HTLV-1)是一种CD4+淋巴细胞克隆性恶性肿瘤-成人T细胞白血病(ATL)的病原体。尽管在临床上应用了多种化疗药物来治疗,ATL病人的预后仍然没有得到明显的改善。同时,HTLV-1感染...
- 王金恒王侠高彩宋向凤牛志国高志涛王辉
- 文献传递
