王蓓
- 作品数:5 被引量:40H指数:3
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- 胎儿肠壁结缔组织对骨髓间充质干细胞分化的诱导
- 目的:骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,Bm-MSCs)具有高度增殖、自我更新能力,可向三个胚层的细胞分化Ⅲ,在机体组织损伤修复过程及细胞移植治疗等多个领域有广阔的应用前景。...
- 王蓓
- 关键词:骨髓间充质干细胞细胞分化上皮细胞
- 文献传递
- 胎儿肠壁结缔组织诱导骨髓间充质干细胞向肠上皮细胞的分化被引量:9
- 2008年
- 目的观察胎儿肠壁结缔组织能否诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为上皮细胞。方法制备含胎儿肠黏膜和黏膜下层的组织块,酶消化去肠上皮。将DAPI标记的第3代BMSCs种植于组织块黏膜下层面,设加和不加EGF的A、B组;另设BMSCs细胞爬片的C、D对照组。体外培养至第12天,做光镜、CLSM的形态、组化和免疫组化观察。结果①荧光显微镜下组织块表面有DAPI荧光标记细胞,同一切片HE染色显示这些细胞呈上皮样形态。②免疫组化染色显示A、B组组织块表面的细胞和C组的细胞都能表达CK及CK20,D组为阴性;肠组织块有EGF表达。CLSM下组织块表面可见蓝色DAPI和红色CK或者绿色EMA双荧光标记阳性细胞。③PAS反应显示在细胞与结缔组织之间有基膜样结构出现。结论肠壁结缔组织能诱导BMSCs分化为上皮细胞,内源性EGF可能是其诱导因素之一。
- 段江洁王蓓张建华姜蓉汪维伟
- 关键词:结缔组织骨髓间充质干细胞分化
- 间充质干细胞的研究进展被引量:26
- 2005年
- 间充质干细胞(MSCs)广泛分布于骨髓、脐血、胎盘、脐静脉内皮下层、脂肪、外周血及肌肉等各种组织中,体外培养为贴附生长,表达多种表面标记物,可向骨、软骨、脂肪、成肌、神经等多种细胞定向分化,具有广阔的应用前景。本文综述BM-MSCs生物学特性及其来源的研究进展。
- 王蓓汪维伟
- 关键词:间充质干细胞分化
- 胎儿骨髓间充质干细胞生物学特征及荧光标记被引量:2
- 2008年
- 目的:探讨分离、培养、扩增和荧光标记胎儿骨髓间充质干细胞(Bore mesenchymal stem cell,BMSCs)的方法及其生物学特征。方法:取4~5个月胎儿四肢骨骨髓,Ficoll离心、贴壁筛选法分离BMSCs,体外扩增,传至第12代。检测BMSCs的生长曲线,细胞周期和细胞表型,酶活性及糖原含量,以及DAPI标记BMSCs的标记率。结果:(1)BMSCs主要呈长梭形,漩涡状排列。传代细胞生长快于原代细胞,12代后的细胞出现衰老征象;(2)流式细胞术检测第3、8代细胞表达CD29、CD71,不表达CD34、HLA-DR;G0和G1期细胞约为93.73%,S、M和G2期为6.27%;(3)第5代细胞的非特异性酯酶及糖原均为阳性,碱性磷酸酶为弱阳性;(4)DAPI标记后的BMSCs生长正常,标记率为100%,后逐渐减弱,3周时标记率仅15%。结论:分离获得的胎儿BMSCs具有MSCs的特征。DAPI标记是短期示踪BMSCs的有效方法。
- 田静王蓓张建华姜蓉汪维伟
- 关键词:胎儿骨髓间充质干细胞DAPI
- 胎儿肠壁结缔组织诱导骨髓间充质干细胞分化为上皮细胞(英文)被引量:3
- 2008年
- 背景:间充质干细胞具有多向分化能力,在体外能诱导分化为上皮细胞,而胚胎原始消化管上皮的分化受肠壁间充质的诱导。肠壁结缔组织能否诱导骨髓间充质干细胞分化形成上皮细胞,尚不明确。目的:观察胎儿肠壁结缔组织能否诱导骨髓间充质干细胞分化形成上皮细胞。设计:体外培养,对比观察。单位:实验于2004-07/2006-07在重庆医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:表皮生长因子为Sigma公司产品;CK,CK20为中山生物有限公司产品。收集四五个月流产胎儿标本6例的四肢骨髓,Ficoll离心,分离、培养、扩增获取骨髓间充质干细胞。取胎儿十二指肠乳头以下肠段,剥去肌层和外膜,酶消化去除上皮,剪成约15 mm×5 mm的组织块。胎儿标本由临床学院妇产科提供,产妇同意提供胎儿用于实验,实验经医院伦理委员会批准。方法:实验分4组进行:干细胞移植组和干细胞移植+表皮生长因子组分别将DAPI标记的第3代骨髓间充质干细胞(3×104)个移植于肠壁结缔组织块的黏膜下层表面;干细胞组和干细胞+表皮生长因子组为骨髓间充质干细胞爬片;其中干细胞移植+表皮生长因子组和干细胞+表皮生长因子组加入终浓度为10μg/L表皮生长因子;4组均体外培养12 d。主要观察指标:①用荧光显微镜观察DAPI标记的骨髓间充质干细胞的形态及分布。②干细胞移植组和干细胞移植+表皮生长因子组组织块培养12 d后,采用苏木精-伊红染色观察与荧光显微镜观察同一肠壁结缔组织表面细胞形态。③免疫组化染色检测标记细胞CK及CK20的表达,以及肠壁结缔组织是否表达表皮生长因子。④高碘酸-希夫反应(PAS反应)检测DAPI标记细胞与结缔组织间有无基膜样物质产生。结果:①荧光显微镜下干细胞移植组和干细胞移植+表皮生长因子组的组织块表面均有DAPI标记的荧光阳性细胞,苏木精-伊红染色显示该部位细
- 汪维伟王蓓张建华姜蓉
- 关键词:骨髓间充质干细胞胎儿分化