王毅楠
- 作品数:4 被引量:7H指数:1
- 供职机构:沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 在无血清条件下TNFα通过Pkn1和MAPK-Erk通路对FBJ细胞生长的调控作用被引量:6
- 2009年
- 目的研究肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)在无血清条件下作为生长因子促进FBJ细胞生长的信号通路。方法用细胞活性检测法分析细胞的活性;分别用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcriptional-polymerase chain reaction,RT-PCR)法和免疫印迹法检测细胞中TNFα的表达以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk)、p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的磷酸化水平。结果在无血清培养基培养条件下,经TNFα(10μg.L-1)处理的FBJ细胞明显对抗无血清条件下诱发的细胞死亡,TNFαsense cD-NA转染的FBJ-LL和FBJ-S1细胞均能提高其在正常培养基以及无血清培养基中的生长速度,TNFα是FBJ细胞中重要的生长因子之一;蛋白酶N1(protein kinase N1,Pkn1)siRNA可明显沉默目的基因Pkn1的表达,同时降低TNFα的含量;Pkn1沉默的细胞在无血清条件下的生长明显被抑制;TNFα处理的细胞能迅速刺激Erk的磷酸化,Erk沉默的FBJ-LL细胞的生长速度明显降低,TNFα通过Erk信号通路诱发细胞生长;TNFα亦能诱导另一有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen-ac-tivated protein kinase,MAPK)家族p38的磷酸化;神经节苷脂GD1a可降低TNFα在FBJ细胞中的表达,TNFα诱发的无血清条件下的生长速度也被神经节苷脂GD1a抑制。结论在无血清条件下,TNFα通过Pkn1和MAPK-Erk通路调控小鼠骨肉瘤FBJ细胞的生长。
- 王丽王毅楠吴英良山形贞子山形达也
- 关键词:胞外信号调节激酶细胞死亡神经节苷脂
- siRNA介导的Gaveoin-1基因沉默对于FBJ-S1细胞的影响以及关于Gdla结合分子的研究
- 窖蛋白-1(Caveolin-1)是胞膜窖的一种基本结构成分,通常被认为是一种肿瘤抑制蛋白。胞膜窖与丝裂信号,肿瘤的生成以及转移都具有一定的联系。研究表明神经节苷脂GDla可抑制小鼠骨肉瘤细胞系FBJ细胞的转移,并可诱导...
- 王毅楠
- 关键词:窖蛋白-1基因沉默肿瘤转移
- 窖蛋白1在无血清状态下诱导FBJ细胞死亡被引量:1
- 2008年
- 目的研究无血清状态下,FBJ-S1细胞较FBJ-LL细胞更易死亡的原因。方法用细胞活性检测法分析细胞的活性,分别用HPTLC法、逆转录PCR法和免疫印迹法检测细胞中GD1a和窖蛋白1(caveolin-1)的含量。结果研究表明,在无血清培养基培养条件下,富含神经节苷脂GM3和GD1a的低转移性的FBJ-S1小鼠骨肉瘤细胞趋向死亡,但对含有几乎相同量GM3而无GD1a表达的高转移性的FBJ-LL细胞的生长却未见明显影响。同时发现:a.FBJ-S1细胞富含窖蛋白1,而FBJ-LL细胞中窖蛋白1表达量则较低;b.利用小干扰基因沉默技术在FBJ-S1细胞中沉默窖蛋白1的表达,结果使细胞存活率升高;c.使用GD1a处理FBJ-LL细胞导致其趋向死亡,通过免疫印迹法检测窖蛋白1发现其蛋白表达量增加。结论在无血清培养条件下,窖蛋白1诱导FBJ细胞的死亡。
- 郑大勇王毅楠王丽吴英良山形贞子山形达也
- 关键词:神经节苷脂细胞死亡
- siRNA介导的Caveolin-1基因沉默对于FBJ-S1细胞的影响以及关于GD1a结合分子的研究
- 窖蛋白-1(Caveolin-1)是胞膜窖的一种基本结构成分,通常被认为是一种肿瘤抑制蛋白。胞膜窖与丝裂信号,肿瘤的生成以及转移都具有一定的联系。研究表明神经节苷脂GD1a可抑制小鼠骨肉瘤细胞系FBJ细胞的转移,并可诱导...
- 王毅楠
- 关键词:窖蛋白免疫沉淀二维电泳
- 文献传递