王新
- 作品数：5 被引量：45H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：8
- 2002年
- 为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa) ,对构建的基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa进行了表达条件的优化 .用摇瓶培养 ,rETIa蛋白占菌体总蛋白 4 0 %以上 .经破碎菌体 洗涤包涵体 溶解包涵体 复性初步纯化后 ,再经二步柱层析纯化获得电泳纯的rETIa蛋白 .测定了rETIa对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织型纤溶酶原激活因子缺失突变体 (NTA)的抑制活性 .
- 王新陈海旭陆坚峰张毅屈贤铭杨胜利
- 关键词：大肠杆菌纯化
- 维生素B1缺乏引起神经元死亡的机制研究
- 维生素B1缺乏(TD)可导致大脑特定区域的神经元死亡。TD对氧化代谢可造成长期、温和的损伤。TD引起的神经元死亡的机制现在还不是很明确。内质网钙流失或超载、蛋白质糖基化形成障碍，或蛋白质不能形成正常的二硫键都能造成内质网...
- 王新
- 关键词：细胞死亡神经退行性维生素B1缺乏氧化应激神经元死亡蛋白激酶
- 文献传递
- 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a的表达、纯化和应用蚯蚓抗菌肽基因的克隆、表达和定位
- 为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa),对基因工程菌株E.coliBL21 (DE3) pET22b-mETIa的表达条件进行了优化,成功地进行了高密度发酵,重组蛋白占菌体总蛋白的40 ﹪以上.经菌体破碎、包...
- 王新
- 关键词：基因克隆基因表达纯化
- 文献传递
- 抗菌肽Diptericin cDNA的克隆及在E.coli中的融合表达被引量：34
- 2001年
- 从果蝇成虫中抽提总 RNA,RT- PCR扩增编码伏蝇素 diptericin的 c DNA,克隆并测定了全序列 .将该 c DNA亚克隆到融合表达载体 p MAL- CR1上 ,转化大肠杆菌 BL2 1菌株 ,进行了高效的可溶性融合表达 .通过离子交换层析纯化融合蛋白 ,经 Xa因子酶切后得到的重组 diptericin具有抗菌活性 .
- 陈海旭胡泰山王新屈贤铭
- 关键词：抗菌肽CDNA克隆
- 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a的制备及其在tPA突变体纯化中的应用被引量：5
- 2002年
- 将基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa高密度发酵 ,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a (rETIa)蛋白在E .coli中得到较高水平表达 ,表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 .经菌体破碎、包涵体变性、复性 ,二步柱层析纯化得到电泳纯的rETIa蛋白 .测得rETIa对t PA突变体(NTA)的抑制平衡常数Ki 为 8 72× 10 -8mol/L .据此利用纯化的rETIa蛋白制备rETIa Sepharose 4B亲和层析柱 .直接一步纯化NTA复性液 ,纯化的NTA纯度达 90 %以上 ,收率为 96 2 % ,纯化倍数为 13 2 ,比活为(5 6 5 7± 71 3)U/μg .
- 王新屈贤铭杨胜利
- 关键词：纯化
