潘晋坤
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞参与A549肺腺癌的组织修复被引量：3
- 2013年
- 背景:肿瘤被认为是一种特殊的不愈合创伤,骨髓间充质干细胞通过向肿瘤组织归巢和向间质成分分化,参与肿瘤间质重构,从而改变肿瘤微环境,影响肿瘤的生长和转移。目的:在A549肺癌荷瘤小鼠模型上证实骨髓间充质干细胞参与其损伤修复,探讨骨髓间充质干细胞参与肿瘤组织修复的机制。方法:体外分离、培养人骨髓间充质干细胞,使用流式细胞术鉴定,制造A549肺癌荷瘤小鼠模型。实验组采用瘤周注射人骨髓间充质干细胞,对照组注射等量PBS,对比观察动物生活情况,肿瘤生长大小。4周后取材,苏木精-伊红染色对比观察肿瘤组织,Masson染色对比胶原纤维含量,RT-PCR检测两组α平滑肌收缩蛋白的表达,免疫组织化学检测两组成纤维细胞特异蛋白、成纤维细胞活化蛋白的表达情况,反映两组肿瘤组织的间质纤维的程度。免疫组织化学方法对比两组中血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C的表达高低。结果与结论:骨髓间充质干细胞促进荷瘤小鼠肿瘤的生长,实验组肿瘤组织生长速度明显快于对照组(P<0.05)。RT-PCR检测α平滑肌收缩蛋白的表达:与对照组比较,实验组α平滑肌收缩蛋白mRNA的表达水平显著升高。免疫组织化学方法检测实验组肿瘤组织中TAFs标志物:成纤维细胞特异蛋白、成纤维细胞活化蛋白的表达,IHC检测血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C的表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。说明骨髓间充质干细胞在肿瘤微环境中向成纤维细胞方向分化,参与肿瘤间质的形成和构建,分泌血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素6、肌糖蛋白C等促进肿瘤的生长修复。
- 许峰张雷潘晋坤薛利利赵晓燕李宝平
- 关键词：干细胞骨髓间充质干细胞肿瘤相关成纤维细胞
- 奥曲肽联合顺铂和5-氟尿嘧啶对人肺腺癌细胞株A549抑制的增效作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨生长抑素类似物奥曲肽能否增强人肺腺癌细胞株A549对化疗药物的敏感性。方法将不同浓度奥曲肽、顺铂和5-氟尿嘧啶（5-Fu）作用于人肺腺癌细胞株A549，运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测奥曲肽单独以及与顺铂和5-Fu联合作用后48h对A549细胞株生长的影响，每个药物浓度6个复孔，实验重复3次，结果取平均值，并用Isobologram分析评价药物联合应用的作用性质。结果MTr法结果显示，奥曲肽对A549细胞生长起抑制作用，在浓度1．3—166．7mg／L范围内，抑制率呈剂量依赖性；其与顺铂和5-Fu共同作用后，对A549细胞的抑制作用明显增高。3种药物联合作用比奥曲肽单用或顺铂、5-Fu两药联合作用差异均具有统计学意义（P〈0．05），其半数抑制浓度（IC50）的效应点落在Isobologram图中的协同区域。结论在体外实验中，奥曲肽能够抑制A549细胞增殖，且联合顺铂和5．Fu后对A549细胞生长抑制作用增强，为协同作用。奥曲肽能提高A549细胞对顺铂和5-Fu的敏感性。
- 潘晋坤李宝平张雷任宏伟许峰
- 关键词：奥曲肽药物协同作用ISOBOLOGRAM
- 全骨髓贴壁改良法分离培养人骨髓间充质干细胞及标记鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的对比、探求分离培养人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的方法,探讨hMSCs鉴定和标记的方法,为进一步的实验研究打下基础。方法采集成人健康志愿者骨髓5mL,全骨髓贴壁法、全骨髓贴壁改良法、密度梯度离心法分离纯化、培养和扩增,获得hMSCs,对比三种方法。"慢冻速融"的原则进行细胞冻存、复苏。流式细胞术检测hMSCs的表面标志。hMSCs经5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记,免疫细胞化学法测定并评估。结果 hMSCs运用三种方法均可获得,比较全骨髓贴壁改良培养法最为方便高效分离获取hMSC、体外扩增迅速。流式细胞仪检测结果显示:CD44阳性及CD71弱阳性,表达率分别为95.05%,78.86%;CD34、CD45阴性,表达率分别为3.40%,2.88%。Brdu最佳标记浓度和时间分别为10μmol/L和72 h。结论 hMSCs采取全骨髓贴壁改良法进行较好的纯化和扩增,Brdu标记可用于hMSCs的生长和分化的动态示踪观察。有望建立hMSCs库,为组织工程、细胞移植研究打好基础。
- 许峰李宝平张雷孙琰玮潘晋坤
- 关键词：人骨髓间充质干细胞BRDU
- 奥曲肽对西咪替丁抑制SGC-7901细胞的增效作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨生长抑素类似物奥曲肽能否增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用。方法将不同浓度奥曲肽和西咪替丁作用于人胃癌细胞SGC-7901,运用四氮唑盐法(MTT法)检测奥曲肽和西咪替丁单独及联合作用48h后对SGC-7901细胞生长的影响,每个药物浓度6个复孔,实验重复3次,结果取平均值,并用Isobologram分析评价药物联合应用的作用性质。结果 MTT法结果显示奥曲肽和西咪替丁对SGC-7901细胞的生长起抑制作用。奥曲肽在浓度1.3～166.7mg/L范围内,呈剂量依赖性;西咪替丁在浓度500～3000mg/L范围内,呈剂量依赖性。奥曲肽和西咪替丁共同作用后,对SGC-7901的抑制作用明显增高,较两药单独作用差异具有统计学意义(P<0.05),其IC50的效应点落在Isobologram图中的协同区域。结论在体外实验中,奥曲肽及西咪替丁能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,且两药联合后对SGC-7901细胞生长抑制作用增强,为协同作用。奥曲肽能增强西咪替丁对人胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。
- 任宏伟李宝平张雷潘晋坤许峰
- 关键词：胃肿瘤奥曲肽西咪替丁药物相互作用
- 顺铂联合5-氟尿嘧啶对肺癌A549细胞生长的影响
- 2012年
- 目的探讨顺铂和5-氟尿嘧啶(5-FU)在体外联合用药对人肺癌A549细胞的生长抑制和促凋亡作用。方法运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测顺铂和5-FU单独及共同作用48 h后对A549细胞生长的影响,每个药物浓度设6个复孔,实验重复3次,结果取平均值;并用流式细胞术检测两药合用对细胞周期和凋亡的影响。结果 MTT法结果显示顺铂和5-FU联合使用对A549细胞的生长抑制率高于两药单独使用(P<0.01);流式细胞仪检测可见两药合用后晚期凋亡明显增多,S期细胞增多(P<0.01)。结论在体外实验中,顺铂与5-FU联合使用能够更好地抑制肺癌A549细胞的增殖,并可改变细胞周期分布,促进细胞凋亡。
- 潘晋坤李宝平张雷任宏伟许峰
- 关键词：顺铂5-氟尿嘧啶MTT法流式细胞术
