潘国栋
- 作品数：43 被引量：245H指数：8
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省教育厅青年基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 阿霉素诱导大鼠心衰模型不同方案的比较被引量：63
- 2006年
- 目的通过阿霉素(Adriamycin,ADR)不同方案腹腔注射给药(Adriamycin,ADR)试图造成大鼠心衰,探讨建立大鼠阿霉素心衰动物模型的给药方案,为研究心衰的发病机制和有效治疗措施提供理想的动物模型。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分成3组,模型A组(n=15),模型B组(n=15),对照组(n=10)。模型A组:腹腔注射ADR(4 mg/kg体重,用注射用水配制成2 mg/mL溶液,即2 mL/kg体重),每周1次,共6周,累积总量24 mg/kg体重;模型B组:腹腔注射ADR(2.5 mg/kg体重,用注射用水配制成2 mg/mL溶液,即1.25 mL/kg体重),每周3次,共2周,累积总量15 mg/kg体重;对照组:注射相同体积的注射用水。于末次注射停药后2周,测量体重(BW)、心室质量(VW)、动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速度(±dp/dtmax),并作病理切片观察其组织学变化。结果与对照组相比,模型A组SAP、LVSP、±dp/dtmax均明显降低,LVEDP明显升高;病理学结果证实符合心肌病样改变。模型B组则改变不明显,但心外损害严重,死亡率高。结论多次间断腹腔注射一定剂量的阿霉素可明显损害心脏的功能,是建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型的一种简便可靠的方法。
- 李玉玲杨建业唐俊明潘国栋王家宁
- 关键词：动物阿霉素心衰
- 骨髓基质细胞在梗塞心肌与非缺血心肌中的分化
- 目的:观察急性心肌梗塞环境是否影响移植的成年骨髓基质细胞(MSC)的存活、增殖以及向心肌样细胞分化.方法:采用成年近交系Wistar大鼠,分离双侧胫股骨全骨髓细胞,于20﹪FBS的高糖型DMEM培养基、37℃、5﹪CO<...
- 潘国栋
- 关键词：骨髓基质细胞缺血心肌骨髓细胞增殖梗塞灶
- 文献传递
- 心肌或“心肌样”环境而不是化学物质诱导骨髓基质细胞向心肌细胞分化研究被引量：2
- 2004年
- 目的 比较心肌或“心肌样”环境与胞嘧啶类化学物质 5 氮胞苷对骨髓基质细胞(MSCs)向心肌细胞分化的诱导作用。方法 用不同浓度 (3、5、10 μmol/L)的 5 氮胞苷以各种方法(一次处理与反复处理 )诱导MSCs ,连续观察 3 0d。采用免疫荧光技术检测心肌特异性肌球蛋白重链 (MHC)及肌钙蛋白Ⅰ (TnⅠ )的表达 ,并用心室肌特异性肌球蛋白轻链 (MLC2v)启动子 (2 5 0bp)控制的蓝绿色荧光蛋白 (ECFP)报告基因表达技术从转录启动水平进行检测 ;将MSCs与心肌细胞共培养或移植入大鼠心肌内 ,检测MHC及TnⅠ表达。结果 5 氮胞苷处理过的MSCs培养物中未见细胞搏动、肌管形成、MHC和TnⅠ表达 ,亦无MLC2v转录启动阳性细胞出现 ;但在共培养及体内移植实验中 ,检测到心肌特异性蛋白在MSCs中的表达。结论 体外 5 氮胞苷处理不能诱导MSCs表达心肌特异性蛋白 ;但MSCs与心肌细胞直接接触可向心肌细胞分化。
- 刘维新宋健万喻潘国栋刘昱程邦昌陈锡昌
- 关键词：骨髓基质细胞5-氮胞苷共培养分化
- 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白对骨生成的作用
- 糖皮质激素(glucocorticoids, GC)不仅有导致骨质疏松的骨分解,还有促骨生成作用。然而目前尚不清楚什么因子介导GC的促骨生成作用。糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(glucocorticoid-induced...
- 潘国栋
- 关键词：糖皮质激素炎症转基因鼠骨生成
- 细胞穿透肽PEP-1介导增强型绿色荧光蛋白在小鼠体内跨膜转导被引量：8
- 2007年
- 目的研究细胞穿透肽PEP-1介导的大分子物质在小鼠体内的跨膜转导能力。方法用基因工程的方法制备并纯化增强型绿色荧光蛋白EGFP和PEP-1-EGFP融合蛋白,分别将500μg的EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白通过尾静脉注射入昆明小鼠体内,2 h后麻醉小鼠,PBS充分灌流并取心、脑、肝、脾、肾快速冷冻切片后立即置荧光显微镜下观察。结果2 h后PEP-1-EGFP融合蛋白处理的小鼠大脑、心肌、肝、脾和肾组织里出现均一的明亮绿色荧光,而EGFP蛋白处理的小鼠各脏器内均未见到绿色荧光。结论细胞穿透肽PEP-1能携带增强型绿色荧光蛋白穿透小鼠细胞膜并分布于心、脑、肝、脾、肾组织内,为将来用PEP-1介导各种大分子药物跨膜转导进行各种疾病的蛋白治疗提供实验依据。
- 董晓王家宁唐俊明潘国栋黄永章杨建业曹书芬
- 关键词：细胞穿透肽蛋白转导域蛋白转导PEP-1增强型绿色荧光蛋白
- 机械通气后ARDS的危险因素分析
- : 探讨呼吸功能正常病人接受机械通气治疗发生.ARDS的危险因素. 方法: 回顾分析自2002至2007年间接受通气治疗超过48小时的病人资料,比较入住时呼吸功能正常病人是否发生ARDS之间的不同. 结果...
- 付守芝刘勇王家良潘国栋
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征机械通气
- 细菌内同源重组法构建pAd-EGFP-hSDF-1α腺病毒质粒被引量：6
- 2006年
- 目的:利用细菌内同源重组法构建和制备含人基质细胞源衍生因子-1α(hSDF-1α)重组腺病毒质粒。方法:设计5'端分别具有EcoR V/Xho I酶切位点的扩增hSDF-1αcDNA片段上下游引物,聚合酶链反应法(PCR)从pORF-hSDF-1α质粒中扩增hSDF-1α的cDNA,插入pGEM-T Easy载体中,构建pGEM-T-hSDF-1α质粒,EcoR V/Xho I双酶切后回收279 bp片段,与经过相同酶切的8.8 kb pShuttle-IRES-hrGFP-2进行连接,连接产物转化感受态DH5α,挑选克隆,重组质粒pShuttle-EGFP-hSDF-1α用EcoR V/Xho I酶切鉴定。pShuttle-EGFP-hSDF-1α经Pm e I酶切线性化后,转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183,采用细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-EGFP-hSDF-1α;pAd-EGFP-hSDF-1α质粒经PacⅠ酶切鉴定和PCR鉴定。结果:线性化的pShuttle-EGFP-hSDF-1α转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183,重组质粒经酶切获得一大于23 kb的大片段和4.5 kb的片段,PCR反应扩增出了279 bp的片段。结论:用细菌内同源重组成功地构建了含hSDF-1αcDNA的重组腺病毒质粒,为进行表达hSDF-1α的重组腺病毒的制备及hSDF-1α在骨髓源干细胞动员迁移中的作用研究奠定了基础。
- 唐俊明黄永章郭凌郧潘国栋孔霞杨建业王家宁
- 关键词：T载体增强型绿色荧光蛋白
- 体外“心肌样”环境诱导骨髓基质细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2004年
- 目的 :探讨体外“心肌样”环境对骨髓基质细胞 (marrowstromalcells ,MSCs)分化的诱导作用。方法 :体外将MSCs与心肌细胞共培养至 16d ,用数码显微摄像及免疫荧光技术分别记录和检测被标记MSCs的生长行为和心肌特异性肌节肌球蛋白重链 (cardiacmyosinheavychainα/ β ,MHCα/ β)、肌钙蛋白I(troponinI,TnI)的表达 ;并在同等条件下 ,与用心肌条件培养基及正常培养基培养的MSCs进行比较。结果 :正常培养基组与条件培养基组均未发现MSCs分化为心肌细胞的可靠证据。但在共培养组 ,观察到了搏动的MSCs;MHCα/ β与ThI蛋白分别于第 1,4d开始表达 ,随时间延长 ,表达阳性MSCs增多。结论 :体外MSCs与心肌细胞接触生长可向心肌细胞分化。
- 刘维新宋健万喻刘昱潘国栋程邦昌陈锡昌
- 关键词：骨髓基质细胞共培养细胞分化细胞移植
- 活化ERK的表达与食管鳞癌病理特征关系探讨被引量：2
- 2004年
- 目的 研究人食管鳞癌及癌旁正常食管黏膜组织中细胞外信号调节激酶 (ERK1 / 2 )及其活化态 (p -ERK1 / 2 )的表达 ,探讨ERK1 / 2活化与人食管鳞癌病理特征的关系及其在人食管鳞癌发生发展中的意义。方法 应用westernblot方法和免疫组织化学方法检测 6 0例人食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的ERK1 / 2及p -ERK1 / 2蛋白的表达情况。结果 食管鳞癌组织与癌旁正常黏膜组织中的ERK1 / 2的蛋白水平无明显差异 ,p -ERK1 / 2明显增高 ,分别为癌旁正常黏膜组织的 1 30倍和 1 2 0倍 (t=1 7 2 3,t=1 8 1 8,P <0 0 1 )。p -ERK1 / 2在不同病理分期食管鳞癌中的表达无明显差异 ,而与分化程度有关 (P <0 0 1 )。结论 细胞外信号调节激酶的活化与食管鳞癌的分化有关 ,与食管癌病理分期无关 。
- 王旭广毛志福高尚志程邦昌宋健潘国栋师晓天
- 关键词：食管鳞癌病理特征免疫组织化学黏膜组织
- 老年骨髓基质细胞移植治疗急性心肌梗死实验研究被引量：4
- 2004年
- 目的 :观察老年大鼠骨髓基质细胞 (MSC)能否在急性心肌梗死环境中存活、增殖和向心肌样细胞分化。方法 :选用老年近交系Wistar大鼠 ,取供体鼠MSC ,体外扩增 ,DAPI荧光标记。受体鼠经左冠状动脉结扎建立急性心肌梗死模型。 1周后将标记的MSC用直接注射方式移植到梗死灶中 ,移植后 3、7、14d取材 ,观察梗死灶中MSC分布、扩散及心肌特异性蛋白T(TnT)的表达。结果 :在不同移植时间梗死灶中都发现DAPI阳性的细胞 ,且细胞计数随移植时间延长而增多。部分细胞表达TnT ,其中少数细胞出现心肌样横纹。结论 :老年大鼠MSC可在急性心肌梗死环境中存活、增殖 ,有向心肌样细胞分化的能力。
- 潘国栋王凤婕吴艳曾敬宋健
- 关键词：骨髓基质细胞细胞移植老年大鼠细胞分化MSC
