- mTORC1参与5、12-HETE促进乳腺癌发生发展的过程
- 目的探讨5、12-HETE促进乳腺癌发生发展过程中mTORC1信号通路的作用。方法培养乳腺癌MCF-7细胞,分为四组,对照组加入0.1%DMSO,5、12-HETE组加入15μmol/L 5-HETE+12-HETE、R...
- 刘淼张月温芝华何敏红周玲郑航
- 关键词：MTOR
- 文献传递
- 花生四烯酸通过mTOR通路促进乳腺癌发生
- 肿瘤发生是遗传因素、环境因素共同作用导致细胞内信号通路失调的过程。世界卫生组织指出,人类恶性肿瘤的90％与环境因素有关。在肿瘤发生早期,环境中致癌物或非致癌物等引起细胞代谢反应失调,随后信号通路失调,最终引起遗传变异和自...
- 温芝华
- 关键词：花生四烯酸MTOR信号通路乳腺癌肿瘤发生血管生成
- 文献传递
- 二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及机制被引量：8
- 2011年
- 目的探讨二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及其机制。方法通过Annexin V-FITC/PI染色镜下观察及流式细胞仪检测观察二甲双胍对786-O细胞凋亡的影响,通过免疫印迹检测AMPK信号及Caspase 9表达探讨可能分子机制。结果二甲双胍能够诱导786-O在低浓度血清环境凋亡,激活Caspase 9,二甲双胍能够激活786-O细胞中AMPK信号,但与其凋亡诱导效应无关。结论二甲双胍能够诱导肾癌细胞在低浓度血清环境凋亡,具有潜在治疗肾癌作用。
- 李明刘俊胡卫列贾春宏李海燕温芝华邹志鹏白晓春罗深秋
- 关键词：二甲双胍肾细胞癌细胞增殖细胞凋亡AMPK
- FKBP38的原核表达、抗体制备及其应用
- 2010年
- 目的构建人FKBP38 N-末端及C-末端原核表达载体并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化基因表达产物,制备兔多克隆抗体并对该抗体用于Western免疫印迹、免疫荧光及免疫组织化学检测进行评价,为研究FKBP38的功能奠定基础。方法以人FKBP38 cDNA为模板,根据人FKBP38全长cDNA系列,设计PCR引物分别扩增N-末端(1-207aa)及C-末端(209-387aa),将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-6P1中,经BamH I/Sal I双酶切鉴定。GST-FKBP38-N及GST-FKBP38-C融合蛋白在硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下在大肠杆菌BL21中得到表达。利用谷胱甘肽亲和层析纯化融合蛋白,用纯化的GST-FKBP38-N融合蛋白及GST-FKBP38-C融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体并进行纯化。使用纯化的抗FKBP38多抗以Western免疫印迹、免疫荧光及免疫组织化学检测FKBP38的表达与细胞内的定位。结果成功构建FKBP38 N-末端及C-末端原核表达载体,表达并纯化了GST-FKBP38-N融合蛋白及GST-FKBP38-C融合蛋白,制备并纯化了FKBP38特异性抗体。该抗体用于Western免疫印迹检测FKBP38在不同细胞株中的表达,特异性强、效价高;用于免疫荧光检测FKBP38在细胞内主要定位于线粒体上;用于免疫组织化学检测FKBP38在乳腺组织细胞呈现胞浆阳性。结论 FKBP38特异性抗体制备成功,该抗体可用于FKBP38的免疫印迹、免疫荧光及免疫组织化学检测,为深入研究FKBP38的功能奠定基础。
- 刘安玲赵莉Ma Dong-zhu贾春宏李明温芝华叶永斌
- 关键词：多克隆抗体免疫荧光免疫组织化学
