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Cecropin-X发酵过程中工程菌质粒稳定性的研究被引量：9: 2004年; 通过连续斜面转接实验 (5 0次 )检测重组Cecropin X工程菌质粒的结构稳定性 ,采用 30L自动控制发酵罐观察不同培养基 ,有无选择压力和溶氧高低等培养条件对质粒分裂稳定性的影响。结果表明 ,该工程菌质粒具有结构稳定性和分裂不稳定性。当外源蛋白表达时 ,便会出现分裂不稳定性 ,表达量越高 ,质粒丢失情况越严重。经1 2h的培养 ,当采用TB和 2×LB作为发酵培养基时 ,带质粒的菌为 6 8 5 %和 98 0 % ,包涵体得率有很大差异 ,干重分别为 1 2 4和 0 4 0g L。发酵培养基中 (TB)氨苄青霉素浓度为 0和 1 0 0 μg mL时 ,带质粒的菌为 6 8 5 %和 92 0 % ,包涵体得率基本一致 ,干重分别为 1 2 4和 1 2 0g L。通过改变搅拌速度来调节溶氧量 ,当转速为 1 5 0和 2 5 0r min时 ,带质粒的菌为 6 8 5 %和 1 0 0 % ,包涵体得率有较大差异 ,干重分别为 1 2 4和 0 71g L。; 邱英华沈益王玉海徐贤秀董雪吟张洪祖; 关键词：发酵质粒稳定性

羟基喜树碱纳米乳的制备及其抗癌作用初步研究被引量：29: 2005年; 目的制备羟基喜树碱纳米乳注射液,初步研究其抗癌作用。方法运用相变温度法制备羟基喜树碱纳米乳注射液,以MTT法测定羟基喜树碱纳米乳注射液与羟基喜树碱注射液对小鼠S180癌细胞的抑制作用,并比较了它们对小鼠移植瘤Heps抑制作用。结果羟基喜树碱纳米乳注射液与羟基喜树碱注射液对小鼠S180癌细胞的IC50分别为131和455μmol/L;与羟基喜树碱注射液组相比,羟基喜树碱纳米乳注射液抑制Heps的肿瘤生长作用可增加145%(P<005)。结论羟基喜树碱制备成纳米乳注射液后大大提高了其抑制癌细胞的能力。; 龚明涛张钧寿沈益; 关键词：羟基喜树碱纳米乳药效学抗癌作用 HCPT

抗菌肽cecropin-Xm在大肠埃希菌中的串联表达与抑瘤作用被引量：4: 2007年; 在TNFα基因3′端连接抗菌肽cecropin-Xm基因多拷贝串联体,与温度诱导的表达载体pRCs组成表达载体pRCs-TNFα-(cecropin-Xm)n(n=1,2,3),并在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白TNFα-(cecropin-Xm)n(n=1,2,3)。SDS-PAGE结果显示,在同样表达条件下应用BL21(DE3)/pRCs-TNFα-(cecropin-Xm)2表达系统可获得比BL21(DE3)/pRCs-TNFα-cecropin-Xm系统多出一倍的目的物cecropin-Xm。融合蛋白经CNBr切割后用CM52纤维素柱分离纯化得到纯度大于95%的具有抑菌活性的抗菌肽cecropin-Xm,体外MTT抑瘤实验表明cecropin-Xm具有广谱杀灭肿瘤细胞的作用并且对正常细胞影响极小。; 沈益劳学刚耿伟张洪祖徐贤秀; 关键词：抗菌肽抑瘤作用

溶氧对杀菌肽-X发酵工艺的影响被引量：2: 2004年; 本研究采用 30L自动控制发酵罐研究了重组杀菌肽 X工程菌的基本发酵条件。经 12h发酵培养 ,发酵培养基中氨苄青霉素浓度为 0和 10 0 μg mL时 ,包涵体得率基本一致 ,干重分别为 1 2 4和 1 2 0g L ;控制溶氧为 2 0 %～30 %和溶氧自然变化 (转速分别为 2 5 0和 15 0r min)的条件下 ,包涵体得率有较大差异 ,干重分别为 0 0 5、0 71和1 2 4g L。在较优化的发酵条件下 ,目的融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 4 5 %～ 5 0 %。; 邱英华沈益王玉海董雪吟张洪祖徐贤秀; 关键词：发酵溶氧包涵体

杀菌肽－X的发酵工艺: 本发明公开了一种杀菌肽－X的发酵工艺。本发明通过选择用于发酵的菌种种龄和优化培养基，使融合蛋白得到高表达，最终每升发酵液可获得包涵体5.05g，其中融合蛋白的含量＞80％。本发明是一种稳定、高表达并适于工业化生产的杀菌肽...; 沈益劳学刚张洪祖徐贤秀; 文献传递

抗菌肽Cecropin-X的表达纯化及其性质研究: 抗菌肽Cecropin-X是一种带正电荷的抗菌小肽，由36个氨基酸残基组成，不含甲硫氨酸和半胱氨酸，末端酰胺化。初步实验证明Cecropin-X对多种鼠源和人源肿瘤细胞有明显的抑制作用。为了更好地评价抗菌肽Cecropi...; 沈益; 关键词：融合蛋白基因表达

杀菌肽－X纯化工艺: 本发明提供了一种杀菌肽－X纯化工艺，通过本发明工艺可制得稳定高纯度的水溶性杀菌肽－X。将此杀菌肽－X应用于初期抗恶性肿瘤的体外细胞实验和体内的动物实验，证明杀菌肽－X疗效明显，且重复性极好。本工艺主要解决了发酵后包涵体纯...; 沈益劳学刚张洪祖徐贤秀; 文献传递

基于业务路由器10G接口的合法监管技术研究与实现: Internet为用户提供了最为开放的工作平台，网络仅仅是为用户提供了透明的通道，用户在获得最大使用网络自由度的同时，用户信息对网络却是不透明的。Internet的这种安全理念，使得网络攻击、网络犯罪成本极低，网络潜在的...; 沈益; 关键词：业务路由器网络监管分布式架构

抗菌肽-X基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：6: 2003年; 用PCR技术获得抗菌肽-X基因、TNFα基因,与温度诱导的表达载体pRC连接成为重组表达载体,导入大肠杆菌TG1,通过温度诱导表达重组蛋白。将重组质粒转入不同的表达菌中进行表达,经SDS-PAGE选出E.coliBL21(DE3)为最佳表达的宿主菌。培养后,离心得菌体,经超声破碎离心得包涵体,溶解后用CNBr切割并透析,最后经CM52纤维素柱分离纯化得到有活性高纯度的抗菌肽-X。; 沈益邱英华劳学刚张洪祖董雪吟徐贤秀; 关键词：克隆大肠杆菌

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沈益