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shRNA干扰COPS3基因对人成骨肉瘤细胞的影响被引量：1: 2017年; 目的:探究shRNA干扰COPS3基因对人成骨肉瘤细胞基因水平、蛋白水平、增殖能力等方面的影响。方法:选择人成骨肉瘤Saos-2细胞,感染pLKO.1-COPS3shRNA病毒质粒作为Saos-2siCOPS3细胞(实验组),感染pLKO.1-TRC control病毒质粒作为Saos-2CON细胞(对照组),感染成功后进行细胞培养,收集细胞用RT-PCR测定COPS3基因mRNA表达量,Western blot检测蛋白表达水平,MMT测定细胞增殖能力,对裸鼠接种细胞悬液进行裸鼠成瘤试验。结果:Saos-2siCOPS3细胞中,COPS3基因mRNA表达水平与对照组相比下降(P<0.05),蛋白表达水平、细胞增殖能力与对照组相比下降(P<0.05),干扰COPS3基因与对照组相比抑制肿瘤体积、重量增加(P<0.05)。结论:COPS3调控骨肉瘤细胞的增殖与骨肉瘤的发生、发展密切相关。; 陈军金雪荣王翔杨静曹卓苏海川; 关键词：慢病毒感染

Ese-3基因对皮肤角质形成细胞增殖的影响: 2017年; 目的:研究表皮特异性转录因子Ese-3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及靶向沉默Ese-3基因表达对皮肤角质形成细胞Ha Ca T细胞增殖的影响。方法:免疫组化方法检测Ese-3在皮肤鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达。利用慢病毒干扰系统感染Ha Ca T细胞,建立Ese-3基因敲减的Ha Ca T细胞系,MTT实验检测Ese-3敲除后细胞增殖的变化,流式细胞术检测Ese-3敲减后对细胞周期的影响。结果:免疫组化结果显示,Ese-3在皮肤鳞状细胞癌组织中表达显著低于癌旁皮肤组织。MTT和流式细胞术结果显示,下调Ese-3表达后,Ha Ca T细胞增殖加快,S期细胞增多,G0-G1期细胞和G2/M期细胞减少。结论:Ese-3在皮肤鳞状细胞癌中表达降低,抑制Ese-3基因表达可促进Ha Ca T细胞生长,提示Ese-3表达缺失可能通过促进细胞恶性增殖进而促进皮肤癌的发生发展。; 金雪荣宋扬王翔杨静李俊强苏海川; 关键词：皮肤鳞状细胞癌细胞增殖 HACAT细胞

人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响: 目的通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡...; 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春孙聪杨静杨彤涛周勇马保安; 关键词：慢病毒骨肉瘤

Ese-3在结肠癌组织中的表达及意义被引量：7: 2015年; 目的:探讨上皮转录调控因子-3(epithelium-specific Ets transcription factor-3,Ese-3)在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测76例结肠癌组织及癌旁组织标本中Ese-3的表达,分析其表达与患者临床病理特征之间的关系。结果:Ese-3表达于细胞核中。Ese-3蛋白在癌旁正常组织中的表达明显高于相应结肠癌中的表达。在结肠癌组织中Ese-3表达与病理分期(P=0.005)、肿瘤分化程度(P=0.0006)有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:Ese-3基因表达的缺失或下调可能促进了结肠癌的发生。; 聂娜宋杨杨静郑蕾冯英明苏海川; 关键词：结肠癌免疫组织化学

结肠癌细胞中Ese-3对树突状细胞分化成熟的影响被引量：3: 2018年; 目的:利用体外共培养实验,观察结肠癌细胞SW480中上皮特异性转录因子Ese-3表达水平的改变对树突状细胞(dendritic cell,DC)分化成熟的影响。方法:利用慢病毒系统获得过表达Ese-3的结肠癌细胞SW480(SW480 Ese-3)及其对照细胞株(SW480 NC)。利用磁珠分选方式,从人外周血单个核细胞(PBMC)中获得CD14^+细胞,经rh GM-CSF、rhIL-4刺激获得不成熟的DC(iDC)。通过Transwell小室将SW480Ese-3和SW480 NC细胞分别与iDC进行间接共培养。流式细胞术检测共培养后的DC细胞中HLA-DR、CD14、CD83、CD86的表达。ELISA检测细胞培养上清中IL-12 p70的水平。结果 :SW480 Ese-3/DC共培养组DC细胞表面标志物HLA-DR、CD83、CD86水平,较SW480 NC/DC共培养组升高,CD14水平降低;SW480Ese-3/DC共培养组上清中IL-12 p70水平较对照组升高。结论 :在体外共培养实验中,SW480细胞过表达Ese-3可促进DC细胞分化成熟。; 王翔金雪荣宋扬杨静李俊强苏海川; 关键词：树突状细胞结肠癌分化成熟肿瘤免疫逃逸微环境

外伤性梨状窝颈部纵隔瘘一例报告: 目的：提高对外伤性梨状窝颈部纵隔瘘的认识。方法：报告1例外伤性梨状窝颈部纵隔瘘病例，并结合文献讨论其诊治要点。结果：手术后第二天患者体温下降至正常，气管套管堵管呼吸可。术后5天拔除引流管。一周后复查碘油造影检查显示窦道消...; 杨静崔鹏程高鹏飞徐华梅郭志华罗家胜; 关键词：手术治疗创伤愈合; 文献传递

人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响: 2014年; 目的:通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染人骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,为探索microRNA-194作为骨肉瘤生物治疗的新靶点提供理论和实验依据。方法:构建沉默及过表达microRNA-194的慢病毒载体;获得稳定感染的细胞株,改变细胞增殖相关生物学特性。结果:PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确,过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml;microRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞增殖速度相较于其对照组明显上升;过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞增殖速度显著下降(P<0.01)。MicroRNA-194沉默的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞凋亡率相较于其对照组明显下降,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。与对照组比较,过表达microRNA-194的SOSP-9607细胞周期G0/G1细胞比例显著增加,G2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。结论:成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体;miR-194的表达水平对SOSP一9607细胞的增殖和凋亡造成显著影响。MicroRNA-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点,但该基因对骨肉瘤发生发展的作用及其机制尚待进一步研究。; 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春孙聪杨静杨彤涛周勇马保安; 关键词：慢病毒骨肉瘤

人microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒载体的构建及对人骨肉瘤细胞系SOSP-9607生物学特性的影响: 目的通过构建携带针对microRNA-194的shRNA载体及过表达载体,包装慢病毒,感染入骨肉瘤细胞系SOSP-9607,改变细胞内microRNA-194基因的表达水平,研究microRNA-194对细胞增殖、凋亡...; 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春孙聪杨静杨彤涛周勇马保安

化疗联合DC-CTL治疗不同分期非小细胞肺癌的疗效分析: 2017年; 目的:分析化疗联合树突状细胞诱导的细胞毒性T淋巴细胞(dendritic cells and cytotoxic lymphocytes,DC-CTL)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效及安全性。方法:收集我院2013年5月至2015年12月期间住院病理确诊为Ⅰb(具有高危因素)、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb、Ⅳ期的NSCLC患者114例,其中接受肺癌根治术的患者分为术后化疗联合DC-CTL组20例和术后化疗组32例,未行手术患者分为化疗联合DC-CTL组23例和化疗组39例。回顾分析了114例患者的临床特点、疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位无疾病生存期(median-disease free survival,M-DFS)、中位无进展生存期(medianprogression free survival,M-PFS)、副作用等资料。随访截止至2016年11月。结果:1年DCR:术后化疗联合DC-CTL组(75.0%)vs术后化疗组(43.8%)(P=0.044)。M-DFS:术后化疗联合DC-CTL组(19.5个月)与术后化疗组(11.5个月)相比,差异具有明显统计学意义(P=0.025 5)。化疗联合DC-CTL治疗与化疗组相比,DCR及M-PFS不具有统计学差异。DC-CTL治疗的副作用显著低于化疗。结论:术后化疗联合DC-CTL治疗可显著提高DCR及延缓NSCLC患者的疾病进展,且安全性高。; 刘泽杰宋沂林杨静李俊强冯英明苏海川; 关键词：非小细胞肺癌化疗细胞毒性T淋巴细胞树突状细胞

MicroRNA-194过表达与抑制表达慢病毒载体的构建及对骨肉瘤细胞转染与筛选的方法学研究: 2014年; 目的:构建针对人microRNA-194过表达及抑制表达的慢病毒表达载体,寻找与探讨感染人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os的最佳步骤和方法。方法:利用PCR方法调取相应目的基因进行酶切,经电泳回收后与目的基因进行连接,产物转化细菌感受态细胞,对克隆进行PCR鉴定和测序对比分析后,构建相应microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体;在人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os转染及筛选过程中,根据不同阶段及浓度设定相应实验组,并设相应对照组。倒置显微镜观察转染效率,筛选情况,进行比较。结果:PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确。过表达及抑制表达重组慢病毒的滴度分别为1.5×108TU/ml及4×108TU/ml。感染复数(multiply of infection,MOI)值测定,实验组及对照组转染效率无明显差异,获得MOI值及感染时间数据。通过新的综合设计,经筛选后获得转染效率满意的目的克隆细胞。结论:成功构建了microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体,并通过新的综合考虑设计,对人骨肉瘤细胞系SO-SP-9607和U2-os进行转染和筛选后,可较快和较高效率获得满意目的细胞。; 韩康赵廷宝卞娜蔡成魁颜世举王鑫肖春孙聪杨静杨彤涛周勇马保安; 关键词：慢病毒骨肉瘤嘌呤霉素

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杨静

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