杨建明
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目云南省高端科技人才引进计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 出口秦岭羚牛检疫
- 2011年
- 按照《中华人民共和国向日本出口展览用羚牛的卫生要求》,我们对赠送日本的4头秦岭羚牛实施为期90天的隔离检疫,并完成了对口蹄疫、蓝舌病、牛肺疫等12种疫病实验室检疫工作,4头羚牛检疫合格,均符合日本提出的要求,于2011年1月25日由西安咸阳机场启程到日本落户。
- 蒋宏伟陈茂盛周晓黎李剑董俊叶玲玲艾军马玉玲吴双民杨建明
- 关键词：野生动物羚牛出口检疫
- 非洲马瘟检疫技术研究
- 徐自忠花群义周晓黎董俊杨建明杨云庆秦智锋吕建强
- 该课题研究已按照合同规定的研究内容和考核指标，完成了项目的主要研究任务，达到了预期目标：1、成功构建了AHSV VP7蛋白和NS3非结构蛋白克隆载体及表达载体并进行了高效表达。本研究用合成的AHSV VP7基因为研究对象...
- 关键词：
- 关键词：马瘟基因检疫
- 小反刍兽疫病毒N基因的克隆及原核表达被引量：6
- 2008年
- 根据小反刍兽疫病毒疫苗株Nigeria75/1的全基因序列,通过PCR方法,将N基因亚克隆入pBAD/TOPO表达载体,构建了原核表达质粒pBAD-PPRN。该重组质粒转化至大肠埃希菌TOP10中,经L-Arabinose诱导,SDS-PAGE和Western blot检测,表达的重组N蛋白分子质量与预期的73.6ku一致,为以小反刍兽疫N蛋白为抗原的诊断试剂盒研制奠定了基础。
- 艾军杨建明叶玲玲杨晓花张其艳董俊孙洪正周晓黎
- 关键词：小反刍兽疫N基因原核表达
- 猴B病毒gB基因在昆虫细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的研发猴B病毒ELISA检测试剂盒中替代全病毒的抗原。方法根据已报道的猴B病毒E2490株gB蛋白基因序列(GenBank登录号:AF533768)人工合成gB基因,通过XbaⅠ和EcoRⅠ特异性酶切,将gB基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,经PCR、酶切、测序鉴定后,成功构建了携带gB基因的重组质粒pFastBac-HTa-gB。结果该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10BAC感受态细胞,经抗生素、PCR筛选,获得转座的杆粒bacmid-gB。在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,细胞变大变圆细胞核扩大,收获重组杆状病毒,再感染细胞,收获目的蛋白。通过SDS-PAGE和Western blot分析及间接免疫荧光检测,结果表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物活性,大小约为98kDa。实验结果表明已成功构建了携带目的基因的重组质粒pFastBac-HTa-gB和转座的杆粒bacmid-gB,转染后在sf9昆虫细胞上得到表达。结论研究结果为下一步以表达的gB蛋白为诊断抗原,替代现阶段以病毒作为抗原的猴B病毒ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 段博芳王琼段纲毛永杨叶玲玲杨建明徐维加董俊周晓黎艾军
- 关键词：GB基因昆虫细胞
- 六种重要动物外来病早期快速检测试剂盒研发
- 花群义徐自忠周晓黎董俊杨建明杨云庆秦智锋吕建强詹爱军张鹤晓张常印唐泰山乔彩霞姜焱
- 该课题主要研究了六种重要动物外来病的快速检测方法，在无可获得病原体的情况下，采用病毒基因人工合成、基因克隆、蛋白质表达、纯化、ELISA检测方法研究、胶体金标记检测试纸条研制、RT－PCR、多重RT－PCR、实时荧光定量...
- 关键词：
- 关键词：动物诊断试剂盒实时荧光定量PCR
- 小反刍兽疫病毒N基因在昆虫细胞中的表达被引量：6
- 2011年
- 为了研发小反刍兽疫病毒ELISA检测试剂盒中替代全病毒的抗原物质,参照GenBank公布的小反刍兽疫疫苗株Nigeria75/1的全基因组序列(GenBank登录号:X74443),人工合成表达核蛋白的N基因开放阅读框序列,通过PCR扩增、经引物设计引入的EcoRⅠ和KpnⅠ特异性酶切位点,将N基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,阳性重组质粒命名为pFastBacHTA-PPRV-N,测序结果显示N基因片段长度为1 578bp。将该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒Bacmid-PPRV-N,将该重组穿梭质粒在脂质体介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blot分析表明该蛋白得到表达产物,具有与抗体反应的活性,大小约为61.3ku。
- 龙云凤祝贺杨建明陈朝银徐维佳周晓黎董俊叶玲玲艾军
- 关键词：小反刍兽疫病毒N基因昆虫细胞
