徐自忠
- 作品数：51 被引量：289H指数：11
- 供职机构：云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金昆明市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达
- 为了探讨AKAV N基因结构及其与功能的关系,本文采用pBAD/TOPO原核表达系统首次对AKAV病毒核蛋白进行了表达,核蛋白以硫氧还蛋白融合蛋白的形式在大肠杆菌细胞周质空间中,以可溶性形式高效表达,融合蛋白有完全生物学...
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰贾建军周晓黎徐自忠
- 关键词：赤羽病病毒融合蛋白基因克隆
- 文献传递
- 水泡性口炎病毒核蛋白基因的克隆和序列分析
- 水泡性口炎(Vesicular stomatitis,VS)是由弹状病毒科水泡病毒属的水泡性口炎病毒(VSV)引起的人畜共患的重大动物疫病。分为印第安纳(Indiana,IN型)和新泽西(New Jersey,NJ型)两...
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰周晓黎徐自忠
- 文献传递
- 猪瘟的分子生物学诊断被引量：13
- 2002年
- 采用RT PCR方法 ,从经临床和血清学初步诊断为猪瘟的病料中扩增了猪瘟病毒 (CSFV)的E2基因某一片段 ;对扩增片段进行序列测定 ,通过DNAsis软件构建了系统发生树 ,确定了这一流行株 (IPI株 )在系统发生树中的位置。结果表明 ,从IPI株和石门株 (Shimen)中均扩增出 2 71bp目标片段 ,这一流行株与我国 2 0世纪 90年代以来流行的绝大多数CSFV毒株同属于基因 2群中的 2 .1基因亚群 ,与YN1、YN2、GX4、GZ1的关系较近 ,而与Shimen株、兔化弱毒株 (HCLV)等我国传统的标准毒株相距较远。这一结果为猪瘟的诊断和检疫提供了一种特异。
- 贾建军李文贵李爱云董俊覃宇悦周晓黎涂长春徐自忠
- 关键词：猪瘟分子生物学诊断猪瘟病毒RT-PCR核苷酸序列系统发生树
- 非洲猪瘟预警系统与快速检测技术
- 花群义徐自忠周晓黎秦智锋吕建强董俊杨建明杨云庆詹爱军林庆燕曾少灵阮周曦陈兵陶虹
- 该课题研究已按照合同规定的研究内容和考核指标，完成了项目的主要研究任务，达到了预期目标：1、根据Genebank中非洲猪瘟VP73基因序列，人工合成的VP73全基因克隆至pMD 18-T克隆载体质粒中，再进行亚克隆插入p...
- 关键词：
- 关键词：非洲猪瘟预警系统
- 小反刍兽疫病毒新型实用快速检测技术
- 刘胜利花群义卢体康秦智锋徐自忠吕建强林庆燕周晓黎曾少灵詹爱军阮周曦陈兵孙洁曹琛福张彩虹
- 小反刍兽疫（PPR）是一种严重的烈性、接触性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为A类动物传染病，在我国被列为一类动物传染病。感染后发病率100%，严重暴发期致死率100%。2003年以来我国周边的老挝、孟加拉国、印度...
- 关键词：
- 关键词：小反刍兽疫病毒疫病
- 应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒被引量：23
- 2005年
- 按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L 的引物浓度和 2 0 0 nmol/ L 探针浓度 ,获得的 CT值较小 ,而 ΔRn最大 ;可检测到相当于 0 .1 TCID50 的病毒 RNA;与 VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应 ;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系 ,且线性范围宽 ,相关系数为 0 .984 ;组内和组间试验重复性的变异系数 (CV)分别为 5 .4 %和 6 .7% ;与常规 RT- PCR相比较 ,该方法具有快速、特异、敏感、可定量 。
- 花群义金宁一周晓黎董俊杨云庆徐自忠
- 关键词：口蹄疫病毒荧光定量RT-PCR口蹄疫
- 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达被引量：22
- 2003年
- 为获得赤羽病病毒 (Akabanevirus ,AKAV )的核蛋白重组抗原 ,根据其基因序列(SmRNA)设计合成了 1对特异性引物 ,对AKAVN基因进行RT PCR扩增 ,产物大小约为 6 96bp ,回收纯化后 ,将其克隆至 pMD18 T质粒载体中 ,经核苷酸序列分析 ,与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的SmRNA基因比较后发现 ,所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达 98.3% ,推测的氨基酸同源性为 97.6 % ,证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体 ,转化TOP10细胞 ,成功地构建了AKAVN基因重组表达载体。经L araboinose诱导表达 ,可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白 ,分子质量约 4 2 .5ku ,其表达产量约占菌体总蛋白的 2 8% ,融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原 。
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰贾建军周晓黎徐自忠
- 关键词：赤羽病病毒N基因核蛋白基因基因序列
- 水泡性口炎病毒核蛋白基因的克隆和序列分析
- 本文克隆了编码群特异性抗原的N基因,并进行核苷酸序列测定.为VS的血清学、分子流行病学调查和新型疫苗构建奠定基础.
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰周晓黎徐自忠
- 关键词：水泡性口炎病毒核蛋白基因克隆
- 文献传递
- 空肠弯杆菌研究现状
- 2005年
- 空肠弯杆菌是一种人兽共同感染的病原菌,也是导致腹泻最常见的病菌,主要症状是发热和急性肠炎。主要从病原的生物学特征、肠毒素的研究、人畜带菌率及流行病学的研究现状进行综合讨论。
- 陈晓莹徐自忠高洪花群义周晓黎
- 关键词：空肠弯杆菌主要症状急性肠炎带菌率生物学特征病原
- 羊痘病毒P32蛋白编码基因的克隆、测序及表达载体的构建
- 为获得羊痘病毒(Capripoxvirus,CaPV)膜蛋白重组P32抗原,根据其基因序列(DNA)设计合成了1对特异性引物,对CaPVP32基因进行PCR扩增,产物大小约为969bp,回收纯化后,将其克隆至pBAD/T...
- 康文玉徐自忠花群义高洪杨云庆周晓黎董俊尹尚莲
- 关键词：羊痘病毒P32基因
- 文献传递
