公共文化服务平台

重组芋螺毒素GeXIVAWT的表达、纯化和鉴定被引量：5: 2012年; 芋螺毒素GeXIVAWT是来自食虫将军芋螺(Conus generalis Lonnaeus)毒管中,具有两对二硫键的28肽。通过化学合成这种芋螺毒素产量低、成本高、难以纯化。利用简单快速的重组表达来生产富含二硫键的芋螺毒素有可能成为有效的新途径。通过对芋螺毒素GeXIVAWT的基因进行密码子优化,人工合成引物来构建表达载体pET22b(+)/pelB-GeXIVAWT。融合了信号肽的重组芋螺毒素以包涵体的形式在大肠杆菌中获得了高效表达。利用低浓度尿素洗涤和超滤管进行纯化无组氨酸标签的重组芋螺毒素pelB-GeXIVAWT,再利用稀释复性的方法将无活性的包涵体转变成具有活性的重组芋螺毒素。复性后的重组蛋白采用反相高效液相色谱进一步纯化后进行了质谱鉴定。活性实验表明重组芋螺毒素pelB-GeXIVAWT具有抑制昆虫细胞Sf-9的生长,为研究芋螺毒素作为生物杀虫剂奠定基础。; 高炳淼李宝珠吴勇林波朱晓鹏长孙东亭罗素兰; 关键词：芋螺毒素大肠杆菌分离纯化生物杀虫剂

芋螺毒素多肽的体内活性评价: 实验目的与意义:比较观察各种芋螺毒素肽颅内注射对幼鼠的行为学影响,初步评价各种多肽的体内活性。材料和方法:1.将冻干分装的芋螺毒素肽在注射前用生理盐水溶解,配制成不同浓度的芋螺毒素注射液;2.所用幼鼠均为12～14日龄,...; 邴晖胡远艳李宝珠于海鹏罗素兰; 文献传递

钠离子通道研究进展被引量：11: 2012年; 细胞电活动是生命现象的基本特征之一,而离子通道是其结构和功能的基础。因此,研究离子通道作用机制具有重大的理论和现实意义。许多神经系统和心血管疾病,如多发性硬化症、癫痫、脑溢血、神经痛、Brugada综合征(BrS)、进行性心脏传导缺陷(PCCD)和原发性心室纤颤(IVF)等,都与钠离子通道氨基酸序列和结构发生的改变有关。该文对钠离子通道的研究进展进行综述。; 李宝珠高炳淼吴勇于津鹏吴潇洒长孙东亭罗素兰; 关键词：钠离子通道研究方法

新型α-芋螺毒素基因的克隆: 实验目的与意义:本研究旨在从我国海南产的芋螺种类中,通过分子生物学方法,获取新型α-芋螺毒素,为发现和研究新的α-芋螺毒素的结构与功能奠定基础。; 郑晓冬朱晓鹏陈心唐天乐李宝珠罗素兰; 关键词：总DNA PCR扩增克隆; 文献传递

芋螺毒素多样性概述: 芋螺毒素与微生物的次生代谢产物和植物的生物碱一样,具有生物多样性的特点。芋螺毒素特有的二硫键骨架和化学修饰后特异的空间结构,使其具有特异的稳定性和药理学活性。根据近年来国内外研究人员对芋螺毒素的研究开发现状,概述了芋螺毒...; 李宝珠高炳淼郑晓冬吴爱银陈心吴勇长孙东亭罗素兰; 关键词：芋螺芋螺毒素多样性; 文献传递

芋螺毒素B179化学合成的研究: 实验目的和意义:芋螺毒素是由热带海洋生物芋螺分泌的、二硫键含量丰富的小分子肽,其结构新颖,功能独特,既可直接用作天然药物,又可以作为设计新药的先导化合物,并对研究离子通道具有重要意义。芋螺毒素B179是本实验室通过分子克...; 安婷婷王蕊李宝珠吴勇罗素兰; 文献传递

α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达被引量：2: 2011年; 建立以哺乳动物α3β4乙酰胆碱受体(nAChR)为分子靶标的药物筛选模型。将大鼠乙酰胆碱受体的α3与β4亚基基因分别进行体外转录,获得α3与β4亚基基因的cRNA,按1∶1的比例将适量α3与β4的cRNA混合后,显微注射到新鲜分离的非洲爪蟾卵母细胞中,在ND96溶液中、17℃下培养24 h后,通过双电极电压钳技术(TEVC)检测受体α3β4 nAChR的乙酰胆碱(Ach)门控电流。同时注入α3、β4 cRNA的非洲爪蟾卵母细胞孵育24h后,可记录到明显的Ach门控内向电流,未注射或只注射ddH2O的对照组细胞则没有任何电流产生。α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞膜上成功表达,以此为药物作用靶点,可用于大量生物毒素等物质的活性筛选实验模型。; 李宝珠陈心朱晓鹏胡远艳于海鹏邴晖长孙东亭罗素兰; 关键词：非洲爪蟾卵母细胞药物筛选模型

利用SMART技术构建疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库及芋螺毒素新基因的克隆被引量：4: 2012年; 利用RNA 5'末端移动反转录(switching mechanism at 5'end RNA transcription,SMART)技术构建及鉴定疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库,克隆新型芋螺毒素基因.提取疣缟芋螺毒管总RNA,用RT-PC反转录成单链cDNA(single-stranded cDNA,ss-cDNA),长距离PCR(long-distance PCR,LD-PCR)扩增合成双链cDNA(double-stranded cDNA,ds-cDNA),依次用蛋白酶K和SfiⅠ酶进行酶切孵育,用CHROMA SPIN-400柱进行分级分离.得到的ds-cDNA与λTripIE×2噬菌体载体体外连接并体外包装,感染大肠杆菌E.coli XL1-blue,测定原始文库滴度和重组率.进行文库扩增,测定扩增文库滴度.用PCR鉴定插入cDNA片段的大小,构建的疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体原始文库滴度为1.47×106pfu/mL,重组率为90.72%,扩增文库的滴度为4.07×108pfu/mL,插入cDNA片段为200～1 200 bp.利用SMART技术成功构建了疣缟芋螺毒管cDNA噬菌体文库并克隆出新型芋螺毒素基因,为芋螺毒素基因的筛选和鉴定奠定了基础.; 李宝珠高炳淼吴勇于津鹏吴潇洒罗素兰长孙东亭; 关键词：噬菌体 CDNA文库 SMART技术

乙酰胆碱受体α4β2亚型在非洲爪蟾卵母细胞中的表达被引量：2: 2012年; 通过建立乙酰胆碱受体α4β2亚型(α4β2 nAChR)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,以便以α4β2 nAChR为作用靶点进行药物筛选。将乙酰胆碱受体亚基基因α4、β2体外转录获得的cRNA,通过显微注射的方法注入非洲爪蟾卵母细胞,并对该受体的表达情况进行检测。结果显示,乙酰胆碱受体α4β2亚型在蛙卵细胞中获得了有效表达,记录到典型的ACh配体门控的离子通道内向电流。; 于海鹏李宝珠房立丛沈立姿朱晓鹏胡远艳张本长孙东亭罗素兰; 关键词：非洲爪蟾卵母细胞受体基因表达

PCR技术在海洋生物多肽毒素研究中的应用被引量：2: 2011年; 随着PCR反应技术的不断改进和完善,它们在现代科学研究、生产和生活检测中的应用也越来越广,并且极大程度上促进了基因工程和蛋白质工程的快速发展。就PCR技术在芋螺毒素、海蛇毒素、海葵毒素及水母毒素等海洋生物多肽毒素基因克隆研究中的应用作简要介绍。; 郑晓冬李宝珠彭超高炳淼朱晓鹏陈心长孙东亭罗素兰; 关键词：PCR技术芋螺毒素

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

李宝珠