朱坤
- 作品数:7 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 一株产细菌纤维素菌株及其分离鉴定及产量分析
- 本发明公开了一种产细菌纤维素菌株及其分离鉴定及产量分析。本发明提供了木驹形杆菌(komagataeibacter xylinus)BJ11,其保藏编号为CGMCC No.18442,该菌能够在发酵罐条件下生产细菌纤维素,...
- 毛贤军郭浩朱坤
- 文献传递
- 应用基因敲除快速构建大肠杆菌突变体改造脂肪酸代谢途径被引量:8
- 2013年
- 【目的】基因敲除技术是研究基因功能的重要手段。我们试图建立一种快速、高效的大肠杆菌基因敲除方法。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)BW25113单基因缺失体Keio文库,将经典的Red同源重组技术与P1噬菌体转导技术相结合,对E.coli MG1655脂肪酸代谢基因进行快速敲除。【结果】获得了大肠杆菌β-氧化途径的缺失菌株△fadD、△fadE和△fadD-△fadE;脂肪酸合成途径缺失菌株△fabH、△fabF和△fabH-△fabF。敲除fadD和fadE对生长情况没有影响;敲除fabH后,生长速度明显减慢;敲除fabF对生长几乎没有影响。FadD、FadE及双敲缺失体的脂肪酸含量18.2 mg/L、20.0mg/L和19.2 mg/L,略高于野生型17.5 mg/L;FabH、FabF及双敲缺失体的含量分别为12.6 mg/L、15.2 mg/L和11.2 mg/L,明显低于野生型。【结论】在单基因突变体文库基础上,利用P1噬菌体转导、Red同源重组和抗性基因消除进行基因敲除,简化了构建大肠杆菌单基因和多重突变体的方法。
- 曲璟秋刘翠花刘伟丰陶勇朱坤
- 关键词:大肠杆菌RED同源重组基因敲除脂肪酸含量
- 一种提高鼠李糖脂产量的铜绿假单胞菌及其构建方法
- 本发明涉及一种提高鼠李糖脂产量的铜绿假单胞菌及其构建方法。该菌株的A组中的基因表达量降低或丧失同时B组中的基因表达量升高;A组中的基因选自pslABCDEFGHIJKLMNO胞外多糖合成基因簇、pelABCDEFG多糖合...
- 朱坤于海英
- 文献传递
- 一种提高鼠李糖脂产量的铜绿假单胞菌及其构建方法
- 本发明涉及一种提高鼠李糖脂产量的铜绿假单胞菌及其构建方法。该菌株的A组中的基因表达量降低或丧失同时B组中的基因表达量升高;A组中的基因选自pslABCDEFGHIJKLMNO胞外多糖合成基因簇、pelABCDEFG多糖合...
- 朱坤于海英
- 一株产细菌纤维素菌株及其分离鉴定及产量分析
- 本发明公开了一种产细菌纤维素菌株及其分离鉴定及产量分析。本发明提供了木驹形杆菌(komagataeibacter xylinus)BJ11,其保藏编号为CGMCC No.18442,该菌能够在发酵罐条件下生产细菌纤维素,...
- 毛贤军郭浩朱坤
- 异油酸含量对铜绿假单胞菌群集运动能力的影响被引量:3
- 2015年
- 【目的】研究铜绿假单胞菌的脂肪酸组成对群集运动(swarming)的影响及可能的原因。【方法】通过双交换原理敲除铜绿假单胞菌PAO1脂肪酸合成的一个重要基因fab F,构建fab F缺失突变体;构建p UCP18Gm-fab F质粒大量表达Fab F,对缺失体进行回补。比较野生型、缺失体和回补后菌株的swarming能力。利用气相色谱分析野生型、缺失体和回补后菌株的脂肪酸组成变化,以揭示Fab F表达影响swarming能力的可能原因。【结果】获得了假单胞菌的fab F缺失突变体YFF-1,证实了fab F敲除后假单胞菌的swarming能力消失,fab F回补后细菌的swarming能力得以恢复。气相色谱结果显示,突变后脂肪酸组成发生明显变化,异油酸(C18:1Δ11)含量由33.6%急剧下降至8.9%,不饱和脂肪酸:饱和脂肪酸(USA:SFA)也由0.96下降至0.74;fab F回补后,异油酸含量恢复至20.9%,USA:SFA也上升至1.09。【结论】铜绿假单胞菌fab F基因的表达水平对细菌的swarming能力具有重要影响,突变体中异油酸含量的下降及脂肪酸不饱和程度的降低(尤其是异油酸含量的急剧下降),可能是YFF-1 swarming能力消失的重要原因。
- 于非非余祥勇于海英胡明杰曲璟秋朱坤王梅芳
- 关键词:铜绿假单胞菌群集运动
- 一种提高鼠李糖脂产量的基因工程方法及其专用菌株
- 本发明涉及一种提高鼠李糖脂产量的基因工程方法及利用所述方法制备的鼠李糖脂生产菌。本发明所述提高鼠李糖脂产量的基因工程方法包括以下步骤:1)构建pa3286基因编码的蛋白表达量增加的鼠李糖脂生产菌;2)在含有油脂的培养基中...
- 朱坤胡明杰于海英
- 文献传递