张璟
- 作品数：33 被引量：96H指数：5
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 硕士研究生分子生物学实验教学改革实践被引量：4
- 2014年
- 分子生物学实验是医学院校硕士研究生的一门重要课程。通过更新优化教学内容（重视科研设计、增设综合性大实验、更新实用新技术）、改进教学模式（强调实验前准备、教师资格及研究生素质培养）、完善考核方式（实验报告与实验总结、平时成绩与实验操作相结合），收到了良好的教学效果。
- 李霞张璟王秦豪茹懿张健药立波
- 关键词：分子生物学实验教学
- NDRG家族成员酵母双杂交诱饵载体的构建,表达及自激活检测被引量：3
- 2005年
- 目的:构建NDRG家族4个成员的酵母双杂交诱饵 载体,验证其在酵母中的表达并检测其自激活作用,为用酵母 双杂交方法寻找与NDRG家族相互作用的分子奠定实验基 础.方法:用PCR方法获得NDRG家族4个成员cDNA全长,将4个片段按正确读框插入酵母表达质粒PGBKT7中,经限 制性酶切鉴定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株AH109, Western验证4个分子的正确表达,用表型筛选法及颜色筛选 法检测其自激活作用.结果:构建了NDRG家族4个成员的 酵母双杂交诱饵载体,并在酵母中正确表达,除NDRG4 B外 NDRG1,2,3均无自激活作用.结论:NDRG1,2,3可以用酵母 双杂交方法钓取与之相互作用的分子.NDRG4 B由于有自激 活作用不能用于酵母双杂交的筛选.
- 张璟张健刘娜王立峰李霞刘新平药立波
- 关键词：诱饵载体酵母双杂交自激活作用
- 基于生物信息学的抑癌基因NDRG2相互作用蛋白预测及验证被引量：1
- 2013年
- NDRG2(N-Myc downstream regulator gene 2)是NDRG家族成员之一.以往研究表明,该家族与细胞的增殖和分化有关.而该分子参与的细胞信号通路及调节机制尚未阐明.本研究利用保守蛋白间相互作用(interologs)的生物信息学方法预测NDRG2相互作用分子,并通过免疫共沉淀(Co-IP)及His pull-down蛋白体外结合实验方法对预测结果进行验证.生物信息学软件预测和分析结果表明,细胞中存在多个可能与NDRG2发生相互作用分子.结合文献报道,从中选取了3个候选分子Gnb1、Rgs16及Rgs5进行分子生物学实验验证.Co-IP及His pull-down实验结果表明,3个候选分子中,Rgs5蛋白能够和NDRG2蛋白相互作用,而其它2个候选分子与NDRG2的相互作用未获得实验室方法的验证.研究结果表明,生物信息学分析与实验室验证相结合是一种高效省时的蛋白质相互作用研究策略.通过这种策略证实NDRG2可以与Rgs5蛋白相互作用,为后续NDRG2功能的研究提供了有效的线索.
- 牛天水刘学武李霞茹懿王秦豪张璟
- 关键词：生物信息学NDRG2蛋白质相互作用
- 生长因子诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的研究被引量：10
- 2002年
- 目的 建立一种体外分离兔骨髓间充质干细胞 (MSCs)的方法 ,诱导其表达软骨细胞表型。方法 抽取兔骨髓 ,经密度梯度离心和粘附分离得到MSCs。用生长因子诱导 ,观察细胞的增殖情况和软骨特异性基质的表达水平。结果 ①纤维粘连蛋白促进MSCs贴壁 ,可提高细胞分离率 ;②TGF β1 ,IGF Ⅰ和维生素C结合可促进MSCs增殖 ,表达软骨特异性的Ⅱ型前胶原mRNA和基质蛋白多糖成分。结论 ①密度梯度离心结合粘附分离可提高MSCs的分离效率。②TGF β1 ,IGF Ⅰ和维生素C结合诱导可促进MSCs增殖 。
- 尹战海曹峻岭刘淼张璟郑钧
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨分化MSCS
- 浅谈生物化学绪论课教学被引量：13
- 2008年
- 生物化学是一门非常重要的医学基础课。由于生物化学课的内容抽象、繁杂、枯燥，要掌握它需要有较好的有机化学基础知识，学生对生物化学课的学习普遍具有畏难情绪。讲好生物化学的绪论部分可以帮助学生树立学习生物化学的信心和激发他们的学习兴趣。结合生物化学绪论课的教学经验，笔者认为本节课可以通过对生物化学“是什么”、“学什么”、“为什么学”和“怎么学”这几个问题地讲解使学生明确学习目的，消除畏难情绪，培养他们学习生物化学的兴趣。
- 张璟尹战海李霞张健刘新平
- 关键词：绪论生物化学教学
- 多西紫杉醇和腺病毒介导NDRG2基因对人前列腺癌细胞株DU145的协同作用
- 2012年
- 目的观察携带NDRG2基因的腺病毒（Ad．NDRG2）与多西紫杉醇（DT）联合给药对人前列腺癌细胞株DUl45的抗肿瘤增效作用。方法以Ad．NDRG2感染体外培养的DUl45细胞，采用Western—blot方法检测CyclinDl、CyclinE、NDRG2蛋白表达水平的变化。流式细胞仪检测和MTT试验分析Ad-NDRG2给药后DUl45细胞对DT敏感性的变化。建立裸鼠移植瘤模型，观察Ad—NDRG2与DT联合给药的体内抗肿瘤作用。结果Ad-NDRG2感染后，DUl45细胞中NDRG2表达明显增加，而CyclinDl和CyclinE表达水平降低。Ad—NDRG2协同10。mo]／L以上浓度DT作用48h，可增强对DUl45细胞的生长抑制作用（抑制率：41．8％，t=4．18，P〈0．01），增强诱导凋亡作用（凋亡率=32．4％，）（2=11．66，P〈0．05），并且使DT所致的G2／M期细胞比例由50．2％变为23．6％，部分逆转了其G2／M期阻滞。动物实验表明：DT组、Ad．NDRG2组、Ad．NDRG2与DT联合给药组其移植瘤的抑瘤率分别为30．7％、28．2％和55．8％，两药相互作用指数（CDI）为0．89。结论腺病毒介导NDRG2基因感染细胞后，增加了人前列腺癌DUl45细胞在体内及体外对多西紫杉醇的敏感性。
- 高磊于垂恭李瑞晓张璟袁建林武国军王禾
- 关键词：前列腺肿瘤前列腺肿瘤肿瘤药理学细胞周期蛋白质类药理学
- MSP58基因小干扰RNA对胶质瘤细胞系U251增殖的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察核微球蛋白58(MSP58)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对神经胶质瘤U251细胞的体外增殖的影响。方法体外化学合成针对MSP58基因的siRNA,脂质体法转染神经胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察转染效率,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测MSP58基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基四唑法(MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期。结果MSP58基因的特异性siRNA转染U251细胞后,MSP58的mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞增殖受到明显抑制;流式细胞仪检测显示转染后的U251细胞G2/M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞略有减少,G1期细胞明显增加(P<0.01),G1期发生明显阻滞。结论MSP58基因的特异性siRNA可明显抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖,并引起G1期细胞阻滞。
- 王江林伟章翔张璟张健吴琳刘新平药立波
- 关键词：SIRNA神经胶质瘤
- 医学生物化学与分子生物学教学的多与少
- 药立波赵晶张璟
- N—MYC下游调节基因-2对膀胱癌细胞T24增殖的抑制作用
- 2012年
- 目的观察抑癌基因N—MYC下游调节基因-2（NDRG2）在不同膀胱癌细胞株的表达水平及对T24细胞体外增殖的抑制作用。方法采用Westernblot及逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测3种膀胱癌细胞及正常上皮组织细胞的NDRG2表达，使用pAD—CMV腺病毒感染的方法观察NDRG2对T24细胞的作用，乳糖操纵子z（Lacz）为阳性对照，并设空白对照，流式细胞仪（FCM）连续检测细胞的周期及凋亡。结果3种膀胱癌细胞株的NDRG2表达水平相对较低，其中T24细胞表达水平最低，FCM检测显示，感染组同阳性对照组及空白组比较，细胞G，期阻滞[3组分别为（56．26±3．02）％、（50．394-3．13）％和（47．414-2．63）％]，细胞凋亡增加[3组分别为（12．06±1．33）％、（4．27±1．01）％和（2．454-0．86）％]。结论NDRG2基因可能参与了膀胱癌的发病，腺病毒介导的人NDRG2基因可抑制T24细胞的增殖。
- 李瑞晓于垂恭张璟袁建林武国军
- 关键词：膀胱肿瘤抑癌基因腺病毒
- 基于Gateway^(TM)系统Dec1慢病毒表达载体的构建被引量：2
- 2013年
- 目的利用GatewayTM技术构建分化型胚胎软骨发育基因1(Dec1)的慢病毒表达载体并建立稳定表达该目的基因的人胶质瘤U87细胞株。方法从人脑胶质瘤组织中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA。设计含有特异性酶切位点的引物,通过逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR),获得用于重组的Dec1目的基因全长。将目的片段克隆至入门载体(pENTRTM3C)中产生入门克隆。利用GatewayTM技术,将入门克隆中的目的片段转接于目的载体(pLenti6.3/V5-DEST)中产生表达克隆pLenti6.3-Dec1。在293T细胞中包装慢病毒表达载体pLenti6.3-Dec1并转染U87细胞,通过灭瘟素筛选、Western blot鉴定,获得稳定表达Dec1的U87细胞株。结果 Dec1基因全长的获取与慢病毒表达载体pLenti6.3-Dec1的构建经PCR和测序得到证实。用pLenti6.3-Dec1转染U87细胞后,通过灭瘟素筛选,获得稳定表达Dec1的U87细胞株。结论成功构建了pLenti6.3-Dec1慢病毒表达载体并建立稳定表达Dec1的人胶质瘤U87细胞株,为深入研究Dec1分子机制奠定了基础。
- 李晓明林伟章翔王江张璟张健韩腾龙药立波
- 关键词：慢病毒表达载体神经胶质瘤
