- HBV通过增强DNAJB4启动子活性调节其在HepG2．2．15细胞中的表达被引量：4
- 2009年
- 目的初步探讨HBV与DNAJB4基因的转录调节作用机制。方法用RT-PCR及Real—timePCR检测HepG2．2．15细胞和HepG2细胞中DNAJB4在mRNA水平上的表达差异。构建DNAJB4启动子虫荧光素酶报告质粒，分别与HBV、HBs、HBp、HBc、HBx表达质粒共转染HepG2细胞，比较虫荧光素酶活性。结果在mRNA水平上，DNAJB4在HepG2．2．15细胞中的表达量是其在HepG2细胞中表达量的2．59倍，且二者有显著性差异（P〈0．01）。DNAJB4启动子虫荧光素酶报告质粒与HBV表达质粒共转染组的相对荧光素酶活性是其对照组的2．28倍。转染HBs和HBc表达质粒组的相对荧光素酶活性分别是其对照组的2．11倍和1．77倍，而HBx、HBp表达质粒对荧光素酶活性没有影响。结论在HepG2．2．15细胞中，HBV能通过增强DNAJB4启动子活性增加DNAJB4转录水平的表达，其中HBs和HBc蛋白起主要作用。
- 张小花万涛张磊田园园黄婷婷汤华
- 关键词：乙型肝炎病毒HEPG2.2.15细胞基因表达与调控
- HBV通过增强RhoC的启动子活性提高其在HepG2.2.15中的表达
- 王李英田园园张磊任敏黄婷婷张小花黄爱龙汤华
- HBV影响HLJ1在HepG2.2.15中表达的机制研究
- 张磊田园园王李英任敏黄婷婷张小花黄爱龙汤华
- HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的研究HBV对肝癌细胞中AKR1C1基因表达的影响,并对其作用机制进行初步的探讨。方法RT-PCR和Real-time PCR检测HepG2.2.15和HepG2细胞中AKR1C1基因的差异表达情况;构建AKR1C1基因启动子虫荧光素酶报告质粒,并分别与HBV、HBx、HBs、HBp、HBc的表达质粒共转染HepG2细胞,双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶活性。结果AKR1C1基因在HepG2.2.15细胞中的表达高于HepG2细胞1.5倍;在HBV表达质粒与AKR1C1基因启动子虫荧光素酶报告质粒共转染的HepG2细胞中,虫荧光素酶的活性明显增强,为对照组3.37倍;相对HBs、HBp、HBc,HBx升高虫荧光素酶的活性的作用最强。结论HBV可以增强AKR1C1基因启动子的转录活性,促进AKR1C1在肝癌细胞中的表达,HBx在这一转录激活当中发挥重要作用。
- 万涛张小花张磊田园园丁世家汤华
- 关键词：肝肿瘤基因表达
- 乙型肝炎病毒HBx蛋白抑制TTRAP启动子活性的体外研究
- 2010年
- 旨在探讨体外培养条件下HBx蛋白对TTRAP(TRAF and TNF receptor-associated protein)基因转录水平表达的影响。用RT-PCR及Real-time PCR检测TTRAP在HepG2细胞和HepG2.2.15细胞中的表达;构建TTRAP启动子虫荧光素酶报告质粒;分别与HBV、HBs、HBp、HBc、HBx表达质粒共转染HepG2细胞,比较虫荧光素酶活性。RT-PCR和Real-time PCR结果显示,TTRAP在HepG2.2.15细胞中的表达量分别是其在HepG2细胞中表达量的44.9%和27.8%(P<0.05)。TTRAP启动子虫荧光素酶报告质粒与HBV表达质粒共转染组的相对荧光素酶活性,与对照组相比下降了43.8%。转染HBx表达质粒组的相对荧光素酶活性与其对照组相比下降了35%,而转染HBc、HBs及HBp表达质粒组对相对荧光素酶活性没有影响。因此证实HBx蛋白能抑制TTRAP启动子活性。
- 张小花张磊田园园王丽英黄爱龙汤华
- 关键词：HBX蛋白启动子活性HEPG2.2.15细胞HEPG2细胞
- 嘌呤霉素抗性基因捕获载体的构建及在细胞中的功能验证被引量：1
- 2009年
- 目的构建具有嘌呤霉素抗性基因捕获载体，扩大基因捕获载体的应用范围。方法用经改造的捕获载体（gene trapping vector）稳定转染HepG2．2．15肝癌细胞系，经嘌呤霉素筛选，制作单克隆细胞株。用PCR方法验证该载体的在细胞染色体中的整合，ELISA方法证明捕获载体捕获基因后的细胞的功能改变。结果嘌呤霉素抗性基因捕获载体整合在HepG2．2．15肝癌细胞的染色体上，并能影响细胞HBsAg和HBeAg的分泌。结论新构建的嘌呤霉素抗性基因捕获载体能在具有G418抗性的细胞中捕获有意义的目的基因。
- 黄婷婷田园园张磊张小花万涛黄爱龙汤华
- HBV影响RAF1在HepG2.2.15中表达的机制研究
- 田园园张磊王李英任敏黄婷婷张小花黄爱龙汤华
- 鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子小鼠体内的表达分析
- 2010年
- 目的:分析鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor,AZI)在小鼠体内的表达情况。方法:RT-PCR,Northern blot,免疫组化染色。结果:RT-PCR,Northern blot揭示AZT基因(Oazin)的表达是全身性的,即各器官都表达。特别是脑,心,肾脏,肌肉,胸腺,睾丸。免疫组化染色显示AZT蛋白在心瓣膜细胞,肾小管周围的间质细胞以及肝细胞的间质细胞中高表达。结论:用RT-PCR,Northern blot以及免疫组化染色法揭示了AZT在RNA和蛋白水平小鼠体内中的表达情况。
- 王增产张小花万涛王李英刘湘汤华
- 利用Cre-LoxP置换系统在肝癌细胞系中稳定表达HBV的P抗原蛋白
- 2008年
- 利用基因诱捕载体整合到人类肝癌细胞系SMMC7721细胞的染色体基因中,得到永久性高表达诱捕载体报告基因X-gal的阳性克隆,再用Cre-LoxP置换系统,将构建好的HBV-P全长片段与诱捕载体的报告基因部分交换,HBV-P全长片段完整的整合在SMMC7721细胞的染色体基因中,得到了稳定表达HBV-P蛋白的细胞系。该细胞系为制备、纯化P抗原和研究HBV-P的基因调控提供了实验材料。
- 李毅张小花张文露刘湘杨琴黄爱龙汤华
- 关键词：CRE-LOXP
- 乙型肝炎病毒与DNAJB4转录调节作用机制的体外研究
- 目的：
探讨体外培养条件下HBV与DNAJB4基因转录水平表达的关系，揭示HBV诱发肝癌发生的新机制，为HBV感染的治疗提供新的思路，为深入理解DNAJB4的转录调节机制提供新的知识。
方法：
1.用R...
- 张小花
- 关键词：乙型肝炎病毒体外培养肝癌
- 文献传递
