崔洪志
- 作品数：40 被引量：640H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中华农业科教基金江苏省农业科学院科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 优化的VHb基因和GFMcryIA基因构建的双价基因在烟草中的表达被引量：3
- 2006年
- 利用人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白(VHb)基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得了36株卡那霉素抗性植株。经转基因植株的PCR及Southernblot检测,证实了双价基因在35株烟草基因组中的整合。Westernblot检测证实了VHb基因的表达,杀虫实验证实GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。且转基因烟草平均每株干重比非转基因烟草植株高7%。本研究结果表明转基因育种技术在培育出既高产又具抗虫性的作物或经济作物新品种方面具有良好的应用前景。
- 王友如崔洪志郭三堆
- 关键词：双价基因烟草抗虫性活性蛋白
- 单价和双价抗虫转基因棉花研究被引量：2
- 1999年
- 郭三堆崔洪志夏兰芹武东亮倪万潮张震林张保龙徐英俊
- 关键词：抗虫棉生物技术作物研究棉花品种杀虫基因
- 两种编码杀虫蛋白质基因和双价融合表达载体及其应用
- 本发明提供了全合成的编码苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白质的基因序列以及经过修饰的编码豇豆胰蛋白酶抑制剂的基因序列;包含所说两种基因序列的双价融合植物表达载体;这种载体导入植物后,可产生对昆虫表现有高抗虫性的转基因植物及其后代和种...
- 郭三堆崔洪志徐琼芳倪万潮
- 文献传递
- 高强纤维双价抗虫杂交棉苏杂3号品种特性分析被引量：2
- 2005年
- 分析了高强纤维双价转基因抗虫杂交棉苏杂3号的品种特性,结果显示:①苏杂3号纤维强力高、品质优,HVICC纤维长度30.3 mm、比强度34.3 cN/tex、整齐度85.2%、伸长率7.1%、马克隆值4.6、反射率77%、黄度8.1、纺纱均匀性指数158;②苏杂3号综合抗病虫性能好,抗棉铃虫、高抗红铃虫、高耐枯萎病、耐黄萎病;③苏杂3号产量水平高,子棉单产3 359.4 kg/hm2,比对照泗棉3号增产15.14%;皮棉单产1 304.7 kg/hm2,比对照增产0.37%。苏杂3号集高强纤维、高产、抗虫于一体,是新一类型的高品质国产双价抗虫杂交棉。抗虫蛋白试剂条检测显示,苏杂3号具有B t毒蛋白的高阳性表达。PCR检测结果表明,苏杂3号含有中国合成构建的外源B t+CpTI双价杀虫基因片段。
- 陈旭升郭三堆许乃银狄佳春肖松华刘剑光崔洪志
- 关键词：杂交棉高强纤维双价抗虫基因
- 子房注射法获得转基因抗虫棉植株研究被引量：15
- 2000年
- 采用子房注射法将构建在植物表达载体 p BI1 2 1 .1上的 Bt杀虫基因导入棉花品种石远 3 2 1、中植3 72、82 2和辽棉 90 0 1中 ,获得 8株转基因植株。经温室抗虫性鉴定 ,8株转基因植株对棉铃虫都表现出较好的抗性。同时对这 8棵棉株叶片进行的 PCR检测结果证明
- 张震林倪万潮郭三堆束春娥崔洪志张保龙徐英俊
- 关键词：棉花BT杀虫基因棉铃虫抗虫
- 转Bt基因抗虫棉晋棉26号的生产特性及其配套技术被引量：8
- 1998年
- 运用农杆菌介导法将Bt抗虫基因导入晋棉7号，获得抗虫棉品种晋棉26号。其纤维品质、产量性状与对照相当，属于高抗棉铃虫类型。棉铃虫防治不治2代，适当防治3代和4代。栽培措施是宜早浇水，早施肥，密植，不化控。
- 李燕娥李淑君焦改丽石跃进吴家和张林水范小平吴霞孟剑红杨苏龙吉贞芳陈志贤郭三堆崔洪志
- 关键词：转基因棉花抗虫性栽培技术BT基因
- 透明颤菌血红蛋白基因的植物化改造合成及其在大肠杆菌中功能的鉴定被引量：5
- 2004年
- 根据透明颤菌血红蛋白(VHb)的氨基酸序列,按照植物偏爱密码子,对透明颤菌血红蛋白基因(vgb)进行优化改造,同时考虑到可实现分别克隆拼接的酶切位点,设计并合成了22条单链DNA短片段,通过拼接获得了全长450bp的透明颤菌血红蛋白基因vgbM,并将其克隆至pUC19上,获得重组质粒pGSVHB。利用设计的引物,通过PCR在vgbM基因的5′端引入NcoⅠ位点,将其克隆到原核生物高效表达载体pBV221上,获得质粒pBV221SVHB。转化E.coli.BL21并经热激诱导表达后,在培养物中检测到了约16kD的VHb蛋白。经CO差示光谱分析测定,该蛋白具有生物活性。为透明颤菌血红蛋白基因vgbM在植物基因工程研究中的应用奠定了基础。
- 吴巧雯崔洪志郭三堆
- 关键词：透明颤菌血红蛋白基因酶切位点偏爱密码子原核生物BV大肠杆菌
- 玉米自交系P9-10遗传转化体系的建立被引量：30
- 1998年
- 在N6培养基中添加10^(-4)mol.L^(-1)AgNO_3可促进玉米P9-10自交系幼胚诱导产生Ⅰ型胚性愈伤组织.把这些胚性愈伤组织经高渗处理后作为受体,用基因枪转化含Bt基因的pMG6质粒,通过选择压递增式筛选,得到14个抗性克隆.抗性克隆在3种不同的培养基中共诱导出10个胚状体,经分化得到10个再生植株.经PCR和Southern杂交分析证实有8个再生植株的基因组中整合有Bt基因.ELISA分析结果显示转基因植株每克新鲜叶片中Bt毒蛋白含量在20～200ng之间.
- 周逢勇戴景瑞王国英谢友菊崔洪志郭三堆
- 关键词：玉米自交系BT基因转基因玉米
- 含VHb基因和GFMcryIA基因的双价基因植物高效表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 将人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体PGBI4ASVHBBt,vgbM基因表达盒中含2个增强子的35S启动子、Ω前导序列、Kozak序列、多联终止密码子及Nos终止子;Bt基因表达盒中,除含有以上提高转录和翻译的调控元件外,还包含有正确切割、加工序列、Poly(A)信号序列。利用根癌农杆菌介导转化烟草,获得了转基因植株;PCR及Southern blot检测,证实了双价基因在烟草基因组中的整合;Western blot检测证实了vgbM基因在转基因烟草中的表达;杀虫实验表明GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白。
- 王友如崔洪志郭三堆
- 关键词：双价基因抗虫性活性蛋白
- 农杆菌质粒DNA提取方法的优化被引量：8
- 2005年
- 目的:为了减化操作过程,减少药品对操作人员有直接或间接危害,提高农杆菌质粒DNA的产率和实验结果的稳定性。方法:对常规碱裂解法进行了改动,改进的方法通过加大菌液的收集量,利用LiCl沉淀RNA,简化操作流程和严格反映环境条件,并且在操作过程中去除了酚、氯仿等对人体有害的试剂。结果:提取时间缩短,结果稳定,产率在1.5μgμL以上。结论:用这种方法提取的质粒可以满足大多数分子生物学常规实验如DNA的酶切、PCR鉴定的要求。
- 王友如崔洪志郭三堆
- 关键词：农杆菌质粒DNA
