容莉莉
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 三种反应类型测定血浆葡萄糖的实验观察
- 2006年
- 目的在生化分析仪设置的三种反应类型下,对葡萄糖氧化酶法测定血浆葡萄糖浓度进行实验观察和应用评价,显示其优异的特性。方法在500nm的波长下设置终点法(End-Point)、两点法(EP-2Points)及速率法(Kinetic),通过精密度试验、线性试验、对比试验和干扰试验进行评价。结果三种反应类型的精密度试验结果:批内CV为1.71～2.51%,批间CV为2.17～3.01%;线性试验结果:终点法0.055～22.2mmol/L、两点法0.024～2.2mmol/L、速率法0.0123～60mmol/L;对比试验结果:终点法作为对照组,与两点法及速率法的对比试验结果的相关系数(r)为0.999,P>0.05,直线回归方程为Y1=0.997x-0.028、Y2=0.996x-0.025;干扰试验结果:终点法TG<11.3mmol/L、两点法TG<15.3mmol/L、速率法TG<20.5mmol/L不影响测试结果。结论三种反应类型测定血浆葡萄糖在线性范围内的重复性能满足临床需要,速率法既能提高抗干扰能力又能增大线性范围。
- 巫小莉邓穗德张齐勇容莉莉冯泰宝周小棉
- 关键词：葡萄糖
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌CHIPS基因的克隆、序列分析及原核表达被引量：3
- 2013年
- 目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础。方法根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增CHIPS基因,纯化DNA进行EcoRI、XhoI双酶切鉴定及测序鉴定,并将CHIPS亚克隆入表达载体PET-28α,转化感受态大肠杆菌BL21,对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导表达重组蛋白,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证重组蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌临床儿童分离株基因组为模板,成功扩增CHIPS基因,基因大小为450bp;重组PET-28a(+)-CHIPS双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示CHIPS在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.98%。经IPTG诱导后,pET-28a(+)-CHIPS/BL21在相应分子量(17kDa)可见融合蛋白在上清表达,免疫印迹检测到目的蛋白。结论成功从儿童分离株MRSA中构建了CHIPS的原核表达系统,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为后续的疫苗研究奠定基础。
- 容莉莉杨镒宇关锐梨关小珊邓秋连谢永强周珍文
- 关键词：MRSACHIPS克隆原核表达
- 金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆及原核表达被引量：4
- 2012年
- 目的从分离培养的金黄色葡萄球菌中提取肠毒素A(SEA)基因,亚克隆入表达载体pET-28a(+),诱导融合蛋白的表达,为肠毒素A应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEA的序列,设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增SEA,纯化DNA进行BamHⅠ、XholⅠ双酶切鉴定及测序鉴定,并与做相应酶切的pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21,并对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导融合蛋白的表达,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证融合蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌DNA为模板,成功扩增了SEA基因,基因大小为774bp,重组PET-28a(+)-SEA双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEA在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.9%。经IPTG诱导后,SDS-PAGE可见pET-28a(+)-SEA/BL21在相应分子量(约30000Mr)条带大量表达,免疫印迹能检测到目的蛋白条带,说明其与His标签融合表达。结论克隆了金黄色葡萄球菌SEA基因,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为肠毒素A应用研究奠定了基础。
- 周帅杨镒宇张妙莲关锐梨邓秋连谢永强容莉莉邓力周珍文
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素A克隆
- 一种线性范围宽、抗干扰能力强的葡萄糖速率测定法
- 2006年
- 目的:建立一种线性范围宽、抗干扰能力强的血糖测定方法以满足临床高血糖样本测定之需要。方法:通过对葡萄糖速率法的改良,进行精密度试验、线性试验、对比试验和干扰试验以评价改良方法。结果:批内CV为2.04%～2.51%,批间CV为2.53%～3.01%;线性范围0.0123～60mmol/L;与终点法比较相关系数(r)为0.999,相关无显著性(P>0.05),直线回归方程为y=0.996x-0.025;甘油三酯<20.5mmol/L、血红蛋白<4g/L、总胆红素<960μmol/L不影响测试结果。结论:该法快速、准确、抗干扰能力强,线性范围宽,适用于全自动生化分析仪,有推广应用价值。
- 邓穗德容莉莉巫小莉张齐勇周小棉
- 关键词：血糖速率法
