孙亮
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HO-1系统与肝移植保护被引量：1
- 2008年
- 原位肝移植（OLT）是治疗终末期肝疾病的有效方法。尽管器官保存及免疫抑制药物取得了极大进步，但供肝获取过程中遭受的缺血再灌注损伤（IRI）不仅诱发移植物术后早期无功能，还加速急、慢性排斥反应发生，影响远期效果，当供肝为老年供肝或脂肪肝时尤显突出。近年研究表明，移植器官的存活不只决定于其遭受的免疫应答，
- 唐波邹小龙孙亮乔海泉
- 关键词：原位肝移植HO-1缺血再灌注损伤免疫抑制药物
- 内毒素血症对部分肝切除大鼠的肝损伤机制探讨
- 2008年
- 目的探讨内毒素（LPS）血症对部分肝切除大鼠的肝损伤作用及其可能机制。方法54只大鼠随机分为假手术组（S组）、对照组（H组）及模型组（1组），每组各18只大鼠。假手术组仅行开关腹。模型组大鼠行70％肝切除，术后24h静脉注射LPS（0.5mg／kg）。对照组大鼠70％肝切除后24h静脉注射等量生理盐水替代LPS。在既定时点，测血清AST与ALT；Western blot法测定肝组织TNF-α表达；ELISA法测定血清TNF-α水平；化学比色法测定肝组织髓过氧化物酶（MPO）水平；同步切取肝组织行HE染色；免疫组化法测定肝组织增殖细胞核抗原（PCNA）指数。结果模型组大鼠血清AST、ALT在LPS注射后1h即升高，随时间递增明显，各时点上述指标均显著高于对照组（P〈0.01）。模型组肝组织MPO活性随时间增高，各时点均显著高于对照组（P〈0．01）。注射LPS后6h肝组织出现片状坏死区，伴明显炎症细胞浸润。模型组1h肝组织TNF—α表达及各时点血清TNF-α均较对照组显著升高（P〈0.01）。模型组各时点肝PCNA指数均显著低于对照组（P〈0．01）。结论内毒素血症能引起部分肝切除大鼠出现急性肝损伤；肝细胞坏死伴中性粒细胞浸润是这种损伤的重要形态学改变，可能与内毒素诱导肝脏TNF-α产生增加及肝组织MPO活性增高有关；内毒素还损害肝细胞增殖，不利于肝再生。
- 唐波乔海泉孙学英石铁锋孙亮
- 关键词：肝切除术内毒素急性肝损伤炎症介质肝再生
- 腹腔镜胆囊切除术持镜体会被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨电视腹腔镜下胆囊切除术 (LC)中持镜助手如何更好地配合术者操作。方法 总结我院自1997年 7月至 1999年 7月行LC术 10 3例的经验。结果 除 1例术中损伤肝总管外 ,其余均疗效满意。结论 LC术中持镜助手必须根据术者的不同操作恰当地给出远景或近景 ,及时调节镜头的位置 ,才能取得满意疗效。
- 张铁民许军葛淑芝侯利民孟庆辉唐文燕孙亮
- 关键词：电视腹腔镜胆囊切除术手术技巧
- 重组腺相关病毒介导的血红素加氧酶1基因和绿色荧光蛋白基因在肝移植大鼠肝脏中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的构建提纯重组腺相关病毒介导的血红素加氧酶1基因（HO-1）和绿色荧光蛋白基因（GFP），并探讨其在肝移植大鼠肝脏中的表达情况。方法克隆大鼠HO-1，构建重组腺相关病毒-HO-1（rAAV-HO-1）载体，酶切鉴定并进行测序，氯化钙共沉淀法与辅助质粒Virus helper、AAV—cap-rep转染包装细胞，应用肝素层析柱法纯化浓缩病毒，实时荧光定量PCR测定病毒滴度。应用二套管法建立Wistar→Wistar大鼠原位肝移植模型。将提纯的重组腺相关病毒-GFP（rAAV—GFP）在供肝冷保存阶段经门静脉靶向转染并孵育2h后行大鼠原位肝移植，分别于术后1、3个月处死大鼠取材，冰冻切片荧光显微镜下观察不同组织GFP的表达情况及转染效率。结果rAAV—HO-1重组子经酶切电泳检测表明插入片段大小正确，测序结果与Genbank一致。rAAV—GFP靶向转染供肝1、3个月冰冻切片荧光显微镜下观察，移植肝GFP表达效率均〉80％，且在心、肺、脾、肾、肠等组织中未见报告基因的表达。结论成功构建并提纯了携带HO-1、GFP基因的高滴度的腺相关病毒，验证了腺相关病毒介导的GFP在肝移植大鼠肝脏中稳定高效的表达。
- 孙亮乔海泉石铁锋姜宪唐波姜洪池孙学英
- 关键词：肝移植血红素加氧酶-1基因治疗
- 门脉建立侧袖式大鼠肝／小肠整块联合移植模型
- 2008年
- 目的建立大鼠肝、小肠整块联合移植模型。方法用Wistar大鼠行同种异体肝、小肠整块联合移植。肝肠联合移植整块切取移植物时，保留门静脉完整性，利用供体腹段下腔静脉在门静脉侧壁上建立一侧袖，并安置套管。然后按kamada二套管法行原位肝移植，动脉重建通过供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合以建立肠系膜上动脉及肝固有动脉血供。回肠末端在右下腹造瘘。结果手术成功率为86％，动物平均存活时间大于30d。病理组织学检查发现移植肝和小肠结构正常。结论用门脉建立袖套式血管吻合技术施行大鼠肝、小肠整块联合移植模型是可行的。
- 孙亮乔海泉石铁锋姜宪唐波姜洪池
- 关键词：肝移植小肠
- 美洛昔康联合抗血管生成治疗肝癌的实验研究
- 2010年
- 目的探索肝细胞肝癌治疗的新策略。方法构建抗血管生成基因kallistatin真核表达载体。建立小鼠皮下H22肝癌动物模型,分别采用kallistatin基因治疗,美洛昔康治疗以及联合治疗,测量肿瘤体积,Western blot检测肿瘤内kallistatin基因及凋亡相关蛋白的表达,免疫组织化学方法检测肿瘤细胞的增殖、肿瘤内微血管密度。结果与空质粒对照组相比,kallistatin基因及美洛昔康治疗均能使肿瘤体积缩小(P<0.05),联合治疗更显著抑制了肿瘤的生长(P<0.01),抑制肿瘤细胞增殖,减少肿瘤内微血管密度,增加bax的表达。结论美洛昔康联合抗血管生成治疗能有效抑制小鼠肝癌的生长,为肝癌的治疗提供了新的方向。
- 姜宪孙学英王毓利孙亮姜洪池乔海泉
- 关键词：抗血管生成美洛昔康肝癌
- 血红素加氧酶-1诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨腺相关病毒介导血红素加氧酶-1（AAV—HO-1）诱导大鼠肝移植免疫耐受的有效性及其分子机制。方法按Kamada二套管法建立大鼠原位肝移植模型。在供肝冷保存阶段分别经门脉灌注磷酸盐缓冲液（PBS）、EmptyAAV或AAV—HO-1，孵育2h后行DA—Lewis大鼠原位肝移植，检测移植术后大鼠的中位存活时间（MST）；血清中白细胞介素（IL）-2、肿瘤坏死因子（TNF）-d的表达；移植肝中CD4＋、CD8＋，调节性T细胞（Treg细胞、CD＋CD25＋Foxp3＋）的表达；耐受组脾脏中Treg细胞百分率并对耐受组脾脏行混合淋巴细胞培养（MLC）观察免疫耐受。结果AAV—HO-1组MST为30d，显著长于PBS组（11d）或EmptyAAV（12d）（P〈0．01），其中20％存活超过90d；血清中IL-2、TNF-0l的表达明显降低，CIM＋和CD8＋T细胞的浸润减少，Treg细胞在移植肝中的浸润增加。耐受组脾脏中Treg细胞为6．7％，显著提高，行MLC后几乎无淋巴细胞反应。结论AAV—HO-1可通过增加Treg细胞，延长大鼠的存活期，证实AAV．HO-1可诱导肝移植免疫耐受。
- 孙学溥孙亮乔海泉姜洪池孙学英
- 关键词：肝移植免疫耐受基因治疗腺相关病毒血红素加氧酶-1
- 一种内毒素诱发的大鼠急性肝衰竭模型被引量：1
- 2007年
- 内毒素血症是扩大肝切除术后出现急性肝衰竭的主要原因之一。我们建立了一种大鼠70％肝切除术后24h外源性内毒素诱发的急性肝衰竭模型，现报道如下。
- 唐波乔海泉马立新孙亮
- 关键词：急性肝衰竭内毒素血症肝切除术后
