哲名家
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达被引量：7
- 2012年
- 【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。
- 哲名家张淼涛云涛王玢瑸刘光清
- 关键词：兔病毒性出血症病毒岩藻糖基转移酶原核表达
- 单股正链RNA病毒基因组非编码区结构与功能研究进展被引量：2
- 2012年
- 单股正链RNA病毒基因组末端的非编码区(non-coding region,NCR)不仅参与RNA-RNA间相互作用,还可以通过与反式作用因子(trans-acting factor)结合,发挥对病毒基因组的复制、转录和组装等过程的调控作用。本文对近年来一些关于单股正链RNA病毒基因组非编码区的结构与功能研究进展情况进行综述。
- 哲名家陈宗艳李传峰刘光清
- 关键词：单股正链RNA病毒非编码区
- 兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备
- 2013年
- 【目的】构建重组兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)VPg(Viral Protein Ge-nome-Linked,VPg)蛋白基因的原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达和纯化VPg蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体的基本特性。【方法】用PCR方法扩增RHDVVPg基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导,使之重组表达VPg蛋白,并用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。PCR扩增获得了345bp的VPg基因,用纯化的重组VPg蛋白免疫试验兔,制备抗VPg的多克隆抗体,用Western blot检测其特异性。【结果】构建了pET-30a/VPg原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株后,成功表达了VPg蛋白。用该蛋白免疫试验兔后,制备的多克隆抗体能与VPg蛋白特异性反应。【结论】成功表达了RHDV VPg蛋白,并制备了特异性良好的多克隆抗体。
- 王玢瑸哲名家刘光清张淼涛
- 关键词：VPG原核表达多克隆抗体
- 兔出血症病毒基因组末端序列对蛋白表达与调控的影响
- 【目的与意义】目前，关于兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）的基因组结构、基因功能和致病机理等还了解甚少，而阐明此类问题则是有效防控RHD发生的前提。本论文首次对RH...
- 哲名家
- 关键词：兔出血症病毒复制子蛋白表达
- 文献传递
