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员美蓉
作品数:
4
被引量:25
H指数:3
供职机构:
中国农业科学院兰州兽医研究所
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相关领域:
农业科学
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合作作者
邱孝高
中国农业科学院兰州兽医研究所
谢庆阁
中国农业科学院兰州兽医研究所
张维德
中国农业科学院兰州兽医研究所
卢永干
中国农业科学院兰州兽医研究所
张强
中国农业科学院兰州兽医研究所
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作者
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卢永干
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员美蓉
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张维德
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病毒学报
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1998
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1997
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应用反转录-聚合酶链反应检测口蹄疫病毒
被引量:17
1998年
建立了一种适用于检测动物(猪、牛、羊)组织(肌肉、淋巴结、脊髓、扁桃体和蹄冠皮)和牛食道-咽部分泌物(O-P液)中的口蹄疫(FMD)病毒核酸(RNA)的反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术。引物对是人工合成的两条20mer寡核苷酸片段,它们的序列相应于FMD病毒结构蛋白VP1基因后2/3区段,在4个血清型之间基本一致(保守)。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测。试验结果表明,RT-PCR具有良好的特异性,属该4个血清型的各个毒株都获得了预计长度的DNA片段;而相关的小RNA病毒科的猪水泡病(SVD)和柯赛奇B5(Cox.B5)病毒(特异性对照),及未感染的细胞培养物和动物组织(空白对照)都是阴性。与常规检测方法相比,该RT-PCR的检测灵敏度提高6-12倍,最高可检测20TCID50(细胞毒)或0.16~0.32LD50(组织毒)的病毒量,二次扩增还可提高检测灵敏度100倍。因为直接利用组织样品,检测试验快速简便,可在24小时内获得结果。应用该方法已检测了232份组织样品和58份O-P液样品。
朱彩珠
卢永干
邱孝高
赵启祖
谢庆阁
张维德
员美蓉
杨福荣
张强
关键词:
RT-PCR
FMDV
动物组织
应用反转录-聚合酶链反应检测动物组织中的口蹄疫病毒
被引量:6
1997年
应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了猪和牛的扁桃体、淋巴结、脊髓、肌肉和蹄冠皮肤中的口蹄疫病毒(FMDV)。与接种乳鼠测毒法比较,该方法的灵敏度达0.16LD50~0.32LD50病毒量。检测人工感染后7~35d的猪组织样品77份,25份为阳性;接种乳鼠并盲传3代,乳鼠-间接血凝试验(IHA)鉴定6份为阳性。检测人工感染后4~7d的牛组织样品52份,20份为阳性;接种乳鼠-IHA鉴定12份为阳性。检测野外鲜肉样品47份,12份为阳性;任选其中8份样品接种细胞单层,盲传至第6~7代,先后有5份样品产生CPE;其中6份样品同时接种乳鼠,盲传至第6~7代,3组乳鼠出现FMDV致病症状,IHA鉴定为阳性。检测冻猪肉样品37份,3份为阳性;冻牛肉样品9份、冻羊肉样品10份。
朱彩珠
卢永干
邱孝高
赵启祖
谢庆阁
张维德
员美蓉
杨福荣
张强
关键词:
口蹄疫
病毒
聚合酶链反应
应用RT-PCR检测注射灭活疫苗猪组织样品中的口蹄疫病毒
被引量:3
1998年
应用RTPCR检测注射灭活疫苗猪组织样品中的口蹄疫病毒朱彩珠卢永干邱孝高赵启祖谢庆阁张维德张强员美蓉(中国农业科学院兰州兽医研究所730046)我们应用的反转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,已检测各种动物的各类组织样品1300多份,本文报告应...
朱彩珠
卢永干
邱孝高
赵启祖
谢庆阁
张维德
张强
员美蓉
关键词:
口蹄疫病毒
灭活疫苗
口蹄疫细胞中和试验的建立及其应用
卢永干
谢庆阁
张维德
邱孝高
周玉彪
赵海燕
员美蓉
孔令智
曹仁
张显升
董春华
该成果建立了检测口蹄疫病的常量和微量细胞中和实验。自1984年以来,应用该检测法检测进出口活畜和疫情调查,检测了黄牛、奶牛、牦牛、猪、绵羊和各种偶蹄类观赏动物血清9350多头,结果可靠。该检测法已列入我国动物检疫规程,达...
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