刘璐
- 作品数：8 被引量：30H指数：4
- 供职机构：复旦大学附属妇产科医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科研基金上海市闵行区卫生局科研课题上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 通用PCR法在痰标本真菌检测中的临床应用被引量：4
- 2012年
- 目的用PCR法进行痰标本真菌检测,并与痰培养结果作比较,以期为临床真菌感染的早期诊断和治疗提供有效手段。方法 160例免疫力低下患者留取痰标本194份×2(均为一式双份),其中一份直接用于PCR扩增,另一份在37℃培养1～7d,如见真菌或可疑菌落,则用无菌棉拭子挑取菌落,再次进行PCR扩增并测序,测序结果与已知真菌序列进行比对,以鉴定种属。然后用配对卡方检验对3种方法(直接PCR、培养、培养后PCR)的检测结果进行统计学分析。结果 194份痰标本接种于科玛嘉平板后培养7d,其中146份见真菌生长,48份未见真菌生长;痰培养后挑取真菌或可疑菌落进行PCR分析,结果阳性170份,阴性24份;痰标本直接PCR分析,阳性178份,阴性16份。PCR扩增产物经测序、比对发现,除2份为曲霉菌,其余均为白色念珠菌。痰培养法真菌检出率显著低于痰直接PCR法(P=0.000)和痰培养后PCR法(P=0.000);痰培养后,PCR法与痰直接PCR法真菌检出率差异无统计学意义(P=0.115)。结论痰直接PCR和痰培养后PCR在真菌检测中均具有高度敏感性,但是前者操作更加简便、快速,适合临床实验室常规使用。
- 曹国君赵芳刘璐华丽季育华赵缜
- 关键词：真菌聚合酶链反应痰培养
- 母-胎界面T细胞功能研究进展被引量：6
- 2020年
- 母-胎界面免疫耐受是成功妊娠建立和维持的基础,T细胞是子宫蜕膜免疫细胞的重要组成细胞,既要介导抗感染免疫,保护胚胎免遭外来病原体攻击,同时又要参与母体接受同种异体胚胎的复杂免疫调节过程,在调控胚胎植入和维持妊娠过程中发挥重要作用,其功能失调可能会导致早期妊娠失败或中晚期妊娠并发症。本文就近年来关于妊娠期母-胎界面T细胞亚群的组成、表型特征及其功能进行介绍,并进一步阐述蜕膜CD4^+与CD8^+T细胞在母-胎免疫调节中的作用,以及异常调控致早期妊娠失败的分子机制,有助于深入理解母-胎免疫耐受机制,为妊娠相关疾病的防治提供新的线索。
- 黄茜茜刘璐王莉王莉
- 关键词：T细胞母-胎界面母-胎免疫耐受妊娠相关疾病
- 解脲脲原体相对定量方法的建立及临床应用被引量：2
- 2015年
- 目的建立解脲脲原体(Uu)相对定量方法,并探讨Uu在细菌性阴道病(BV)的作用。方法建立Uu荧光定量PCR方法,检测标本中的Uu含量,同时检测标本中的宿主细胞数(GAPDH基因),计算103宿主细胞中Uu的相对含量;从281例BV患者和137例健康女性采集阴道分泌物,对其中的Uu进行相对定量分析。结果建立的荧光定量PCR方法能直接检测分泌物中的Uu,与其他阴道常见微生物无交叉反应,灵敏度为102copy/μl;Uu在BV患者和健康女性中的阳性率分别为36.3%和17.5%,差异具有统计学意义(P<0.05);相对定量分析显示BV患者阴道中Uu的含量为183 copy/103细胞,显著高于健康女性的4 copy/103细胞),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Uu相对定量方法能克服标本采集差异对检测结果的影响,客观反映Uu的致病能力,适合临床应用。
- 赵缜刘璐赵芳曹国君黄燕群
- 关键词：解脲脲原体细菌性阴道病
- parC检测在解脲支原体基因分型中的临床应用被引量：5
- 2011年
- 目的根据parC基因序列差异建立一种解脲支原体基因分型方法，以实现其两个生物型Uu（Ureaplasma urealyticum）和up（Ureaplasma parvum）的快速鉴定，便于临床常规应用。方法依据解脲支原体14个血清型标准株parC基因序列，设计可区分观和印的特异性引物与和探针；通过检测serovarl和serovat4标准株、50份解脲支原体临床分离株（Uu12株，Up38株），7种阴道常见分离菌以鉴定该方法的特异性；留取70例性病门诊非淋球菌性泌尿生殖道炎症患者和71例妇科正常体检者的标本，分别进行解脲支原体培养和基因分型鉴定，以比较两种方法的敏感性，并应用统计学分析Uu、Up在性病和正常人群中分布的差异。结果应用parC基因分型法成功将serovarl标准株、serovat4标准株、Uu和Up临床分离株鉴别，Uu、Up两生物群之间以及7种阴道常见菌均未出现非特异性扩增；基因分型方法的敏感性显著高于培养法（P〈O．05）；在70例性病门诊患者中，Uu和Up的检出率分别为8．57％和61．40％，两者混合感染为24．30％；在7l例妇科体检人群中魄和唧检出率分别为7．04％和67．60％，两者混合感染为8．45％，性病门诊病人中解脲支原体感染率显著高于体检人群（P〈O．05），Uu和Up单纯感染在两群体中的分布差异无统计学意义（P〉O．05），而混合感染在性病门诊病人中显著增加（P〈O．05）。结论解脲支原体在性病患者中的感染率显著高于健康体检者，且混合感染在性病患者中明显增加，而Uu和Up单纯感染在两人群中分布差异无统计学意义，因此解脲支原体的致病可能与其不同基因型的混合感染有关。
- 刘璐季育华赵缜赵芳曹国君向茯芝张伟红
- 关键词：解脲支原体基因分型PARC
- 阴道分泌物白细胞酯酶试验与镜检白细胞结果一致性比较被引量：3
- 2012年
- 目的探讨阴道分泌物白细胞酯酶(LE)试验与白细胞(WBC)镜检结果的一致性。方法收集该院门诊患者阴道分泌物标本,同时用两种方法进行检测,分析两种方法检测结果的相关性(双变量相关分析)、结果是否具有统计学差异(卡方检验)及LE试验与WBC镜检结果在不同年龄组别间是否有统计学差异(Kruskal-Wallis检验)。结果 Spearman等级相关系数为0.341(P<0.05),显示二者检测结果存在显著正相关,但相关性并不密切;卡方检验结果均为P<0.05,表明二者检测结果存在统计学差异;Kappa<0.5,表明二者检测结果一致性较差;Kruskal-Wallis检验结果为P<0.05,表明不同年龄组别间LE、WBC水平存在统计学差异,LE等级水平随患者年龄的增加呈增长趋势。结论两种方法检测结果一致性和相关性均较差,LE试验不能取代常规镜检,二者在阴道炎症性疾病诊断中的作用有待进一步探讨。
- 赵芳曹国君刘璐赵缜杜美英饶桂华
- 关键词：阴道分泌物白细胞酯酶显微镜检查
- 提高侵袭性烟曲霉感染痰标本病原学检出率的方法探讨
- 2011年
- 目的:探讨一种可提高临床痰标本的侵袭性烟曲霉感染检出率的培养基。方法:收集临床常规痰标本分离菌(包括白假丝酵母菌),分析其耐药性,并将其作为"干扰菌"与烟曲霉标准株的孢子以不同比例混合接种培养,模拟痰标本的混合感染,观察彼此的干扰情况。同时添加抗菌药物于MediumB培养基中,分析培养基对烟曲霉的生长选择性。结果:当铜绿假单胞菌浓度≥104CFU/mL时,即可完全抑制烟曲霉(103CFU/mL)的生长;金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌则必须在>105 CFU/mL时,才能完全抑制103 CFU/mL的烟曲霉生长;当白假丝酵母菌与烟曲霉以100∶1混合接种时,其基本抑制了烟曲霉的生长。根据"干扰菌"的耐药特性,同时添加亚胺培南和万古霉素至培养基,结果显示其能有效抑制上述3种细菌的生长;添加氟康唑5μg/mL可抑制白假丝酵母菌的生长,而上述3种药物对烟曲霉的生长均无影响。结论:在所研究的真菌分离培养基中添加适宜的抗细菌及抗真菌药物,可有效抑制"干扰菌",提高烟曲霉的检出率。
- 刘璐季育华曹国君周敏韩立中彭奕冰
- 关键词：侵袭性真菌感染烟曲霉
- HPV16甲基化及整合与宫颈癌发生的关系
- 论文目的：人乳头瘤病毒16型在宿主基因组中的整合状态以及整合位点附件的甲基化与宫颈癌的发生发展存在密切关系。本研究通过应用DIPS-PCR方法 和H合检测不同宫颈瘤变患者中HPV16基因在人基因组中的整合状态以及整合位点...
- 刘璐
- 关键词：甲基化宫颈癌
- 真菌基因组DNA的提取和通用PCR检测方法的建立被引量：12
- 2011年
- 目的改良真菌基因组DNA的提取方法,建立真菌通用聚合酶链反应(PCR),为目前临床真菌感染的早期诊断、预防和治疗提供有效工具。方法参考前人报道的多种真菌基因组DNA的提取方法,作改良以确立本研究中所采纳的手段,并应用真菌核糖体DNA(rDNA)通用引物,以实验室保存的标准菌株及临床分离菌株来建立临床真菌感染检测用通用PCR。结果白念珠菌和烟曲霉在75℃温度下分别作用60和80 min可以完全被灭活。经目前多种破壁方法的探讨,发现对于白念珠菌(单细胞真菌)选用酶消化法,破壁效率高达98.29%,而烟曲霉(多细胞真菌)则需要酶消化法与打击器振荡法联合应用,其破壁率也可达66.68%,进一步用酚氯仿法抽提其基因组DNA,能够获得相对纯度高且有一定得量。当选择真菌rDNA ITS2区间的一对通用引物,通过PCR反应体系的优化,使得本研究中建立的通用PCR,对于白念珠菌和烟曲霉的检测下限分别为5个和9.7个,其PCR产物测序结果与数据库比对完全一致,同时选择临床分离的或实验室保存的其他真菌、细菌和病毒株进行验证,该方法仅针对真菌群,结合测序分析可以实现种属水平的鉴定。结论改良真菌基因组DNA提取后所建立的针对真菌rDNA的通用PCR敏感且特异,适宜实验室操作。
- 曹国君赵缜彭奕冰季育华孙佳彬卫蓓文刘璐
- 关键词：真菌DNA提取
