刘宗梁
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：甘肃省高层次人才科技创新创业扶持行动项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种鸭坦布苏病毒检测试剂盒
- 本发明公开一种用于鸭坦布苏病毒的一步法SYBRGreen荧光定量PCR检测试剂盒。本发明的鸭坦布苏病毒检测试剂盒内包含有根据鸭坦布苏病毒E基因保守区设计的两条特异性引物SEQ1和SEQ2。采用本发明的试剂盒进行检测，简化...
- 朱启运付钰广刘宗梁吉艳红郭建宏才学鹏
- 文献传递
- 一种鸭坦布苏病毒检测试剂盒
- 本发明公开一种用于鸭坦布苏病毒的一步法SYBRGreen荧光定量PCR检测试剂盒。本发明的鸭坦布苏病毒检测试剂盒内包含有根据鸭坦布苏病毒E基因保守区设计的两条特异性引物SEQ1和SEQ2。采用本发明的试剂盒进行检测，简化...
- 朱启运付钰广刘宗梁吉艳红郭建宏才学鹏
- 菜籽粕替代豆粕对乡鸡育肥期应用效果的研究被引量：2
- 2011年
- 试验选用180羽120日龄育肥期乡鸡,研究不同比例菜籽粕替代豆粕对乡鸡生长性能的影响并确定替代豆粕的适宜比例。试验鸡群分为3个处理组,每个处理4个重复,每个重复15只,分别饲以玉米-豆粕型基础日粮及4%和8%菜籽粕替代部分豆粕的日粮。结果表明,各组间鸡只增重差异不显著,育肥前期饲料转化率高于育肥后期。8%替代组其胸肌率和腹脂率明显低于未替代组和4%替代组。以4%菜籽粕部分替代豆粕对乡鸡育肥效果与基础日粮组相似。因此,以4%菜籽粕部分替代豆粕,不但可以缓解我省冬季冰雪气候条件下饲料原料短缺的现状,而且还可以降低饲料成本,提高畜禽养殖业的经济效益。
- 陈兴勇刘宗梁姜润深耿照玉
- 关键词：育肥期菜籽粕豆粕
- 实时荧光定量PCR检测沙门氏菌flor基因和sul2基因方法的建立
- 根据GenBank中登录号分别为JN983048.1和JF313468.1的DNA序列,各设计一对用于flor基因和sul2基因荧光定量PCR检测的特异性引物;通过常规PCR,扩增沙门氏菌flor基因和sul2基因,并将...
- 王元兰刘宗梁刘军军曹堃孙裴魏建忠李郁
- 关键词：沙门氏菌实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒Real Time RT-PCR监测方法的建立及跨种间传播的初步研究
- 自2010年4月以来,在我国东南地区省份的部分鸭场中先后爆发了一种急性传染病,主要引起蛋鸭产蛋急剧下降。鸭群患病后4~5d左右产蛋率可从80％~85%迅速下降至10%~30%,甚至停产;发病率60%~100%。临床剖检以...
- 刘宗梁
- 关键词：基因克隆流行病学
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒Real Time RT-PCR检测方法的建立及跨种间传播的初步研究
- 自2010年4月以来，在我国东南地区省份的部分鸭场中先后爆发了一种急性传染病，主要引起蛋鸭产蛋急剧下降。鸭群患病后4～5d左右产蛋率可从80%～85%迅速下降至10%～30%，甚至停产;发病率60%～100%。临床剖检以...
- 刘宗梁
- 文献传递
- 禽流感病毒M2e多拷贝重组蛋白的原核表达及其免疫原性分析
- 2013年
- 为了获得流感病毒M2e多拷贝重组蛋白并分析其免疫原性,通过比对GenBank中H5和H9亚型流感病毒的M2基因,选择其N端由23个氨基酸组成的胞外域（M2e）序列进行合成,并将4个M2e序列与3个位于HA246~260T/B细胞表位交叉串联,在其末端添加酵母转录因子,然后克隆到pGEX-6P-1载体中,表达重组蛋白。SDS-PAGE和蛋白免疫印迹试验分析表明,重组蛋白成功表达,而后纯化获得高纯度产物。经纯化的重组蛋白与弗氏佐剂混合后肌肉注射BALB/c小鼠,二免2周后采集小鼠血清并用ELISA检测M2e抗体水平;同时分离脾细胞并用ELISPOT检测特异性T细胞的数量。ELISA结果表明重组蛋白能诱导免疫组小鼠产生高水平的M2e特异性抗体;ELISPOT分析显示,在M2e肽段的刺激下,免疫组小鼠每1×106个脾淋巴细胞中的斑点形成数达150个。结果表明,成功表达的重组蛋白具有良好免疫原性,为广谱型流感病毒亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 何雯雯付钰广吉艳红刘宗梁魏建忠朱启运
- 关键词：禽流感病毒重组蛋白免疫原性
- 实时荧光定量PCR检测沙门菌flor基因和sul2基因方法的建立被引量：6
- 2015年
- 目的建立一种fl or基因和sul2基因的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,为检测沙门菌的耐药性以及耐药基因分子流行病学调查奠定基础。方法以氟苯尼考、复方磺胺甲噁唑抗性的沙门菌菌株为材料,根据Gen Bank中登陆的沙门菌fl or和sul2基因序列,设计并合成引物,建立基于SYBR Green I染料技术的Real-Time PCR检测体系,绘制出标准曲线并对其溶解曲线进行分析。结果以pMD18-T为载体构建的标准品的Ct值与样品的浓度的对数在一定范围内呈现良好的线性关系,两基因的检测域值较小,fl or基因可以检测到102 copies/μL的样品,sul2基因可以检测到103 copies/μL的样品,经耐药性与基因表达量相关分析,耐药性较高的菌株其fl or基因、sul2基因表达量也较高。结论建立的检测沙门菌中fl or基因和sul2基因的荧光定量PCR方法具有很好的灵敏性、特异性和重复性,可以广泛用于临床中fl or和sul2两种基因的检测以及沙门菌耐药分子流行病学的调查。
- 曹堃王元兰刘宗梁刘军军魏建忠孙裴李郁
- 关键词：沙门菌实时荧光定量PCR
- 鸭坦布苏病毒E蛋白膜外区的原核表达与鉴定被引量：5
- 2013年
- 为获得鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白膜外区的表达产物,以DTMUV安徽分离株(AH10)E基因序列设计特异性引物,扩增E基因,将其克隆至原核表达载体pET-SUMO中,构建重组表达质粒pET-SUMO-E,然后将其转化至感受态细胞E.coli Rosetta(DE3)中,并以IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,获得了70ku的表达产物,与预期结果相符。Western-blot分析表明,目的蛋白能与兔抗DTMUV E蛋白多克隆血清及DTMUV鸭阳性血清发生特异性反应,显示出良好的反应活性。结果表明,成功表达了E蛋白膜外区,这一成果为DTMUV疫苗制备和诊断试剂盒的研发奠定了基础。
- 刘宗梁付钰广吉艳红李郁魏建忠朱启运
- 关键词：原核表达
- 实时荧光定量PCR检测沙门氏菌flor基因和sul2基因方法的建立
- 根据GenBank中登录号分别为JN983048.1和JF313468.1的DNA序列,各设计一对用于flor基因和sul2基因荧光定量PCR检测的特异性引物;通过常规PCR,扩增沙门氏菌flor基因和sul2基因,并将...
- 王元兰刘宗梁刘军军曹堃孙裴魏建忠李郁
- 关键词：动物疾病沙门氏菌耐药机制基因检测实时荧光定量PCR
- 文献传递
