魏建忠
- 作品数：266 被引量：1,169H指数：15
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家级星火计划安徽省高等学校省级质量工程项目安徽省长三角科技联合攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 2012–2015年江淮地区猪丹毒杆菌分离株血清型、spaA基因遗传进化及PFGE基因型分析被引量：15
- 2017年
- 【目的】了解2012–2015年江淮地区猪丹毒杆菌分离株血清型分布、spa A基因遗传进化关系和基因分型特征。【方法】收集临床分离鉴定的42株猪丹毒杆菌,应用琼脂扩散沉淀实验、PCR扩增和序列分析技术、脉冲场凝胶电泳分型技术(PFGE)分别测定分离株的血清型、spa A基因遗传变异性及PFGE基因型。【结果】42株猪丹毒杆菌分离株血清型均为1a型;spa A基因与猪丹毒杆菌国内外参考株核苷酸序列相似性为98.5%–100%,分离株在第609 bp处出现T突变为G、769 bp处C突变为A,对应的氨基酸第203位Ile突变为Met、第257位Leu突变为Ile,为Met-203、Ile-257型;分离株形成8个PFGE基因型,相似度达88.8%–100%,优势基因型为ER2(54.8%),弱毒疫苗G_4T_(10)和GC_(42)株独立为同一个基因型。【结论】江淮地区致病猪丹毒杆菌流行血清型为1a型,spa A基因相似性高,分离株变异小、源于同一克隆系,Met-203、Ile-257型菌株致病力强,是江淮地区猪丹毒发生与流行的主要致病菌型。
- 魏文涛姚焱彬刘全喜杨志鹏魏建忠孙裴李郁
- 关键词：猪丹毒杆菌血清型
- 猪丹毒丝菌-猪链球菌二联油乳剂灭活疫苗的制备及其免疫效果评价被引量：2
- 2022年
- 目的制备猪丹毒丝菌(E.rhusiopathiae,ER)-猪链球菌(Streptococcus suis,SS)二联油乳剂灭活疫苗,并评价其免疫效果。方法以1株1a型ER(编号AEr31)和1株2型SS(SS2,编号HF2)为制苗菌株,甲醛为灭活剂,ISA 201VG矿物油为佐剂,通过两种方式将灭活全菌体(V-AEr31,V-HF2)与佐剂混合[(V-AEr31+V-HF2)+ISA 201VG及(V-AEr31+ISA 201VG)+(V-HF2+ISA 201VG)],制备ER-SS2二联油乳剂灭活疫苗,进行性状、无菌和安全检验。将两种灭活疫苗分别经皮下多点注射免疫小鼠(Ⅰ和Ⅱ组),同时设0.9%氯化钠对照组(Ⅲ组)。间接ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体效价和相关细胞因子(IL-4、IL-10、IFNγ、TNF-β、MCP-1)含量,血清杀菌试验检测功能性抗体水平,MTT法测定脾淋巴细胞增殖指数(SI),流式细胞术测定CD4^(+)与CD8^(+)外周血T淋巴细胞亚群百分比;腹腔攻毒试验测定免疫保护率,组织荷菌数法测定攻毒菌株在体内的定植情况,并采集肺、肝、脾、肾脏制作病理组织切片,观察动物脏器病理变化。结果两种灭活疫苗均符合油乳剂灭活疫苗的性状、无菌、安全检测要求。Ⅰ和Ⅱ组小鼠血清IgG抗体效价、血清功能性抗体水平、相关细胞因子含量、SI及CD4^(+)与CD8^(+)T细胞亚群百分比均显著高于Ⅲ组(P均<0.05),Ⅰ和Ⅱ组间差异均无统计学意义(P均>0.05);两种灭活疫苗对小鼠的免疫保护率均为100%,Ⅰ和Ⅱ组小鼠肺、肝、脾、肾脏组织中攻毒菌株定植量显著低于Ⅲ组(P<0.05),各脏器组织病变较轻。结论采用两种不同混合方式制备的ER-SS2二联油乳剂灭活疫苗免疫小鼠后均可产生良好的体液免疫和细胞免疫,可100%抵抗ER、SS2和ER-SS2强毒株的攻击。
- 韩业芹崔丽荣邢刚何长生孙裴刘雪兰魏建忠李郁
- 关键词：猪链球菌油乳剂灭活疫苗免疫效果免疫程序
- 鸭黄病毒感染(鸭坦布苏病毒病)防控关键技术与应用
- 王桂军朱良强耿照玉魏建忠占松鹤李槿年潘鑫祁克宗潘玲孙裴等
- 该成果利用病原学、分子生物学、血清学等技术手段，分离鉴定出的鸭黄病毒(鸭坦布苏病毒)AH-F10株。通过基于AH-F10株的病原生物学特性、免疫制剂的制备、抗体的检测方法制备高免卵黄抗体。所建立的鸭源黄病毒感染防控关键技...
- 关键词：
- 关键词：免疫制剂
- 猪源肠外致病性大肠杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2022年
- 利用制备的猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)全菌体蛋白建立一种检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法。将2株猪源ExPEC SDjie18-10(O;)、HByan18-2(O;)超声裂解的全菌体蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化,建立检测猪源ExPEC抗体的间接ELISA方法,并进行临床应用与评价。该方法的最佳条件:包被抗原浓度为15μg/m L,37℃1 h+4℃过夜;2%BSA于37℃封闭2 h;血清稀释度为1∶800,37℃孵育30 min;酶标二抗稀释度为1∶5 000,37℃作用30 min;显色时间为37℃15 min。该方法可特异性检测猪源ExPEC抗体,阳性血清稀释至1∶6 400仍可检出,与其他猪病原阳性血清均无交叉反应,批内及批间变异系数均小于10%。应用间接ELISA与MAT进行符合性比较及临床猪血清样品感染抗体的同步检测,两种方法的符合率分别为93.33%和94.50%且无显著性差异(P>0.05),具有较高的均一性,同时间接ELISA的感染抗体阳性检出率(19.00%)略高于MAT(17.50%),两者检测结果高度一致(K=0.816)。基于猪源ExPEC全菌体蛋白建立的猪源ExPEC抗体间接ELISA检测方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性以及临床应用的可靠性,可用于猪源ExPEC的免疫监测和流行病学调查。
- 程家园李亮邢刚刘雪兰孙裴魏建忠李郁
- 关键词：间接ELISA抗体检测
- 1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析被引量：3
- 2014年
- 对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。
- 刘霞毛立李文良杨蕾蕾张纹纹魏建忠江杰元
- 立华公司“雪山草鸡”养殖之路及启示被引量：3
- 2012年
- 通过实地调研,分析总结了立华公司"雪山草鸡"养殖的发展模式,并对该模式中建立的风险运行基金、成禽交易平台、如何保障养殖户的利益等做法进行了探讨,旨在为安徽省家禽养殖业寻求更加适合自身发展的路子。
- 程玉冰夏伦志吴东魏建忠耿照玉姜润生杨志强罗贤文范起萍
- 关键词：养殖模式
- 鸡气管黏膜上皮基底细胞的分选与鉴定研究被引量：1
- 2014年
- 鸡气管黏膜上皮细胞是IBV和其他禽病原体感染的重要靶细胞。气管黏膜上皮细胞种类多样,不同细胞对病原感染敏感性有差异,研究与比较IBV感染不同种类气管黏膜上皮细胞特性有助于弄清IBV分子感染机制。利用流式细胞仪技术,使用基底细胞特异性抗体从鸡气管黏膜上皮细胞中分选出基底细胞。通过基底细胞培养形态的观察、生长曲线的绘制和特异性免疫荧光的鉴定,成功获得能够稳定生长繁殖的高纯度的鸡气管黏膜基底细胞,为今后IBV或其他相关研究奠定技术基础和提供了良好的种子细胞。
- 孙裴杨榕魏建忠李郁王桂军张彦明郭抗抗
- 关键词：基底细胞流式细胞仪分选
- 猪病毒性腹泻的研究进展被引量：2
- 1995年
- 猪病毒性腹泻的研究进展魏建忠，谢三星（安徽农业大学，合肥２３００３６）前言猪腹泻病原种类繁多，致病性复杂，有细菌、病毒及寄生虫等。但其中病毒是猪腹泻的常见病原。近年来又不断有所发现，同时还存在多种病原混合感染，成为一个引人注目的世界性的新问题。虽然已...
- 魏建忠谢三星
- 关键词：猪病病毒性腹泻
- 猪鼻腔棉拭子中胸膜肺炎放线杆菌检测与分离方法的优化
- 2015年
- 为提高APP亚临床感染的核酸检出率和细菌分离率,通过检测3种PCR的敏感性和特异性,运用3种PCR方法分别检测母猪鼻腔棉拭子中APP核酸;并同时使用4种选择性培养基分离母猪鼻腔棉拭子中APP。结果显示,3种PCR的最低检测限度均为102 CFU,且除APP外与其他细菌不发生反应;dsb E-PCR方法的App核酸检出率(23.7%)显著高于oml A-PCR(8.1%)和Apx IVA-PCR(14.8%),三者符合率较高,分别为84.4%(dsb E/oml A-PCR)、91.1%(dsb E/Apx IVA-PCR)和93.3%(oml A/Apx IVA-PCR);m PPLO的APP分离率(11.9%)显著高于TSA(0.7%)、CA(5.2%)和BA(2.2%),四者符合率较高,分别为88.9%(m PPLO/TSA)、93.3%(m PPLO/CA)、90.37%(m PPLO/BA)、95.6%(TSA/CA)、98.5%(TSA/BA)和97.0%(CA/BA);dsb E-PCR检测结果与m PPLO分离结果的符合率较高(88.1%)。说明dsb E-PCR和m PPLO的检测分离效率最高,可综合2种方法,完善APP检测分离操作程序,为APP亚临床感染的诊断和治疗以及疫苗免疫提供科学依据。
- 孙裴施雷魏建忠耿照玉殷宗俊顾秋成王海洋李好磊郭志英李郁
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌PCR选择性培养基
- 优质皖南黑猪选育扩群与推广
- 殷宗俊王重龙丁小玲丁月云刘剑锋张洪辉李郁魏建忠王俊生吴仕安夏成兴童澄雨潘勇黄龙何小雷
- 该项目在皖南黑猪保种场及保护区等地，开展关于皖南黑猪选育扩群与推广技术的研究，并通过绩溪县生猪发展专业合作社进行示范与推广。项目在广泛搜集的基础上，重新组建并扩大了皖南黑猪保种群体。开展了一系列的皖南黑猪种质特性研究，包...
- 关键词：
- 关键词：选育扩群
