刘丽芳
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：华南农业大学资源环境学院植物病毒研究室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 望江南中核糖体失活蛋白新基因CassinⅠ的克隆及特征分析被引量：5
- 2008年
- 【目的】克隆在植物抗病虫过程中具有重要作用的核糖体失活蛋白新基因,为该类蛋白基因功能研究和有效利用创造条件。【方法】通过分析多种不同来源的植物核糖体失活蛋白的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1和P2,对药用植物望江南基因组进行PCR扩增,获得一种新的RIP基因片段。通过RACE法,获得了其全长cDNA序列-CassinⅠ。【结果】CassinⅠ基因全长为882bp,其推导的氨基酸序列与葫芦科两个代表核糖体失活蛋白β-luffin和Trichosanthin(TCS)的相似性分别为58.2%和34.7%,与GenBank中其它核糖体失活蛋白的序列无显著相似性。多重序列比对发现:CassinⅠ有9个氨基酸残基与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,另外两个残基发生了变化。所有的活性位点都在P1/P2扩增区段内。【结论】首次在望江南中克隆和报道一种新的核糖体失活蛋白基因,为进一步研究该基因的功能、并应用于作物转基因抗病虫害育种研究奠定了基础。
- 阮小蕾刘丽芳何云蔚刘福秀李华平
- 关键词：望江南核糖体失活蛋白基因克隆
- 望江南RIP转基因遗传及对病毒抗性研究
- 本文在前人工作的基础上，进一步对转望江南核糖体失活蛋白基因(cassin)的烟草的T<,0>代和T<,1>代进行检测，包括PCR检测、RT-PCR检测和Northern杂交检测。
对T<,0.>代转基因烟草的P...
- 刘丽芳
- 关键词：望江南核糖体失活蛋白转基因烟草
- 文献传递
- 转望江南核糖体失活蛋白基因cassin烟草及其对烟草花叶病毒的抗性被引量：1
- 2007年
- 通过构建植物表达载体,由农杆菌介导,将望江南核糖体失活蛋白基因cassuin转入烟草。PCR和Southern blot杂交结果证明:外源基因已经以单拷贝整合到烟草基因组内,并且在后代发生遗传分离。RT-PCR和Northern blot杂交结果显示:外源基因可以正常转录。用不同浓度的TMV机械摩擦接种转基因T_1、T_2代各3个自交株系,以非转基因烟草为阴性对照,实验结果表明转基因烟草对TMV表现出不同程度的抗性。
- 阮小蕾刘丽芳李华平
- 关键词：转基因烟草核糖体失活蛋白抗病性评价烟草花叶病毒
- 6个植物核糖体失活蛋白新基因片段的克隆及特征分析被引量：1
- 2008年
- 通过分析多种不同来源的植物RIPs的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1、P2,对基因组进行PCR扩增,分别从海芋Araceae macrorrhiza、烟草Nicotiana tobaccum、剑麻Agavaccae aga-ve、望江南Cassia occidentalis、那坡指天蕉Musaspp.(BB)、邻水野蕉Musaspp.(AA)中获得1个基因片段。BLAST分析表明:它们推导的氨基酸序列只与多种不同来源的RIPs有相似性。其中,与葫芦科2个代表RIP相应区段的相似性最高,与-βluffin基因的相似性分别为97.2%、98.5%、97.9%、89.4%、97.9%、97.2%,与天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的相似性分别为63.6%、64.5%、64.1%、60.8%、64.8%、和63.6%。多重序列比对发现:6个序列中分别有10、9、11、11、9、10个残基氨基酸与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,只是残基位置不一致,仅有个别残基发生了变化。所有的N-糖苷酶活性位点都在P1/P2扩增区段内。
- 阮小蕾刘丽芳陈秀何自福李华平
- 关键词：核糖体失活蛋白基因克隆
