冯朝晖
- 作品数:8 被引量:25H指数:3
- 供职机构:浙江医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA表达水平研究被引量:6
- 1999年
- 目的和方法:本实验室曾报道,低浓度0-2 μmolL 烷化剂甲基硝基亚硝基胍( N- methyl- N′- nitro - N-nitrosoguanidine , MNNG) 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制,本文利用定量RT- PCR 方法,研究了该低浓度MNNG 对人HeLa 及猴肾vero 细胞DNA 聚合酶β(pol β) m RNA 表达水平的影响。结果:经0-2 μmolL MNNG2 .5 h 处理后,HeLa 细胞pol βm RNA 水平在6 ~24 h 内升高约1 倍;而vero 细胞pol βm RNA 水平在12 ~30 h 内亦升高1倍左右。结论:提示pol βmRNA 水平改变可能参与MNNG
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词:DNA聚合酶ΒMNNG细胞遗传
- 甲基硝基亚硝胍诱发的遗传不稳定Vero细胞中错配结合蛋白的研究被引量:2
- 1997年
- 应用凝胶阻滞技术(gelretaldation),在甲基硝基亚硝胍(MNNG)诱发的遗传不稳定的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)抽提物中,发现存在特异性针对G·T的错配结合蛋白(mismatchbindingprotein),能选择性识别DNA中的G·T错配,并与之结合.经与正常Vero细胞相比较,证实其功能并无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。
- 冯朝晖余应年张小山陈星若
- 关键词:MNNG细胞遗传错配修复
- 甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定vero细胞DNA体外复制的保真度被引量:10
- 1998年
- 利用在猴肾vero细胞抽提物中建立的DNA体外复制系统,对穿梭质粒pZ189DNA进行有效的复制后,将复制产物转化至E.coliMBM7070,观察pZ189质粒DNA中突变靶基因supFtRNA基因突变的情况.在烷化剂甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine)诱发的遗传不稳定(geneticinstability)vero细胞胞浆抽提物中进行pZ189质粒DNA复制,发现经过体外复制的pZ189质粒中supFtRNA基因突变率高出对照组5-8倍(P<0.05)。
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词:MNNG甲基硝基亚硝基胍VERO细胞DNA复制
- pZ189质粒DNA体外复制系统的建立被引量:2
- 1998年
- 报道了含SV40复制起点的质粒DNA在真核细胞抽提物中进行复制的DNA体外复制系统的建立.在外源性蛋白质SV40大T抗原(SV40Tag)的参与下,穿梭质粒pZ189能在猴肾vero细胞胞浆抽提物中,利用其中参与体内DNA复制所需的蛋白质成分,有效地进行体外DNA复制.从而为研究真核细胞DNA复制系统的结构与功能提供了简单、有效的模型.
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词:穿梭质粒真核细胞DNA
- MNNG诱发的遗传不稳定vero细胞中错配修复功能的研究被引量:3
- 1998年
- 在MNNG诱发的延迟发生的,以非定标性突变形成为特征的遗传不稳定vero细胞抽提物中,应用凝胶阻滞和体外错配修复技术,发现仍存在特异性针对G·T的错配结合蛋白,能选择性识别并结合DNA中的G·T错配;同时发现在该细胞核抽提物中G·T错配能被有效、特异地修复成G·C。经与正常vero细胞比较,证实二者功能均无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白及G·T错配修复功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词:MNNG诱发VERO细胞
- 错配修复研究新进展被引量:1
- 1997年
- 错配修复是细胞复制后的一种修复机制,对维持细胞遗传稳定起重要作用。近年来,对错配修复的研究进展飞速。目前,已在人类细胞中发现若干与细菌、真菌错配修复基因高度同源的人类错配修复基因,并在许多肿瘤中证实有错配修复功能的缺陷。本文主要介绍近年来错配修复研究的一些新进展。
- 冯朝晖
- 关键词:基因肿瘤
- 真核细胞DNA聚合酶被引量:1
- 1998年
- 近年来,其核细胞DNA体外复制模型的建立及蛋白纯化技术的提高,DNA聚合酶基因的克隆,真核细胞DNA聚合酶研究取得了很大进展。迄今为止,已发现α、β、γ、δ、ε、ζ等6类真核细胞DNA聚合酶,分别在DNA复制和修复等事件中起到重要作用。
- 冯朝晖
- 关键词:真核细胞DNA聚合酶DNA
- 低浓度N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍对HeLa细胞DNA聚合酶及拓扑异构酶Ⅱ α mRNA表达水平的影响被引量:9
- 1999年
- 利用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对HeLa细胞DNA聚合酶(Polα,β,δ,ε)及拓扑异构酶Ⅱα(TopⅡα)mRNA表达水平的影响.发现经0.2μmol·L-1MNNG处理2.5h后,HeLa细胞PolβmRNA水平在6-24h内升高约1倍,而Polα,δ,ε及TopIαmRNA水平则无明显改变.提示PolβmRNA水平改变可能参与MNNG诱发细胞遗传不稳定的发生.
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词:亚硝基胍MNNG聚合酶