何莲花
- 作品数：13 被引量：72H指数：6
- 供职机构：中国中医科学院中医药信息研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省科技支撑计划项目江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于Akt/JNK/p38 MAPK信号通路探讨健脾活骨方对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用
- 2023年
- 目的:观察健脾活骨方(JPHGP)对酒精致血管内皮细胞功能损伤的保护作用,并基于蛋白激酶B/c-Jun氨基末端激酶/p38 MAPK(Akt/JNK/p38 MAPK)信号通路探索相关作用机制。方法:通过鸡胚尿囊膜实验、胸主动脉环实验和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的迁移、侵袭、黏附和管腔形成实验,在有或无酒精诱导条件下,观察JPHGP不同质量浓度8、16、32μg·L^(-1)对血管新生的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HUVEC中Akt、JNK、p38 MAPK等磷酸化表达水平。结果:与正常组比较,模型组动脉环周围微血管数目及长度均减少,HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力降低(P<0.05,P<0.01);JPHGP16、32μg·L^(-1)组作用后能明显升高鸡胚尿囊膜新生血管长度(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,JPHGP 8、16、32μg·L^(-1)组能浓度依赖地增加胸主动脉环周围微血管数量(P<0.05,P<0.01),JPHGP 32μg·L^(-1)组能升高胸主动脉环周围微血管长度(P<0.05);JPHGP 16、32μg·L^(-1)组均能增强HUVEC的迁移、侵袭、和管腔形成能力。Western blot检测结果表明,与正常组比较,模型组中的p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,JPHGP 8、16、32μg·L^(-1)组的p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-Akt/Akt蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),JPHGP 16、32μg·L^(-1)组的p-JNK/JNK的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:JPHGP对酒精致血管内皮细胞功能损伤具有保护作用,其机制可能与激活Akt/JNK/p38MAPK信号通路有关,相关研究结果将为JPHGP“健脾活血”功效阐明提供一定的科学依据。
- 王潇潇何莲花方罗昌婷李群杨超胡智星陈卫衡刘春芳韩岚林娜
- 风湿祛痛胶囊对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响被引量：9
- 2019年
- 目的:观察风湿祛痛胶囊对血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力的影响,以及对VEGF受体2(VEGFR2)的干预作用。方法:VEGF体外诱导HUVEC,加入风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度(0. 02,0. 1,0. 5μg·L-1)作用后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、转移小室(transwell)法、黏附实验、细胞侵袭及管腔形成实验检测HUVEC的增殖活性、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中VEGFR2磷酸化水平和蛋白含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGFR2 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,VEGF诱导24,48 h后均能显著升高HUVEC的增殖活性(P <0. 01),诱导24 h能明显升高HUVEC的迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力(P <0. 01),显著升高HUVEC中VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P <0. 01);与VEGF组比较,风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度组作用48 h均能明显抑制HUVEC增殖活性(P <0. 05,P <0. 01),作用24 h对VEGF诱导的HUVEC迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力有明显抑制作用(P <0. 05),也能下调VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P <0. 05)。结论:风湿祛痛胶囊能降低VEGF诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,这一作用可能与其抑制VEGFR2的磷酸化、蛋白和mRNA表达水平有关。
- 李逸群何莲花刘春芳刘春芳孙丛丛孙丛丛苗艳东林娜
- 二冬膏对急性肺损伤模型鼠TNF-α,IL-6含量及AQP-5蛋白表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:研究二冬膏对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)含量及水通道蛋白5(AQP-5)表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏高、中、低剂量组、地塞米松组,每组12只。除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉注射LPS 6 mg·kg-1复制ALI大鼠模型。首次给药在造模后0.5 h,1次/d,连续4 d。二冬膏高、中、低剂量组分别ig二冬膏10,5,2.5 g·kg-1;正常组与模型组ig生理盐水10 m L·kg-1,地塞米松组ip地塞米松0.01 g·kg-1。4 d后处死大鼠,取血清和肺组织检测。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测大鼠血清TNF-α,IL-6的含量,Western bloting测定大鼠肺组织AQP-5蛋白的表达,苏木素和伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P<0.01),肺组织AQP-5蛋白表达水平显著降低(P<0.01)且肺部病理炎症增加。与模型组比较,二冬膏各组均能明显降低TNF-α,IL-6含量(P<0.05,P<0.01),显著升高肺组织AQP-5蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)并且减轻肺部病理炎症。结论:二冬膏通过降低ALI模型鼠促炎因子TNF-α,IL-6含量,升高肺组织AQP-5蛋白的表达,改善肺部病理炎症,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤。
- 熊秋迎陈乔谢斌朱金华孙昊鑫何莲花
- 关键词：二冬膏急性肺损伤白介素-6水通道蛋白-5
- 紫草素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞功能的影响被引量：12
- 2020年
- 为了观察紫草素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞的增殖、迁移、黏附和侵袭能力影响,并从蛋白激酶B(Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路探索其作用机制,该实验采用TNF-α(20 ng·mL-1)体外诱导RA患者成纤维样滑膜细胞系(MH7A),加入不同浓度紫草素(0.025,0.05,0.1 pmol·L^-1)作用后,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法、划痕试验、黏附试验及Transwell侵袭试验检测MH7A细胞的增殖活性以及迁移、黏附和侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测MH7A细胞中Akt和MAPK信号通路分子的蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,TNF-α能明显诱导MH7A细胞的增殖、迁移、黏附和侵袭能力,升高Akt,c-Jun氨基末端激酶(JNK),p38及细胞外调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化水平;与TNF-α组相比,紫草素作用24 h对TNF-α诱导的MH7A细胞增殖活性没有明显影响,作用48 h能浓度依赖地降低TNF-α诱导增加的MH7A细胞增殖活性,作用24 h内还能显著降低TNF-α诱导异常升高的MH7A细胞迁移、黏附、侵袭能力及Akt,JNK,p38,ERK的磷酸化水平。这些结果提示紫草素可降低TNF-α诱导异常升高的MH7A细胞增殖、迁移、黏附和侵袭能力,其机制可能与下调Akt和MAPK信号通路的活化相关。
- 何莲花汪倩倩汪倩倩孙丛丛林娜
- 关键词：紫草素增殖迁移
- 风湿祛痛胶囊对类风湿关节炎滑膜Akt和MAPK信号通路的影响被引量：11
- 2019年
- 目的:观察风湿祛痛胶囊(FSQTC)对蛋白激酶B(Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,以探讨其抑制类风湿关节炎(RA)滑膜血管新生的机制。方法:采用SD大鼠诱导建立胶原诱导性关节炎(CIA)模型,灌胃给予FSQTC低、中、高剂量(0. 25,0. 5,1 g·kg^(-1)) 19 d后,取膝关节滑膜组织备用;血管内皮细胞生长因子(VEGF,20μg·L^(-1))诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC),肿瘤坏死因子-α(TNF-α,20μg·L^(-1))体外诱导人RA成纤维样滑膜细胞系MH7A,分别加入不同质量浓度FSQTC(0. 02,0. 1,0. 5μg·L^(-1))作用后,取细胞备用。分别提取滑膜组织以及MH7A和HUVEC两种细胞中的蛋白,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Akt(p-Akt),p-p38 MAPK,p-细胞外信号调节激酶(ERK),p-氨基末端激酶(JNK)的蛋白表达水平。结果:CIA模型组大鼠关节滑膜中p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK和p-JNK的表达水平均较正常组显著升高(P <0. 01),经0. 25,0. 5,1 g·kg^(-1)·d^(-1)的FSQTC治疗后降低(P <0. 05,P <0. 01);与空白组比较,VEGF或TNF-α能分别诱导p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK和p-JNK在MH7A或HUVEC细胞中的异常升高(P <0. 01),0. 02,0. 1,0. 5μg·L^(-1)的FSQTC能明显降低p-Akt,p-p38 MAPK,p-ERK,p-JNK的表达水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论:FSQTC能负调节Akt和MAPK信号通路在CIA大鼠滑膜组织、体外培养的血管内皮细胞和成纤维滑膜细胞中的异常活化,这可能与其对RA滑膜血管新生的抑制作用有关。
- 刘春芳何莲花王靖霞李逸群孙丛丛荆宇苗艳东林娜
- 关键词：胶原诱导性关节炎成纤维样滑膜细胞类风湿关节炎
- 风湿祛痛胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生的影响被引量：15
- 2019年
- 观察风湿祛痛胶囊对大鼠主动脉环血管生成的影响以及对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜血管新生的作用。取正常SD大鼠胸主动脉环,经血管内皮生长因子(VEGF)20μg·L^(-1)体外诱导,风湿祛痛胶囊(0.02,0.1,0.5μg·L^(-1))连续作用9 d,观察血管环芽出的新生血管数目、长度和面积;同时,采用SD大鼠建立CIA模型,以甲氨蝶呤(0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1))为阳性对照,风湿祛痛胶囊(0.25,0.5,1 g·kg^(-1)·d^(-1))连续治疗19 d,组织病理学检查(HE)观察炎症关节滑膜中血管形态和分析血管密度,免疫组化检测滑膜中血管内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、VEGF和VEGF受体2(VEGFR_2)的表达情况,免疫荧光双染观察滑膜中CD31和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达,酶联免疫吸附法检测血清中TGF-β,PDGF和VEGFR_2的含量。结果显示,VEGF诱导后都能显著增加大鼠胸主动脉环芽出的血管数目、分支长度和面积,风湿祛痛胶囊作用后可显著降低VEGF诱导升高的血管环芽出的血管数量、长度和面积。模型组CIA大鼠炎症关节滑膜中血管密度、CD31阳性表达量、CD31^+/αSMA^-不成熟及总血管阳性表达灰度值(IOD)均较正常组显著升高,滑膜中VEGF和VEGFR_2以及血清中VEGFR2,TGF-β和PDGF含量也明显增加;风湿祛痛胶囊各组治疗后降低关节滑膜血管密度,抑制CD31阳性表达量、CD31^+/αSMA^-不成熟血管和总血管阳性表达IOD,对CD31^+/αSMA^+成熟血管则无明显影响,同时负向调节滑膜和/或血清中VEGF,VEGFR_2,TGF-β和PDGF的含量,且中、高剂量作用显著,甲氨喋呤的作用与高剂量组相近。研究结果提示,风湿祛痛胶囊具有抑制CIA大鼠关节滑膜组织血管新生以及离体血管环生成的作用,这一作用可能和降低促血管新生调控因子的含量有关。
- 刘春芳王靖霞何莲花孙丛丛李逸群林娜
- 关键词：胶原诱导性关节炎血管新生
- 基于均匀设计法评价白及制川乌配伍对胃溃疡模型小鼠的影响被引量：1
- 2017年
- 目的 研究白及与制川乌不同配比和剂量变化对无水乙醇致胃溃疡模型小鼠胃黏膜损伤的影响.方法 采用均匀设计法,按2因素7水平,以小鼠胃溃疡指数和胃黏膜病理损伤积分为指标,观察白及制川乌合煎液灌胃给药后对胃溃疡小鼠的影响,并选取有显著意义的配比和剂量进行验证.结果 白及制川乌总剂量在3.64~29.32 g/kg范围内,小鼠溃疡指数和病理损伤积分随合煎液中白及剂量的增加而降低、随制川乌剂量的增加而升高,但二药未见交互作用;当总剂量固定不变,小鼠溃疡指数和病理损伤积分即随合煎液白及配比增加而降低、随制川乌配比增加而升高.结论 白及和制川乌合煎液对小鼠胃溃疡的影响与二药的剂量和配比密切相关,为十八反中白及与制川乌反药组合作用的深入研究提供实验依据.
- 孙丛丛刘春芳孙丹妮汪倩倩王慧何莲花林娜
- 关键词：十八反制川乌白及胃溃疡小鼠
- 长春新碱诱导的白血病多药耐药细胞株CEM/VCR的建立及其生物学特性被引量：5
- 2014年
- 目的建立白血病多药耐药细胞株CEM/VCR,探讨其生物学特性。方法以白血病CEM细胞为亲本细胞,通过逐步增加长春新碱的浓度联合大剂量间断冲击诱导方法建立对长春新碱耐药的白血病CEM/VCR细胞株。MTT实验检测耐药细胞株对常用化疗药物阿霉素(ADM)、阿糖胞苷(Ara-C)、表柔比星(EPI)、长春新碱(VCR)、柔红霉素(DNR)及门冬酰胺酶(L-ASP)的耐药性,计算出CEM和CEM/VCR细胞的半数抑制浓度(IC50)和耐药倍数(RI);光镜下观察其细胞形态学变化,绘制细胞生长曲线,并计算细胞倍增时间;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR半定量检测MDR1 mRNA的表达。结果历时14个月,传代110代,成功建立可操作的、重复性好的CEM/VCR耐药细胞株,该细胞株能够在含0.01μg/mL VCR条件下长期生存。ADM、Ara-C、EPI、VCR、DNR及L-ASP作用CEM细胞72 h的IC50分别为(0.009 9±0.001 8)、(0.0097±0.001 7)、(0.011 8±0.005 1)、(0.002 7±0.000 3)和(0.0 085±0.000 9)μg/mL及(7.679 4±0.058 3)u/mL,而作用CEM/VCR细胞株72 h的IC50分别为(5.597 6±0.113 8)、(0.105 5±0.004 1)、(0.897 9±0.069 0)、(2.5259±0.098 2)和(1.356 3±0.033 5)μg/mL及(3 354.796 5±9.012 8)u/mL,其RI分别为563.71、10.79、75.55、905.34、158.08和436.85倍,差异有统计学意义(P<0.05),说明耐药细胞株CEM/VCR不仅对VCR耐药,还存在交叉耐药;光镜下,CEM/VCR细胞与CEM细胞相比,其体积较小;CEM细胞、CEM/VCR细胞的倍增时间分别为(25.09±0.78)h和(24.27±0.79)h,差异无统计学意义(P>0.05);两种细胞在G0/G1期、S期的分布差异无统计学意义(P>0.05),在G2/M期的分布差异有统计学意义(P<0.05);耐药细胞株CEM/VCR的MDR1mRNA表达水平高于亲本细胞CEM,分别为(1.012±0.031和0.187±0.006)(P<0.01)。结论成功建立了一株白血病多药耐药细胞株CEM/VCR。该细胞株可以成为研究长春新碱获得性耐药机制及开展多药耐药逆转剂筛选较好的体外模型。
- 朱大诚陈秀珍何莲花
- 关键词：白血病多药耐药长春新碱CEM细胞
- 山豆根水提物对白血病CEM细胞生长抑制及其机制研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长抑制及其可能机制。方法以人类T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用MTT实验检测山豆根对CEM细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察CEM细胞形态结构的改变;琼脂糖凝胶电泳检测山豆根水提取物对CEM细胞的诱导凋亡作用。结果山豆根水提物能明显抑制CEM细胞的生长,药物浓度在0.019 mg/ml作用48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为9.728mg/ml;光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩、聚集,边聚于核膜下呈典型的凋亡特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带。结论山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长具有明显的抑制作用,抑制白血病CEM细胞生长的机制之一是诱导CEM细胞凋亡。
- 朱大诚周军何莲花朱金华赵志冬欧阳永伟
- 关键词：山豆根白血病CEM细胞凝胶电泳细胞凋亡
- 风湿祛痛胶囊对大鼠胶原诱导性关节炎的影响被引量：11
- 2019年
- 目的:观察风湿祛痛胶囊对大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的干预作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、风湿祛痛胶囊低、中、高剂量组(0. 25,0. 5,1 g·kg^-1·d^-1),对照药甲氨蝶呤组(0. 2 mg·kg^-1·d^-1),除正常组外,其他各组以Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫大鼠建立CIA模型,首次免疫后第1天给药组开始灌胃给药,每天1次,共给药19 d;首次免疫第8天开始观察大鼠关节红肿和畸形症状、评价关节炎临床积分和发病率,第19天取材后,炎症关节进行微计算机断层扫描技术检测和骨计量学分析,同时进行炎症关节组织病理学检查并从滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏等方面进行半定量评分,酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL)含量。结果:风湿祛痛胶囊能剂量依赖地改善CIA大鼠炎症关节红、肿和畸形症状;与正常组比较,模型组大鼠炎症关节红、肿和畸形明显临床积分和发病率、关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理评分显著升高(P <0. 01),炎症关节骨密度(BMD),骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb. Th),骨小梁数量(Tb. N)显著降低(P <0. 01),骨表面积体积比(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb. Sp)显著升高(P <0. 01),血清IL-1β,TNF-α,VEGF,MMP3和RANKL的含量显著升高(P <0. 01);与模型组相比,各风湿祛痛胶囊组红肿、畸形症状明显改善,临床积分和发病率、关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理评分均明显降低(P <0. 05,P <0. 01),BMD,BV/TV,Tb.Th,Tb. N明显升高(P <0. 05,P <0. 01),BS/BV和Tb. Sp明显降低(P <0. 05,P <0. 01),血清IL-1β,TNF-α,VEGF,MMP-3和RANKL的含量明显降低(P <0. 05,P <0. 01),且甲氨蝶呤组与高剂量组的作用相近。结论:风湿祛痛胶囊能有效缓解CIA的临床症状和病情,降�
- 王靖霞刘春芳何莲花孙丛丛李逸群孟昊业彭江荆宇苗艳东林娜
- 关键词：胶原诱导性关节炎病理学影像学
