万明辉
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
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- 星形胶质细胞基因表达谱差异及其对损伤反应的研究
- 目的:探讨稳定的分离纯化O-2A谱系细胞的方法,以获得纯化的T2A培养;比较T1A和T2A发生及分化过程中基因表达谱差异;研究不同型别星形胶质细胞损伤后的反应差异.方法:根据T1A、O-2A谱系细胞的发生分化时间和生长速...
- 万明辉
- 关键词：星形胶质细胞细胞谱系基因表达谱分化
- 文献传递
- 脊髓半切损伤后脊髓与大脑部分核团c-fos蛋白表达的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 :探索脊髓半切损伤后 ,脊髓、下丘脑室旁核 (PVN)和视上核 (SON)的c -fos蛋白表达的规律。方法 :将 5 6只大鼠随机分为脊髓损伤组 2 4只、假手术组 2 4只和正常组 6只 ,损伤组行左侧半脊髓横断术 ,损伤后 1,6,12 ,2 4h取脊髓、PVN和SON行冰冻切片 ,免疫组化法标记c -fos阳性细胞。结果 :脊髓半切损伤后 ,各时间点损伤侧脊髓灰质中有明显的c -fos阳性表达。PVN和SON在损伤后各时间点均有c -fos表达阳性细胞的增加 ,与假手术组、正常组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :脊髓损伤后脊髓、PVN和SON可产生明显反应 ,PVN和SON以不同的反应特点影响着神经递质的改变。
- 万明辉夏春林施婵宏何炎
- 关键词：C-FOS蛋白细胞计数信号传导
- 脊髓半切损伤模型的建立
- 2003年
- 目的 :为脊髓损伤修复研究建立理想、稳定的动物模型 ,并选择客观敏感的检测手段对其功能进行观测评定。方法 :将 2 5只成年SD大鼠随机分为三组 :脊髓损伤组 (A组 ,9只 ) ,行T12椎板切除术 +脊髓左半侧切除 ;假手术组 (B组 ,8只 ) ,行T12椎板切除术不切脊髓 ;正常组 (C组 ,8只 ) ,与其他两组同期饲养检测指标。术后 1、2、3、4周进行改良联合行为评分 ,术后 2 4h及 4周进行双后肢体感诱发电位等检测 ,观察神经功能恢复情况与一致性。结果 :术后 4周A组动物 9只 (因A组死亡一只 ,为保持最终动物数一致 ,另加了 1只 ) ,存活 8只 ,存活率 88.89% ,B、C组 8只存活率均为 10 0 %。各周CBSA组右后肢明显低于左侧 (P <0 .0 1) ,与B、C组有显著差异 ,B、C组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。A组术后 2 4h左后肢SEP消失 ,右后肢SEP较B、C组起始潜伏期 (PL)延长 ,峰峰值波幅降低。术后 4周左侧SEP随CBS恢复而出现 ,但PL较B、C组明显延长 (P <0 .0 1) ,波幅也明显降低 (P <0 .0 5 )。而B、C组间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :该动物模型操作简单 ,动物存活率高且稳定 。
- 施婵宏万明辉夏春林
- 关键词：脊髓损伤动物模型神经功能诱发电位神经再生
- 新生大鼠大脑皮质O-2A祖细胞的体外诱导分化
- 2003年
- 目的 :探索新生大鼠大脑皮质O -2A祖细胞的体外分离纯化的培养条件 ,并观察其在体外增殖、分化的规律 ;鉴定体外培养的O -2A祖细胞、2型星形胶质细胞及少突胶质细胞。方法 :根据 1型星形胶质细胞、O -2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同 ,采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 (PDGF ,bFGF )刺激O -2A祖细胞增殖 ,从而分离纯化、扩增O -2A祖细胞 ;观察O -2A祖细胞在有血清 (D/F + 2 0 %FCS)和无血清 (CDM )培养条件下的分化情况。免疫细胞化学法鉴定O -2A祖细胞(A2B5 )和分化成熟的 2型星形胶质细胞 (GFAP ,A2B5 )及少突胶质细胞 (CNPase)。结果 :①分离纯化的O -2A祖细胞胞体呈椭圆形 ,具有典型的双极或三极突起 ;经免疫细胞化学染色鉴定 ,A2B5抗体标记阳性 ,细胞纯度达 95 % ;②应用有血清的培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为 2型星形胶质细胞 ,2型星形胶质细胞的胞体较大 ,突起多而细长 ,GFAP和A2B5抗体标记均为阳性 ;③应用无血清的化学条件培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为少突胶质细胞 ,少突胶质细胞的胞体小 ,突起短而细 ,相互交织呈“蜘蛛网”样 ,CNPase抗体标记阳性。结论 :①采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 ,建立了分离纯化O -2A祖细胞的方法 ;②分离纯化的O
- 孙燕万明辉夏春林
- 关键词：新生大鼠大脑皮质O-2A祖细胞体外诱导细胞分化
- 大鼠FEZ1基因的克隆及其在中枢神经系统的表达被引量：1
- 2006年
- 轴突成束和延伸蛋白ζ-1(fasciculationandelongationproteinzeta-1,FEZ1),是线虫UNC-76蛋白在哺乳动物中的一种同系物,与轴突向外生长、成束、延伸相关。为了克隆该蛋白的基因并观察其在中枢神经系统(CNS)的表达情况,本研究通过FEZ1的特异引物从SD大鼠脑组织中经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得FEZ1基因;通过RT-PCR法分析FEZ1在生后7d的SD大鼠CNS的不同部位(大脑皮层、嗅球、脊髓)的表达情况。成功获得FEZ1的基因克隆,并观察到生后7d的SD大鼠的大脑皮层、嗅球、脊髓内均有FEZ1表达,且脊髓的表达水平较高。本研究结果为进一步研究大鼠FEZ1基因的生物学活性及在神经系统内的表达和应用奠定了基础。
- 何江虹朱婷夏春林张万钰张晔万明辉
- 关键词：FEZ1基因克隆中枢神经系统
- 体外培养获取高纯度O-2A祖细胞被引量：5
- 2002年
- 目的获取较高纯度的O-2A祖细胞,并观察在不同的实验条件下O-2A祖细胞的分化作用。方法 根据星形胶质细胞、O-2A祖细胞的生长时间差异,细胞的粘附特性不同,采用振荡和差速贴壁法结合Ⅰ型星形胶质细胞条件培养液,培养、分离纯化O-2A祖细胞。结果培养的o-2A祖细胞胞体呈椭圆形,有典型的双极突起,少数呈三极突起;经免疫组织化学染色鉴定细胞的纯度达90％。在有血清的情况下,O-2A祖细胞定向分化为Ⅱ型星形胶质细胞;在无血清的情况下,其定向分化为少突胶质细胞。结论通过振荡法和Ⅰ型星形胶质细胞条件培养液结合差速贴壁法分离纯化培养O-2A祖细胞是一种可行的培养方法。
- 孙燕夏春林何炎施婵宏万明辉
- 关键词：体外培养星形胶质细胞O-2A祖细胞细胞发育细胞分化差速贴壁法
- CBS与SEP在脊髓半切损伤后功能评定中的应用被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨稳定的脊髓损伤建模方法 ,为本研究室相关研究提供实验依据。方法 将 2 5只SD大鼠随机分为脊髓损伤组 (A组 ,行T12 椎板切除术 +脊髓左半切 )、假手术组 (B组 ,行T12 椎板切除术 ,不切脊髓 )及正常组 (C组 )。术后 1、2、3、4周行改良联合行为评分 (CBS) ,术后 2 4h及 4周行体感诱发电位 (SEP)等检测 ,观察神经功能恢复情况与一致性。结果 A组各周CBS与B、C组间差异有显著性 ,B、C组间差异无显著性。A组术后 2 4hSEP消失 ,术后 4周有恢复 ,较B、C组潜伏期延长、波幅减少 ,B、C组间差异无显著性。结论 该动物模型操作简单 ,动物存活率高且稳定 ,在脊髓损伤修复研究中有较好的应用前景。
- 施婵宏万明辉朱奇郭试瑜夏春林
- 关键词：脊髓损伤半切体感诱发电位
- 两型星形胶质细胞基因表达谱差异的初步观察被引量：2
- 2007年
- 目的:研究不同型别星形胶质细胞的基因表达谱,比较1型和2型星形胶质细胞基因表达谱之间的差异,以进一步研究两者的生物学特性及其功能。方法:原代培养新生SD大鼠大脑皮质混合胶质细胞,经振荡和差速消化纯化培养1型星形胶质细胞(T1A)和2型星形胶质细胞(T2A);应用基因芯片技术获取T1A和T2A的基因表达谱,并对两者的基因表达谱进行初步分析。结果:基因芯片上检测点4096个,共有差异表达基因267条,其中113条在T1A中高表达,154条在T2A中高表达。结论:本实验获得大鼠大脑T1A和T2A的基因表达谱,首次报道267条存在于T1A和T2A之间的差异表达基因。
- 严美娟万明辉李春鹏夏春林
- 关键词：星形胶质细胞细胞谱系基因表达谱基因芯片
- 电离辐射对离体培养O-2A祖细胞分化的影响被引量：1
- 2005年
- 背景与目的:电离辐射引起中枢神经系统脱髓鞘病变的主要靶细胞之一为O-2A祖细胞,其在体外可定向诱导分化为少突胶质细胞和Ⅱ型星形胶质细胞。本文旨在探索电离辐射对O-2A祖细胞分化的影响,为研究早期放射性脑损伤发病机理的研究提供实验基础。方法:利用新生SD大鼠脑混合胶质细胞原代培养、定向诱导分化和免疫细胞化学等技术,观察不同辐射剂量对O-2A祖细胞分化的影响,检测其数量、形态和分化比例的情况。结果:倒置显微镜下计数对照组O-2A祖细胞个数为24.80±3.70,照射2 Gy、10 Gy、30 Gy组分别为4.40±0.89、1.60±0.55、1.20±0.45,与对照组相比照射后O-2A祖细胞总数明显减少(P<0.001); 10 Gy、30 Gy组中诱导分化的少突胶质细胞和Ⅱ型星形胶质细胞的突起变粗变短,但各组间细胞分化比例未见明显变化(P>0.05)。结论:电离辐射对O-2A祖细胞的分化有较大影响,影响程度与辐射剂量存在量效关系。
- 陈暑波田野夏春林万明辉
- 关键词：电离辐射离体培养早期放射性脑损伤细胞原代培养祖细胞细胞总数
- 轴突成束和延伸蛋白ζ-1基因在1型和2型星形胶质细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的探讨轴突成束和延伸蛋白ζ-1(FEZ1)基因在1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)中的表达差异,及其在新生SD大鼠中枢神经系统中的表达。方法培养、分离、纯化T1A和T2A,提取总RNA,分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记T1A和T2A的mRNA,进行基因表达谱芯片检测分析。选取其中与轴突延伸相关的FEZ1基因,应用半定量RT-PCR法研究FEZ1在新生大鼠中枢神经系统多个部位的表达。结果T1A和T2A中差异表达基因138条,其中60条在T1A中高表达,78条在T2A中高表达。FEZ1基因在T2A中高表达。RT-PCR结果显示,FEZ1在新生大鼠中枢神经系统大脑皮层、嗅球和脊髓组织中均有表达。结论T1A和T2A中存在多个差异表达基因,其中与轴突延伸相关的FEZ1基因表达明显差异,提示T1A和T2A可能在诱导轴突生长方面有不同功能;FEZ1基因与中枢神经系统的发育和再生相关。
- 何江虹张晔夏春林张万钰朱婷万明辉
- 关键词：星形胶质细胞基因表达谱芯片反转录-聚合酶链式反应
