龚建明
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂氧素受体激动剂5（S），6（R），7-三羟基庚酸甲酯对地塞米松所致小鼠胎儿生长受限的保护作用及可能机制
- 2012年
- 目的探讨5（S），6（R），7-三羟基庚酸甲酯[5（S），6（R），7-trIHydroxyheptanoicacidnlethylester，BMl-111]对地塞米松所致小鼠胎儿生长受限的影响及可能机制。方法60只清洁级ICR雌性小鼠受孕后随机分为对照组、地塞米松组和BML111组。地塞米松组孕鼠妊娠第9天开始皮下注射地塞米松（5mg／kg），2h后皮下注射生理盐水（1mg／kg）；BML-111组孕鼠妊娠第9天开始皮下注射地塞米松，2h后腹腔注射BMl-111（1mg／kg）；对照组孕鼠相应时间皮下注射生理盐水（1mg／kg）。均为每天1次，连续6d。妊娠第18天眼球取血后处死孕鼠，取胎盘和子宫组织，免疫组织化学方法检测胎盘组织11β-羟基类固醇脱氢酶2（11β—hydroxysteroiddehydrogenase2，11β—HSDz）蛋白表达；逆转录聚合酶链反应技术检测胎盘组织11β—HSDz、白细胞介素-1β（interleukin-1β，Il-1β）及子宫组织脂氧素A4受体——甲酸基肽受体3（formylpeptidereceptor3，FPR3）mRNA的表达；酶联免疫吸附试验检测孕鼠血清脂氧素A4水平。组间差异比较采用单因素方差分析及两两检验。结果地塞米松组胎鼠平均体重为（0．823±0．054）g，低于对照组[（1．103±0．218）g]及BML-111组[（0．992±0．207）g]，差异均有统计学意义（t分别为-4．108和～2．890，P均〈0．05）。免疫组织化学方法检测显示，11β-HSD2表达于绒毛部位合体滋养层细胞胞质内，地塞米松组11p—HSDz蛋白表达强度较对照组及BML-111组低（0．030±0．019与0．058±0．015和0．049±0．026），差异均有统计学意义（t分别为-3．107和-2．211，P均〈O．05）。地塞米松组11BHSDzmRNA也较对照组及BML-111组低，分别为0．457±0．062、0．943±0．057和0．698±0．071，差异有统计学意义（t分别为-9．418和-4．617，P均〈0．05）。地塞米松组II。18mRNA（0．543±0．103）介于对照组（0．710±0．085）及BML-11】组（0．22
- 陈金霞黄引平许张晔汤彪龚建明汪敏
- 关键词：胎儿生长迟缓庚酸类地塞米松
- 脂氧素对滋养细胞氧化损伤的保护作用及其机制
- 2011年
- 目的研究脂氧素（1ipoxinA4，LXA。）在孕妇血清中的表达及其对滋养细胞氧化损伤的保护作用和作用机制。方法细胞实验分为6组，对照组；脂多糖（1ipop01ysaccharides，LPS）组：10μg／mlLPS作用24h；干预组：10μg／mlLPS＋100nmol／LLXA4作用24h；LXA4组：100nmol／LLXA4作用24h；拮抗组：10μg／mlLPS＋100nmol／LLXA44-100μmol／LN-叔丁氧羰基吡咯烷（N—tert—butoxycarbonyl一2PYrrolidine，BOC2）作用24h；BOC-2组：10μg／mlLPS＋100μmol／LBOC-2作用24h。采用酶联免疫吸附试验检测正常孕妇与子痫前期患者血清LXA4含量；以2，7-二氢二氯荧光素二乙酸酯为荧光探针检测滋养细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）水平；逆转录一聚合酶链反应检测超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）mRNA的表达；Western印迹分析SOD、转录因子NF-E2相关因子2（NF-E2一relatedfactor，Nrf2）的蛋白表达水平；黄嘌呤氧化酶法测定滋养细胞中SOD活性。结果（1）子痫前期患者血清LXA。水平为（165．53±18．89）g／L，与正常孕妇[（545．67±30．91）pg／L]相比明显下降（t=40．64，P〈0．01）。（2）LPS组与对照组相比，滋养细胞内二氯荧光素（dichlorofluorescein，DCF）密度值明显升高（P〈0．01），DCF密度值从53．。0±3．08上升至77．00±5．83（t=8．14，P〈0．01）；胞核中Nrf2蛋白、SODmRNA和蛋白表达均显著下降（￡分别为34．11、25．61和17．93，P均〈0．01）；滋养细胞上清中的s0D含量明显下调（t=12．16，P〈0．01）。（3）干预组与LPS组相比，滋养细胞内DCF密度值明显下降，DCF密度值从77．00±5．83降至62．00±3．39（t=4．97，P〈0．01），胞核中Nrf2蛋白、SODmRNA表达显著上升（t分别为11．74和13．17，P均〈O．01），SOD蛋白表达也有所升高（t=4．67，P〈O．05），滋养细胞上清中的SOD含量明显增加，酶活力上升至（8．93±0．53）U／ml（t=1
- 龚建明黄引平汤彪陈金霞周洁黄艳君
- 关键词：滋养层脂氧素类NF-
- 脂氧素对滋养细胞氧化损伤的保护作用及机制的研究
- 目的研究脂氧素(lipoxinA4,LXA4)在孕妇血清中的表达及其对滋养细胞氧化损伤的保护作用和作用机制。方法细胞实验分为6组:对照组,脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组:10μg/mlLPS作...
- 龚建明黄引平汤彪陈金霞周洁黄艳君
- 关键词：滋养细胞脂氧素NF-E2相关因子2超氧化物歧化酶
- 文献传递
- 脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞通透性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞通透性的影响。
- 庞花艳黄引平刘忠杰易攀龚建明郝华吴萍周洁蔡蕾黄艳君叶笃筠王振焕
- 关键词：脂氧素类脐静脉毛细血管通透性
- 脂氧素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激反应的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞氧化应激反应的影响.方法 切取正常妊娠剖宫产手术4 h内的新生儿脐带,从中分离出脐静脉内皮细胞并进行传代培养,将培养的脐静脉内皮细胞分成4组：空白对照组,脂多糖处理组（10 μg/ml脂多糖）,脂多糖＋脂氧素处理组（10μg/ml脂多糖＋100 nmol/L脂氧素）,脂氧素处理组（100 nmol/L脂氧素）.分别作用12 h和24 h后进行检测.采用免疫细胞荧光法检测核因子E2相关因子2（Nrf2）的表达及核转位情况、内皮细胞特异性Ⅷ因子的表达;采用逆转录（RT）PCR检测Nrf2、血红素加氧酶（HO）1和还原型辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶（NQO1）mRNA的表达.结果 （1）荧光显微镜下观察到脐静脉内皮细胞胞质内有黄绿色荧光反应,证实有内皮细胞特异性Ⅷ因子抗原存在.（2）免疫细胞荧光染色显示,空白对照组内皮细胞中Nrf2大部分表达在胞质,胞核内基本不表达.12 h后,脂多糖处理组Nrf2胞核内的表达增加,出现了由胞质向胞核的转位;但24 h后,Nrf2在胞质和胞核内的表达都明显下降.脂多糖＋脂氧素处理组在12 h和24 h,Nrf2在胞质和胞核中的表达均明显高于脂多糖处理组;脂氧素处理组Nrf2大部分表达在胞质中.（3）脂多糖处理组和脂多糖＋脂氧素处理组在12 h后,Nrf2和HO-1 mRNA表达水平分别为0.581±0.019、0.081±0.009及0.692±0.048、0.136±0.018,均明显高于空白对照组,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖处理组在12 h后,NQO1 mRNA表达为0.381±0.009,虽高于空白对照组的0.355±0.044,但差异无统计学意义（P＞0.05）,而脂多糖＋脂氧素处理组NQO1 mRNA表达为0.574±0.034,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖处理组24 h后,Nrf2和NQO1 mRNA的表达水平分别为0.180±0.017、0.472±0.064,与空白对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;脂多糖＋脂氧素处理组Nrf
- 刘忠杰黄引平易攀庞花艳龚建明黄艳君周洁吴萍叶笃筠郝华
- 关键词：脐静脉氧化性应激脂氧素类
- 脂氧素通过Nrf2信号通路对LPS诱导脐静脉内皮细胞氧化应激的抑制作用被引量：4
- 2011年
- 目的研究脂氧素对脂多糖(LPS)刺激的脐静脉内皮细胞引起的氧化应激的抑制作用及其机制。方法以LPS10μg/ml诱导脐静脉内皮细胞氧化应激,以不同浓度脂氧素(lipoxin A4,LXA4)进行干预,以2,7-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;细胞免疫荧光检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)转位变化;RT-PCR检测Nrf2及其下游抗氧化酶mRNA的表达;化学显色法测定脐静脉内皮细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX,GPX)活性。结果细胞内ROS测定显示,脂氧素能够有效地降低脐静脉内皮细胞内由LPS刺激引起的ROS升高;细胞免疫荧光结果显示,LPS组Nrf2主要在胞质中表达。而加入脂氧素干预后胞核可见较强的Nrf2的表达;其中加入200nmol/L脂氧素作用后胞核中的Nrf2的表达明显增强。RT-PCR结果显示,LPS组Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、SOD、GPX mRNA表达水平明显降低,加入脂氧素干预后Nrf2、HO-1、SOD、GPX mRNA表达水平均增加。化学显示法结果显示,LPS组脐静脉内皮细胞的SOD、GSH-PX的活性明显降低,使用100nmol/L和200nmol/L脂氧素干预后均能明显减少细胞的氧化损伤。结论脂氧素通过活化转录因子Nrf2来促进多种抗氧化酶的表达,进而减轻细胞内的氧化应激损伤。
- 龚建明黄引平
- 关键词：脐静脉内皮细胞脂氧素NRF2氧化应激
