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帕金森病相关蛋白PINK1和Parkin通过降解Miro影响线粒体运动被引量：2: 2012年; 帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）是一种以运动障碍、静止性震颤和肌肉僵直为特征的神经退行性疾病,65岁以上人群发病率为1%[1].其发病机制尚不清楚,线粒体功能障碍是可能原因之一,证据包括线粒体复合物Ⅰ特异性抑制剂能诱导PD发生[2],此外,部分家族性PD连锁基因也被证明参与调节线粒体功能,; 高磊蔡国平; 关键词：相关蛋白帕金森病神经退行性疾病降解

蜕皮甾酮的一种新用途: 本发明公开了B-ecdysterone在制备治疗和/或预防骨质疏松症的药物中的应用。本发明分别在整体和细胞水平研究B-ecdysterone对骨代谢的保护作用。B-ecdysterone与成骨细胞株MC3T3-E1和原代...; 史小军高磊聂勇; 文献传递

蜕皮甾酮的一种新用途: 本发明公开了B－ecdysterone在制备治疗和/或预防骨质疏松症的药物中的应用。本发明分别在整体和细胞水平研究B－ecdysterone对骨代谢的保护作用。B－ecdysterone与成骨细胞株MC3T3－E1和原代...; 史小军高磊聂勇; 文献传递

骨折后CHI3L1的表达变化及其功能研究: 2008年; 目的:研究在骨折过程中几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)的表达变化情况和CHI3L1蛋白可能具有的生物学功能。方法:构建了小鼠的骨折模型,同时用TNF-α在体外刺激成骨细胞,通过real time RT-PCR和Western blot检测CHI3L1表达变化情况。用抗TNF-α抗体中和TNF-α活性,验证TNF-α对CHI3L1表达的特异性诱导作用。用Bayl 1-7082抑制NF(?)B活化,考察NF(?)B活化对TNF-α的诱导作用是否是必须的。通过RT-PCR检测核结合因子a1(core binding factor a1,cbfa1)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达,同时测定碱性磷酸酶(ALP)活性,以检测成骨细胞分化状况。结果:在骨折炎症反应期和TNF-α刺激的成骨细胞中,CHI3L1表达明显升高。用抗TNF-α抗体或者Bayl 1-7082都能抑制TNF-α对CHI3L1的诱导作用。说明TNF-α首先活化NF(?)B,再由后者刺激CHI3L1表达。转染表达CHI3L1的载体后,成骨细胞的ALP活性增强,cbfa1、OCN的表达也明显升高。结论:TNF-α通过激活NF(?)B促进CHI3L1表达;在体外实验中,CHI3L1具有促进成骨细胞分化的活性。CHI3L1在骨折组织中很可能受到TNF-α等细胞因子诱导表达。在体内它可能通过刺激骨分化促进骨折愈合。; 高磊蔡国平; 关键词：骨折 TNF-Α 分化

小鼠几丁质酶的重组表达和抗体制备被引量：1: 2008年; 目的:检测脂多糖(LPS)刺激成骨细胞后,几丁质酶(chitotriosidase)基因表达变化情况。进行小鼠chitotriosi-dase的原核和真核表达,并利用原核表达纯化的蛋白,制备兔抗鼠多克隆抗体。方法:用LPS刺激MC3T3-E1细胞,提取mRNA,通过RT-PCR获得小鼠chitotriosidase的编码区全长序列,克隆进pRSET A载体,转化BL21菌株,IPTG诱导表达。获得的包涵体蛋白用镍柱纯化后,作为抗原免疫兔子,制备多克隆抗体。用该抗体检测真核表达的小鼠chitotriosi-dase蛋白,并确定抗体的灵敏度和特异性。结果:LPS明显刺激chitotriosidase表达。原核表达的包涵体蛋白经镍柱纯化后也能制备出效果较好的多克隆抗体。结论:成功地克隆表达了小鼠的chitotriosidase蛋白,并制备出高灵敏度、高特异性的多克隆抗体,为进一步阐明chitotriosidase在病理条件下的表达变化和功能提供了一条途径。; 高磊蔡国平; 关键词：几丁质酶脂多糖多克隆抗体

脂多糖诱导成骨细胞中CHI3L1表达的分子机制研究被引量：3: 2009年; 慢性骨髓炎因其病程漫长、易出现并发症以及复发率高成为临床上棘手的难题,其主要致病原因是金黄色葡萄球菌等革兰氏阴性菌感染.脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的重要成分,用LPS在体外刺激骨组织相关细胞在一定程度上可以模拟骨髓炎患者的病理特征.实时荧光定量PCR和Western blot等试验结果表明,在骨髓炎患者的骨组织和LPS刺激的成骨细胞中,几丁质酶家族成员CHI3L1的表达均有明显升高.核因子κB(NF-κB)萤光素酶报告载体检测结果显示,LPS能诱导细胞的NF-κB活化,NF-κB活化抑制剂Bay11-7082能抑制LPS诱导的CHI3L1表达升高.用抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抗体预处理细胞,或采用siRNA干扰的方法抑制TNF-α受体的表达,都能明显抑制LPS诱导的CHI3L1表达上调.同时,NF-κB活化抑制剂Bay11-7082预处理细胞能抑制LPS对TNF-α表达的诱导作用.结果提示,LPS通过激活NF-κB诱导TNF-α分泌上调,刺激CHI3L1表达.提出骨髓炎及脂多糖刺激条件下CHI3L1表达上调,并在细胞水平上初步探讨了脂多糖诱导CHI3L1表达的分子机制.; 高磊蔡国平; 关键词：骨髓炎脂多糖成骨细胞

M2ES急性毒性、体外溶血和全身主动过敏试验研究被引量：1: 2016年; 目的:根据新药申报要求,研究聚乙二醇修饰重组人血管内皮抑制素(M2ES)的急性毒性、制剂安全性和过敏性,为临床人用剂量设计和毒副反应监测等提供参考依据。方法:给BALB/c小鼠单次静脉注射375 mg·kg^(^(-1))的M2ES注射液,观察给药前后小鼠临床症状、体重变化和大体病理学变化。采用体外试管法,观察不同浓度M2ES对绵羊红血球细胞溶血的影响。分别于1 d、3 d和5 d给Hartley豚鼠静脉注射2.4 mg·m L^(-1)和12 mg·m L^(-1)的M2ES致敏,末次给药后14 d激发,观察M2ES引起的过敏反应症状并进行评分。结果:小鼠给药前后临床症状观察、体重变化和主要组织脏器的大体病理学检查均未见明显异常变化。M2ES在0.20、0.16和0.12 mg·m L^(-1)浓度下能够引起体外红细胞出现不同程度的溶血。M2ES高、低剂量组的全部豚鼠均未出现明显的过敏反应。结论:在本试验条件下,BALB/c小鼠单次静脉注射M2ES的未见毒性反应剂量为375 mg·kg^(-1)。M2ES在0.08 mg·m L^(-1)及以下浓度不引起体外红细胞溶血,在2.4和12.0 mg·m L^(-1)浓度时不能引起豚鼠产生全身性过敏反应。; 耿兴超周代福占顺利高磊王超彭茜李明杨艳伟李波; 关键词：BALB/C小鼠急性毒性体外溶血

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高磊