高建斌
- 作品数：9 被引量：25H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 秦川牛DKK1、DKK2和DKK4基因分子特征、SNPs检测及其与体尺和肉质性状的关联分析
- DKKs是一个保守基因家族,其成员DKK1、DKK2和DKK4基因具有高度序列同源性。它们主要参与骨骼生长发育和脂肪细胞分化调控。近年研究发现：DKK1基因主要调控骨骼形成和脂肪细胞分化,是骨再塑的重要调控因子;DKK2...
- 高建斌
- 关键词：基因体尺性状肉质性状
- 文献传递
- 秦川牛IRS-1基因多态性与体尺和肉质性状的相关性被引量：4
- 2012年
- 旨在研究秦川牛IRS-1基因外显子的多态性,及其与秦川牛体尺和肉质性状的相关性。选取384头同等饲养条件下的18～24月龄健康秦川牛母牛为研究对象,采用PCR-SSCP技术结合DNA测序技术检测IRS-1基因外显子上存在的SNPs位点,并将其与秦川牛体尺和肉质性状进行关联分析。经DNA测序发现,在IRS-1基因外显子的2 346(B1位点)和2 394bp处(B2位点)分别发生了G→A和C→G突变,经分析发现,分别为氨基酸序列第782处Glu和798处Leu的同义突变。通过SSCP带型分析分别出现CC、CD和AA、AB 2种基因型,均未检测出第3种纯合基因型;卡方检验显示,B1位点在所检测牛群中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而B2位点则处于Hardy-Weinberg极度不平衡状态(P<0.01);且B1处CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,处于低度多态状态;B2处基因型AA为优势基因型,A为优势等位基因,处于低度多态状态;关联分析表明,B1位点不同基因型个体间在体斜长、腰角宽、胸围和眼肌面积方面差异显著(P<0.05),B2位点在腰角宽、胸深和背膘厚方面差异显著(P<0.05)。将2个突变位点合并基因型进行单倍型分析发现,双杂合基因型个体(ABCD)除背膘厚和肌间脂肪含量外其他所分析的各性状均显著高于其他基因型组合,且多标记位点的组合效应值高于单标记位点。结果提示,IRS-1基因对秦川牛体尺及部分肉质性状有显著的影响,可以作为秦川肉牛新品系培育早期选择的候选基因,其中组合ABCD可能是影响秦川牛体尺和胴体性状的最佳基因型组合。
- 马向辉昝林森高建斌杨宁朱光星成功王洪宝郝瑞杰付常振姜碧杰詹小立白银萍
- 关键词：PCR-SSCP多态性合并基因型
- 秦川牛TNFSF11基因多态性及与体尺性状的相关性
- 2012年
- 为研究秦川牛TNFSF11基因多态性及其与秦川牛体尺性状的相关性,以399头同等饲养条件下的18～24月龄健康秦川母牛为研究对象,采用PCR-RFLP技术结合DNA测序技术检测TNFSF11基因的SNPs位点,并将其与秦川牛体尺性状进行关联分析。结果表明,DNA测序发现在TNFSF11基因第3内含子即34 080bp处(C331区域)和第3内含子34 096bp处(C332区域)分别发生C→T突变和T→C突变;PCR-RFLP分析发现,秦川牛TNFSF11基因C331区域经创造酶切位点后可以被限制性内切酶HincⅡ特异切割为有GG、GH和HH 3种基因型,C332区域可以被内切酶BseLⅠ特异切割为MM、MN和NN 3种基因型;与测序结果比对显示,秦川牛TNFSF11基因C331、C332各酶切基因型与测序结果显示相一致。卡方检验显示,C331位点在所检测牛群中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而C332位点则处于Hardy-Weinberg极度不平衡状态(P<0.01);且C331处GH基因型为优势基因型,G等位基因为优势等位基因,处于中度多态状态;C332处基因型MM为优势基因型,M等位基因为优势基因,处于中度多态状态;关联分析表明,C331位点不同基因型个体间在腰高、腰角宽和胸围方面差异显著(P<0.05),C332位点在体斜长和腰高方面差异显著(P<0.05)。经连锁不平衡检测发现,两位点存在一定的连锁特性(r2=0.213),将两突变位点进行单倍型分析可知,HHMM基因型各性状均显著高于其他基因型组合,且多标记位点的组合效应值高于单标记位点。说明TNFSF11基因对秦川牛体尺性状有显著的影响,可以作为秦川肉牛新品系培育早期选择的候选基因,其中组合HHMM可能是影响秦川牛体尺胴体性状的最佳基因型组合,在选育中应加大其选择力度。
- 马向辉昝林森杨宁高建斌朱光星成功王洪宝郝瑞杰付常振姜碧杰詹小立
- 关键词：PCR-RFLP多态性单倍型
- 牛SREBP1基因shRNA序列的筛选及其腺病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2013年
- 【目的】筛选可靶向干扰牛的SREBP1基因的有效shRNA,构建相应腺病毒载体并包装重组腺病毒,为在细胞水平上研究SREBP1基因的功能和作用机制提供基础。【方法】以秦川牛SREBP1基因为研究对象,首先靶向其编码区(coding sequence,CDS)序列设计并合成6条干扰和1条阴性对照shRNA,并构建表达载体pENTR-U6-shRNA。然后与载体psiCHECK-Ⅱ-SREBP1共转染293A细胞,筛选有效的pENTR-U6-shRNA。其次将筛选的pENTR-U6-shRNA和阴性对照pENTR-U6-NC分别与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST体外重组,得到腺病毒重组载体,并在293A细胞包装扩繁得到高滴度腺病毒,GFP标记法测定病毒滴度。最后将病毒侵染牛前体脂肪细胞,实时荧光定量法(qRT-PCR)检测干扰效率。【结果】筛选出靶向牛SREBP1基因干扰效率为87.4%的shRNA-1053。构建了pAd-1053和阴性对照pAd-NC重组腺病毒载体并包装得到Ad-1053和Ad-NC高滴度病毒,测定得到的病毒滴度分别为7×108 GFU·mL-1和9×108 GFU·mL-1。Ad-1053和Ad-NC分别侵染牛前体脂肪细胞,qRT-PCR检测结果显示Ad-1053可显著降低SREBP1基因的mRNA水平(干扰率>85%),而Ad-NC对SREBP1基因表达无明显影响。【结论】成功筛选得到靶向干扰牛SREBP1基因的有效shRNA,并包装扩繁获得相应的高滴度重组病毒。
- 付常振昝林森王虹成功王洪宝李耀坤姜碧杰高建斌杨宁
- 关键词：SHRNA重组腺病毒
- 胰岛素诱导牛成肌细胞成脂分化的研究被引量：2
- 2014年
- 【目的】建立稳定成熟的牛成肌细胞胰岛素诱导成脂分化体系,为肉牛肉脂品质的改良提供参考。【方法】取1日龄荷斯坦公牛犊后腿肌肉,用Ⅳ型胶原酶消化法分离成肌细胞,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化,以未添加胰岛素的培养基为对照组,检测成肌细胞成脂分化过程中细胞形态的变化,并分析与成肌细胞和脂肪细胞分化相关基因(C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ、Myf5、MyoD)分别诱导第3,6,9,12,15天相对表达量的变化,分析牛成肌细胞的诱导分化情况。【结果】成功分离培养了牛原代成肌细胞。胰岛素处理组细胞中脂滴的油红O染色明显,C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ和MyoD相对表达量明显增高,C/EBPα和Myf5基因相对表达量则下降;用DMEM高糖培养基+体积分数10%胎牛血清(FBS)培养时,C/EBPs基因相对表达量总体高于DMEM高糖培养基+体积分数20%FBS+体积分数10%马血清(HS)。【结论】成功分离并鉴定了牛成肌细胞,建立了适于牛成肌细胞的体外培养体系,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化效果好。
- 皇甫一凡昝林森王洪宝成功刘扬高建斌李耀坤杨宁
- 关键词：成肌细胞成脂分化胰岛素PPARΓ基因
- 西北农区奶牛遗传改良与DHI测定分析被引量：4
- 2011年
- 通过调研西北5省农区的奶牛养殖现状,收集有关遗传改良和生产性能数据资料,并加以统计分析,讨论了西北农区奶牛遗传改良工作中现存问题,认为奶牛DHI测定体系对奶牛养殖的生产与管理具有重要意义,提出了今后发展与完善奶牛遗传改良工作和DHI测定体系的建议和措施,为进一步加快西北5省农区奶牛遗传改良工作和提高奶牛生产性能水平,提供了一定的参考价值。
- 高建斌昝林森辛亚平
- 关键词：奶牛DHI
- 陕西关中地区奶牛遗传改良与DHI测定效果分析被引量：7
- 2011年
- [目的]为了掌握陕西关中地区奶牛改良效果,为制定下一步发展目标提供依据。[方法]通过DHI测定,分别对不同养殖规模的奶牛场遗传改良和生产性能数据收集和统计分析。[结果]表明:陕西关中地区奶牛养殖规模日益增强,2 000头以上的养殖公司达到了72.29%,而且普通冻精使用率达到94.02%,性控冻精利用率达到了4.36%,良种胚胎使用率达到了1.62%,情期受胎率达到了56.73%,犊牛成活率达到了93.42%,母犊初生重达到了36.50 kg,母牛305 d产奶量达到6 617.02 kg,均较小区和专业村养殖结果高。[结论]通过DHI测定建立数字化的评估体系,对推动本地区奶牛发展水平具有重要的意义。
- 高建斌昝林森辛亚平皇甫一凡
- 关键词：奶牛DHI
- 秦川牛DKK1基因SNPs检测及其与体尺、肉质性状的关联分析被引量：6
- 2013年
- 旨在对秦川牛DKK1基因进行SNPs检测,并研究其与秦川牛体尺、肉质性状的相关性。本研究随机选择相近饲养条件下447头18～24月龄的秦川牛母牛,采用DNA直接测序技术并结合PCR-SSCP方法进行DKK1基因全区段遗传变异检测。运用SPSS16.0程序中最小二乘法拟合线性模型对DKK1基因不同基因型与秦川牛体尺(体斜长、体高、腰高、尻长、腰角宽、胸深、胸围和坐骨端宽)和肉质性状(背膘厚、眼肌面积和肌间脂肪含量)进行关联分析。经DNA测序发现秦川牛DKK1基因存在5个突变位点,分别为第一内含子G523A突变;第二内含子A999G和A1 169G突变;第三内含子C1858T突变;第四外显子A2355G突变,其为第247位氨基酸Cys→Arg的错义突变。PCR-SSCP方法检测得到G523A和A2355G位点仅存在2种基因型;A999G、A1169G和C1858T位点存在3种基因型。卡方检验显示,G523A、A1169G和A2355G位点则处于Hardy-Weinberg极度不平衡状态(P<0.01),而A999G和C1858T位点于检测群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析表明,秦川牛DKK1基因不同突变位点的不同基因型与体斜长、体高、腰高、尻长、坐骨端宽和背膘厚、眼肌面积、肌间脂肪含量差异显著相关(P<0.05或P<0.01)。DKK1基因对秦川牛部分体尺、肉质性状有显著的影响,可以尝试作为秦川肉牛新品系培育的主效候选基因。
- 高建斌昝林森杨宁李耀坤皇甫一凡郝瑞杰马向辉付常振姜碧杰成功
- 关键词：SNPSPCR-SSCP体尺性状肉质性状
- 内蒙古农区部分高产奶牛遗传改良与DHI测定效果分析
- 2012年
- [目的]了解掌握内蒙古农区部分高产奶牛遗传改良和DHI测定效果,为高产奶牛良种繁育体系的建立和高效养殖提供科学依据。[方法]通过数据资料的收集、整理,统计分析内蒙古农区部分高产奶牛遗传改良效果和生产性能水平。[结果]内蒙古农区高产奶牛养殖规模日益增强,成年牛比例占56.08%。使用冻精改良后,情期受胎率为49.36%、犊牛成活率达到97.13%,母犊初生体重为38.93kg/头,成年牛305d产奶量均达7249.16kg,乳脂率和乳蛋白含量分别达到3.69%、3.24%,且脂蛋白比均达到1.14。[结论]充分应用阿菲金系统构建"数字化"的评估管理体系,完善DHI测定机制,对建立健全内蒙古农区高产奶牛良繁体系,推动奶牛规模化高效养殖具有重要的意义。
- 窦铖高建斌杨宁昝林森
- 关键词：DHI
