成功
- 作品数：53 被引量：88H指数：5
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家肉牛牦牛产业技术体系项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理生物学医药卫生更多>>
- 秦川牛IRS-1基因多态性与体尺和肉质性状的相关性被引量：4
- 2012年
- 旨在研究秦川牛IRS-1基因外显子的多态性,及其与秦川牛体尺和肉质性状的相关性。选取384头同等饲养条件下的18～24月龄健康秦川牛母牛为研究对象,采用PCR-SSCP技术结合DNA测序技术检测IRS-1基因外显子上存在的SNPs位点,并将其与秦川牛体尺和肉质性状进行关联分析。经DNA测序发现,在IRS-1基因外显子的2 346(B1位点)和2 394bp处(B2位点)分别发生了G→A和C→G突变,经分析发现,分别为氨基酸序列第782处Glu和798处Leu的同义突变。通过SSCP带型分析分别出现CC、CD和AA、AB 2种基因型,均未检测出第3种纯合基因型;卡方检验显示,B1位点在所检测牛群中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而B2位点则处于Hardy-Weinberg极度不平衡状态(P<0.01);且B1处CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,处于低度多态状态;B2处基因型AA为优势基因型,A为优势等位基因,处于低度多态状态;关联分析表明,B1位点不同基因型个体间在体斜长、腰角宽、胸围和眼肌面积方面差异显著(P<0.05),B2位点在腰角宽、胸深和背膘厚方面差异显著(P<0.05)。将2个突变位点合并基因型进行单倍型分析发现,双杂合基因型个体(ABCD)除背膘厚和肌间脂肪含量外其他所分析的各性状均显著高于其他基因型组合,且多标记位点的组合效应值高于单标记位点。结果提示,IRS-1基因对秦川牛体尺及部分肉质性状有显著的影响,可以作为秦川肉牛新品系培育早期选择的候选基因,其中组合ABCD可能是影响秦川牛体尺和胴体性状的最佳基因型组合。
- 马向辉昝林森高建斌杨宁朱光星成功王洪宝郝瑞杰付常振姜碧杰詹小立白银萍
- 关键词：PCR-SSCP多态性合并基因型
- 秦川肉牛脂肪细胞PLIN 2基因干扰siRNA筛选及过表达载体效率检测被引量：2
- 2021年
- 试验旨在获得秦川牛肉用新品系(以下简称“秦川肉牛”)具有高干扰效率的脂肪细胞分化相关蛋白2(PLIN2)基因干扰siRNA及高过表达效率的基因超表达载体,为后续研究PLIN 2基因在秦川肉牛脂肪细胞分化过程中的功能提供试验依据。通过采用siRNA介导的靶基因沉默技术合成靶向牛PLIN2 mRNA序列的si-PLIN2及构建真核pcDNA3.1(+)-PLIN2过表达载体,利用FuGENE■ 6低毒性转染试剂配制转染复合物,转染秦川肉牛脂肪细胞并进行诱导分化。采用实时荧光定量PCR检测技术检测各试验组与对照组中PLIN 2基因的相对表达量,并计算目的基因干扰及过表达效率;采用Western blotting方法检测蛋白水平的表达情况;采用BODIPY脂滴染色的方法观察表型。结果表明,转染秦川肉牛前体脂肪细胞后干扰组3对si-PLIN2(si-PLIN2_01、si-PLIN2_02和si-PLIN2_03)与对照组(si-PLIN2-NC)相比,PLIN 2基因表达量下降(P<0.01),干扰效率分别为71%、54%和50%;蛋白水平检测发现,si-PLIN2_01、si-PLIN2_03组蛋白水平表达与对照组(si-PLIN2-NC)相比出现下降趋势;脂滴染色后发现,干扰组与对照组相比,脂滴数目明显减少。过表达组pcDNA3.1(+)-PLIN2与对照组相比,PLIN2基因表达量显著上调,达35倍,脂滴数目明显增多。综上所述,siRNA介导的PLIN 2基因沉默或pcDNA3.1(+)介导的体外表达载体均可以成功实现对PLIN 2基因在秦川肉牛脂肪细胞分化过程中的干扰或超表达,并影响脂肪细胞分化过程中脂滴的形成数量。本研究为进一步探究PLIN2在秦川肉牛脂肪细胞分化过程中的功能奠定基础。
- 李佩韦张薇依成功昝林森
- 关键词：秦川肉牛基因干扰
- 陕西秦岭地区珍稀野生动物保护研究现状及保护对策被引量：7
- 2020年
- 秦岭作为全球34个生物多样性热点地区之一,同时也是中国生物多样性最丰富的两个地区之一,被称为“中华基因库”。近年来,随着秦岭生态修复、生态保护力度加大,秦岭已建成了各类自然保护区33个,为作为秦岭名片的大熊猫、金丝猴、羚牛、朱鹮等国家Ⅰ级保护动物栖息地保护提供了机遇。本文在对秦岭保护区概况,大熊猫、金丝猴、羚牛、朱鹮等秦岭珍稀野生动物保护研究现状进行分析的基础上提出对策建议,为今后秦岭地区珍稀野生动物保护提供理论依据和指导。
- 成功任宏涛陈嘉玥杨森龙凤昝林森
- 关键词：珍稀野生动物
- 一种与肉牛肉质性状相关联的BBS2分子标记及其检测试剂盒
- 本发明公开了一种与肉牛肉质性状相关的BBS2分子标记、检测试剂盒及其应用，该分子标记位于BBS2基因编码区的g.24223562G/A位点、g.24226239C/T位点和g.24227851G/A位点，与肉牛眼肌面积、...
- 成功张孜怡杨森陈嘉玥田媛龙凤李奇隆昝林森
- 动物转基因技术在转基因牛中的研究进展被引量：3
- 2012年
- 本研究综述了目前应用于转基因牛中原核显微注射法、体细胞克隆法、病毒载体法等传统动物转基因技术以及具有应用前景的ZFN技术、TALEN技术和iPS技术等。概述了20年来国内外转基因牛重要的研究进展,并就目前转基因牛在乳腺生物反应器、抗病育种、品种改良主要3个方面的应用进行了介绍。在此基础上,就目前转基因牛育种中存在的问题及今后发展趋势进行了讨论,以促进转基因牛技术的发展。
- 张兆顺成功昝林森
- 关键词：转基因牛乳腺生物反应器
- 一种密码子优化的重组人溶菌酶基因及其应用
- 本发明涉及一种密码子优化的重组人溶菌酶基因及其应用，该密码子优化的重组人溶菌酶基因是通过比较牛乳腺优势乳蛋白高频密码子和低频密码子对人溶菌酶密码子进行全局优化(Lyzop)和翻译起始后23位密码子进行优化(Lyzop23...
- 成功昝林森王力
- 人溶菌酶密码子优化及其在牛乳腺细胞中高效表达被引量：2
- 2020年
- 【目的】分析牛乳腺中7种主要乳蛋白基因密码子使用偏好性,筛选高频密码子和低频密码子,依据其对人溶菌酶基因进行密码子局部优化和全局优化,通过牛乳腺上皮细胞等多种细胞对优化效果进行分析评价,为提高重组人溶菌酶表达量,开发新型、高效、安全的重组人溶菌酶提供理论依据。【方法】利用CodonW和EMBOSS等软件对7种主要牛乳蛋白和人溶菌酶基因密码子偏好进行生物信息学分析,筛选牛乳蛋白基因高频、低频密码子并根据牛乳蛋白基因密码子使用偏好对人溶菌酶基因翻译起始区前22位密码子(LYZop22)和全局密码子(LYZop)分别进行优化。构建人溶菌酶-荧光素酶融合表达载体(pGL3-LYZcw/op22/op)和人溶菌酶过表达载体(pcDNA-LYZcw/op22/op),将上述载体分别转染牛乳腺上皮细胞(BMEC)、牛成纤维细胞(BFFC)和C127小鼠乳腺上皮细胞等3种细胞,通过荧光素酶、实时荧光定量PCR及Western-blot等方法检测密码子优化对溶菌酶表达的影响。【结果】牛乳蛋白基因密码子偏好以GC结尾,GC3s平均含量为0.537±0.062,而人溶菌酶GC3s含量为0.407,偏好以AT结尾;聚类结果表明,牛乳中酪蛋白与乳清蛋白类基因在密码子使用偏好性上也存在一定差异。依据筛选获得的牛主要乳蛋白基因5个高频密码子(RSCU>1.5)和7个低频密码子(RSCU<0.5)对人溶菌酶基因密码子进行优化并转染多种细胞进行表达效果分析。荧光素酶分析发现,相比野生型溶菌酶密码子(LYZcw),翻译起始区密码子优化类型LYZop22分别在BMEC、BFFC细胞中提高1.48倍(P<0.01)和1.30倍(P>0.05);而全局密码子优化类型LYZop分别在BMEC、BFFC中提高2.2倍(P<0.01)和2.44倍(P<0.01),说明密码子优化能明显提高人溶菌酶在多种细胞中表达量。实时荧光定量PCR结果表明,LYZop22相比LYZcw在BMEC和BFFC细胞中分别提高了2.08倍(P<0.05)和1.5倍(P>0.05),而LYZop则分别提高了22倍(P<0.01)和1
- 田媛王力龙凤昝林森成功
- 关键词：人溶菌酶密码子优化实时荧光定量PCRWESTERN-BLOT
- 牛全基因组测序研究进展被引量：1
- 2015年
- 牛作为反刍动物的代表,具有独特的生物学特征和重要的哺乳动物进化地位,是人类生产活动的重要工具和肉、奶等物质需求的主要来源。近10年来,牛全基因组研究取得了很多重要的进展,为解释牛的生物学特征和加快品种的分子育种进程发挥了重要作用,文章重点介绍了牛全基因组测序的相关研究成果,以及测序工作完成后的研究进展,讨论了牛全基因组测序工作的机遇、研究重点,以及今后面临的挑战。
- 王洪程梅楚刚昝林森成功李安宁王洪宝
- 关键词：全基因组测序
- Snail1对牛脂肪细胞增殖分化影响及作用机制的研究
- 2023年
- 旨在探究Snail 1基因对于牛脂肪细胞增殖分化的影响及其潜在的作用分子机制。本研究利用腺病毒在秦川牛脂肪细胞中过表达Snail 1基因并设置试验组和对照组各3个生物学重复,采用流式细胞术、CCK-8、EdU染色、油红O染色、甘油三酯测定、qRT-PCR和蛋白质印迹等试验方法探究Snail 1对牛脂肪细胞增殖和分化的影响;进一步通过RNA-Seq、双荧光素酶报告试验筛选其作用信号通路及靶基因。结果表明,过表达Snail 1抑制了细胞增殖(CCK-8)且减少了处于S复制期阳性细胞比例(EdU,P<0.05)。结合流式细胞术试验,结果表明Snail 1上调导致了细胞周期G1/S期阻滞。进一步的实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果表明,Snail 1抑制了细胞周期蛋白基因CCNB1、CCND 2的表达(P<0.05)。对诱导分化第6天牛脂肪细胞进行油红O染色和甘油三酯检测,结果表明Snail 1抑制了牛脂肪细胞的成脂分化和甘油三酯的生成。qRT-PCR分析表明,过表达Snail 1抑制了PPARγ(P=0.06)、FABP4(P<0.05)、LPL(P<0.05)基因表达,而PIK 3R3基因表达水平显著上调(P<0.01);蛋白质印迹结果表明,Snail 1表达显著抑制了FABP4蛋白表达。进一步通过RNA-Seq测序分析发现,Snail 1过表达引起的差异基因主要富集在PPAR、ECM受体互作、PI3K-AKT、MAPK、尼古丁成瘾及胰岛素分泌等信号通路。基于FIMO靶基因筛选联合RNA-Seq数据分析及荧光素酶试验等证实,转录因子Snail1可能通过靶向Wnt信号通路的拮抗剂SFRP2影响牛脂肪细胞的分化过程。Snail 1基因抑制牛脂肪细胞的增殖和分化过程,且可能通过“Snail1/SFRP2-Wnt/β-catenin-GSK3β”正反馈环参与了牛脂肪细胞分化调控过程。
- 张文涛刘晨阳朱炳霖柳丽田媛姚宇航成功
- 关键词：脂肪细胞RNA-SEQ
- 秦川牛肉用选育与生物技术育种
- 牛因产于陕西关中八百里秦川而得名,是中国黄牛代表性品种之一,具有优良的种用价值和肉用价值.但也存在着生长发育较慢、产肉率较低、肌间脂肪沉积不够理想等不足.通过秦川牛本品种选育和现代生物技术育种相结合的方法,可以明显的加快...
- 成功咎林森王洪宝魏胜娟王洪程
- 关键词：品种选育生物育种技术
