骆晓佩
- 作品数:4 被引量:40H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金:吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究被引量:34
- 2004年
- 利用发根农杆菌A4 菌株在人参根外植体上直接诱导产生发根。在 1 2MS固体培养基上建立起发根离体培养系 ,经连续多代的培养 ,发根仍保持旺盛生长状态。PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌Ri 质粒的rolC基因已在人参发根基因组中整合并得到表达。液体培养基中发根生长速度约为固体培养的 2倍。经对发根中人参皂苷含量及比生长速率的测定 ,筛选出高产发根系R992 3。利用HPLC法测定了R992 3发根系中单体皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2和Rd的含量 ,人参总皂苷含量达 15 2mg g。确定 1 2MS培养液 (3 0g L蔗糖 )、摇床转速 110r min、每 2周更换一次培养液、继代培养时间 4周 ,为人参发根生长适宜条件。探讨了培养容积。
- 赵寿经李昌禹钱延春骆晓佩张昕王雪松康波愈
- 关键词:发根农杆菌人参固体培养基质粒人参皂苷
- 诱导人参发根的rolC基因植物表达载体构建及其在人参中的表达被引量:6
- 2004年
- 根据Slightom等RiA4TL DNA序列分析结果 ,设计了一对引物 ,以Ri 质粒DNA为模板 ,利用PCR方法对rolC基因进行了扩增。利用pGEM T载体对rolC基因进行了克隆和测序。结果 ,克隆的DNA片段序列与报道的ORF1 2阅读框内的rolC序列一致。将pGEM T rolC用限制性内切酶SacI酶切 ,与经SmaI酶切CIAP去磷酸化的pUC1 9质粒重组 ,经蓝白斑筛选得到正向重组的pUC1 9 rolC。再用Xbal SacI双酶切pUC1 9 rolC与pBI1 2 1 ,将rolC基因定向克隆到具有CaMV35S启动子的pBI1 2 1表达质粒上 ,构建成植物表达载体pBI rolC。用pBI rolC转化农杆菌LBA440 4构建成的LBA440 4 (pBI rolC)工程菌转化人参子叶 ,获得发根的表达。经PCR扩增分子检测 ,证明rolC基因确已整合到人参发根基因组中。经对转化的人参发根中单体皂苷含量测定 ,发现发根中含有所检测的 7种人参单体皂苷 ,总皂苷含量达 1 8 5 5mg g。
- 赵寿经李昌禹骆晓佩钱延春战文宗孙琳
- 关键词:C基因人参发根粒重
- 控制人参皂苷合成基因的分离、克隆及其表达
- 李昌禹赵寿经臧埔马海琴杨振堂陈立志彭凤华施安国钱延春骆晓佩戚欢
- 该研究首次成功诱导出人参发根,并建立了人参发根的发根农杆菌转化系统。在国内证实,人参发根是由发根农杆菌Ri 质粒TL-DNA上rolC基因转化产生的,且证实rolC基因是促进人参发根中皂苷合成的基因,发根中皂苷的含量与r...
- 关键词:
- 关键词:人参皂苷合成基因基因分离基因克隆基因表达
- 长白山动植物开发利用研究-人参高产发状根无性系的建立及人参皂苷工厂化生产
- 赵寿经臧埔李昌禹马海琴赵家平钱延春杨镇堂彭凤华施安国李军华骆晓佩张昕蒋磊王玉方金春爱
- 该项目利用发根农杆菌,在人参根外植体上成功诱导出人参发根,使发根诱导率达到31%;建立了R98111及R9923高产发根系,其生长速率超过国外最新报道;对人参发根适宜培养条件和生长规律进行了大量系统的研究,建立了人参皂苷...
- 关键词:
- 关键词:人参人参皂苷