马苏
- 作品数:12 被引量:48H指数:4
- 供职机构:南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定
- 本文采用差速离心,半饱和硫酸氨沉淀和蔗糖密度梯度离心法提纯O型口蹄疫病毒,将纯化的病毒免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法3次克隆,获得了2株稳定分泌O型口蹄疫单克隆...
- 段舒怡姜平李玉峰马苏杜以军杨晓伟
- 关键词:口蹄疫病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白中和性单克隆抗体研制
- 目的:研制猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的单克隆抗体(McAb).方法:将GP5基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,利用构建成的重组真核质粒免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSVGP5蛋白单抗.建立间...
- 马苏姜平段舒怡李玉峰
- 关键词:PRRSVGP5蛋白质粒单克隆抗体中和抗体
- 文献传递
- O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定
- 采用差速离心,半饱和硫酸氨沉淀和蔗糖密度梯度离心法提纯O型口蹄疫病毒,将纯化的病毒免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2,0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法3次克隆,获得了2 株稳定分泌O型口蹄疫单克隆抗...
- 段舒怡姜平李玉峰马苏杜以军杨晓伟
- 关键词:O型口蹄疫病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 表达PRRSV M蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究被引量:15
- 2005年
- 本研究通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株的M蛋白基因,将其克隆重组到人 血清5型腺病毒载体中,转染293细胞,制备重组腺病毒rAd-M。RT-PCR和IFA方法鉴定,结果表明rAd-M可表 达M基因的mRNA和M蛋白。纯化的rAd-M重组腺病毒经293细胞连续传25代,滴度稳定为107.8 TCID50/ mL。动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒rAd-M能够刺激机体产生PRRSV的特异性抗体免疫和细胞免疫应 答反应,从而为PRRSV结构蛋白功能及其基因工程疫苗研究奠定了基础。
- 汤景元姜平蒋文明马苏李玉峰
- 关键词:重组腺病毒免疫反应PRRSVM蛋白
- DNA免疫法研制抗猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白中和性单克隆抗体被引量:7
- 2006年
- 目的:研制抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体(McAb),以期获得中和性单克隆抗体。方法:将PRRSVM蛋白的基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,利用构建成的重组真核质粒免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSVM蛋白的单抗,建立间接ELISA方法筛选阳性克隆。利用试剂盒检测Ig亚类。通过免疫印迹(Western blot)、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定McAb的特异性。间接ELISA和病毒中和试验检测杂交瘤细胞上清McAb效价和腹水McAb效价。结果:获得3株可分泌特异性抗PRRSVM蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7、4G3、51:3。1A7和4G3的Ig亚类为IgM。ELISA检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:54~1:1024,腹水效价为1:3200~1:10240。同时用Western blot、IFA检测,结果均是阳性。4G3和1AT相对亲和力不同,证明其识别不同抗原位点。1AT和4G3具有病毒中和活性,中和效价达到1:96。结论:获得2株特异性抗PRRSVM蛋白的中和性单抗,为PRRSV诊断和免疫预防研究奠定了重要基础。
- 马苏姜平李玉峰段舒怡
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体M蛋白质粒中和抗体
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5、M和N蛋白单克隆抗体的研制及生物学特性分析
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起一种以感染猪发热、厌食,妊娠母猪晚期流产、早产、产死胎、弱胎和木乃伊胎,各种年龄猪(特别是仔猪)呼吸障碍为特征的高度传染性疾病。猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),与马动脉炎病毒...
- 马苏
- 关键词:猪繁殖呼吸综合征病毒N蛋白GP5蛋白M蛋白
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白中和性单克隆抗体的制备与免疫学特性测定被引量:4
- 2008年
- 利用重组真核质粒pcDNA3-GP5免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到3株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,分别命名为4C9、5D10、5F12,其中5D10的Ig亚类为IgM。ELISA检测杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价为1:64~1:1024,腹水的效价为1:3200~1:10240,IFA和IPMA的检测结果均为阳性。Western-blot检测证明,这3株McAb均针对PRRSV的GP5蛋白。中和试验表明,5D10和5F12具有病毒中和活性,中和效价分别为1:40和1:80。5D10相对亲和力大于5F12,3株细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体,表明抗GP5蛋白中和性McAb制备成功。
- 马苏戴建君李玉峰段舒怡姜平
- 关键词:GP5蛋白单克隆抗体中和抗体
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白中和性单克隆抗体研制
- 目的研制猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的单克隆抗体(McAb).方法将GP5基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1,利用构建成的重组真核质粒免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSVGP5 蛋白单抗。建立间接...
- 马苏姜平段舒怡李玉峰
- 关键词:GP5蛋白质粒
- 文献传递
- O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定被引量:9
- 2007年
- 目的为了获得针对O型口蹄疫病毒的单克隆抗体,本研究采用差速离心、半饱和硫酸铵沉淀和蔗糖密度梯度离心法提纯O型口蹄疫病毒液,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和SP2/0细胞融合,经ELISA方法筛选和3次亚克隆后获得2株稳定分泌表达的杂交瘤细胞株2C8和5G10,腹水抗体效价分别达到1∶6 400和1∶25 600。经亚类鉴定确定两株单抗均为IgM型,Western-blot、间接ELISA和IFA确定这2株单克隆抗体分别针对O型口蹄疫病毒VP1蛋白不同表位,从而,为研究FMDV的生物学特性和建立快速诊断方法的建立奠定了基础。
- 段舒怡姜平李玉峰马苏杜以军杨晓伟
- 表达PRRSV M蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究
- 本研究通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株的M蛋白基因,将其克隆重组到人血清5型腺病毒载体中,转染293细胞,制备重组腺病毒rAd-M。RT-PCR和IFA方法鉴定,结果表明rAd-M可表达...
- 汤景元姜平蒋文明李玉峰马苏
- 关键词:PRRSV重组腺病毒免疫反应