马学斌
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系端粒酶活性的抑制作用被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色。人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetrascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分。本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用。方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hTERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERTmRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中。转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P<0.05);转染组细胞中野生型hTERTmRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%。结论:hTERTcDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERTmRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长。
- 马学斌韩为东郝好杰李琦徐周敏卢学春赵亚力
- 关键词：反义HTERT端粒酶活性
- 膀胱癌的早期无创诊断新方法研究进展
- 2002年
- 膀胱癌是泌尿生殖系统的高发肿瘤 ,它的早期诊断对临床有重要意义。本文综述膀胱癌的早期无创诊断新方法 ,并与传统的尿脱落细胞学及膀胱镜检查相比较。
- 马学斌赵亚力
- 关键词：无创诊断BTA核基质蛋白22微卫星DNA端粒酶逆转录酶端粒酶
- A549肿瘤细胞中特异性hTERT-siRNA的干扰作用研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究hTERT特异的siRNA对肿瘤细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用。方法 设计和构建由U6启动子驱动的产生特异hTERT的siRNA表达质粒 ,转染至A5 4 9肺肿瘤细胞 ,以TRAP ELISA方法观察细胞端粒酶活性 ,Westernblot检测端粒酶蛋白的表达 ,MTT法检测对细胞生长的影响。结果 构建的针对hTERT基因 74 5靶位点的U6表达质粒具有明显的干扰效果 ,受到特异hTERT siRNA干扰的A5 4 9肿瘤细胞端粒酶表达下调 ,细胞生长受抑。结论 应用RNA干扰技术可阻止hTERT基因的表达 ,有望成为肿瘤基因治疗新的研究方向。
- 赵亚力韩卫东宋海静李琦马学斌郝好杰
- 关键词：肿瘤细胞端粒酶RNA干扰
- 小干扰RNA特异性抑制肺肿瘤细胞A549中绿色荧光蛋白基因表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨绿色荧光蛋白 (greenfluorescenceprotein ,GFP)特异的小干扰RNA (smallinterferenceRNA ,siRNA)对肺肿瘤细胞A5 4 9中的GFP基因表达的抑制作用 ,建立以真核表达载体释放生成特异基因siRNA的方法。方法 :构建mU6启动子驱动的含有GFP特异siRNA的真核表达质粒 ,转染A5 4 9肺肿瘤细胞 ,观察共转染时不同剂量siRNA对GFP的抑制效应。结果 :针对GFP核酸序列设计的特异性siRNAGFP siRNA可有效抑制其表达 ,并当比例为 1∶1时效果最佳 ,而空质粒载体及无关RNAi无此效应。结论 :以mU6为启动子的含特异RNAi的质粒可作为抑制特异基因表达的一种新的技术手段 ,并且为研究基因功能的一条有效途径。
- 赵亚力韩为东宋海静李琦马学斌郝好杰
- 关键词：小干扰RNAA549细胞基因表达
- Dowling-Meara型单纯性大疱性表皮松解症一家系角蛋白基因突变研究被引量：2
- 2005年
- 目的:研究一家族性Dowling Meara型单纯性大疱性表皮松解症(EBS)中的遗传基础,分析患者的基 因突变及确定EBS的亚型。方法:应用外周血提取DNA、PCR扩增、基因序列分析的方法检测患病家族者的K5和 K14的所有外显子区。结果:检测K5基因的所有外显子,未发现突变位点;检测了K14基因的所有外显子,在第一 外显子区发现了R125C的突变。两例患者(母亲和女儿)具有相同的突变,而未患病的父亲及正常对照则无此突 变。结论:该EBS DM家系中存在K14基因R125C的突变,角蛋白基因突变的检测是区分EBS DM患者表型和明 确诊断的有效的方法。
- 赵亚力韩为东马学斌李琦郝好杰Dedee Murreu
- 关键词：大疱性表皮松解症家系基因序列分析PCR扩增
- 反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系P53表达的影响
- HTERT及端粒酶活性与肿瘤的密切相关性使得其成为肿瘤治疗中的新的靶点<'[1]>.对hTERT表达调控的研究的进行得如火如茶,但是,hTERT对其他癌基因及抑癌基因得调控作用则研究得很少,尤其hTERT对P53表达的影...
- 马学斌韩为东郝好杰李琦司艺玲赵亚力徐周敏卢学春
- 关键词：反义HTERT人肺巨细胞癌P53表达端粒酶活性
- 文献传递
- 三氧化二砷对Hela细胞hTERTmRNA表达的调节和对端粒酶活性的影响被引量：14
- 2004年
- 目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人宫颈癌细胞 (Hela细胞 )端粒酶活性及端粒酶逆转录酶 (hTERTmR NA)表达的影响。方法 :以 2 μmol/L的As2 O3 作用于人宫颈癌Hela细胞 ,在不同时间点用MTT法检测Hela细胞活力的变化 ,用流式细胞仪检测细胞周期的变化 ,用RT PCR法检测hTERTmRNA表达的变化 ,用TRAP ELISA法检测端粒酶活性的变化。结果 :随着As2 O3 作用时间的延长 ,Hela细胞的活力逐渐降低 ,G0 /G1期细胞所占比例升高 ,S期细胞所占比例减少 ,hTERTmRNA表达水平逐渐降低 ,端粒酶活性逐渐下降。结论 :As2 O3 可引起Hela细胞周期阻滞 ,hTERTmRNA的表达水平下调 ,端粒酶活性降低。
- 马学斌谷志远宋海静韩为东司艺玲郝好杰李琦赵亚力
- 关键词：三氧化二砷HELA细胞端粒酶肿瘤AS2O3
- 肝细胞生长因子及受体传递的调节与内吞作用
- 2007年
- 肝细胞生长因子(HGF)是一种具有多重功能的细胞调控因子。HGF与其受体Met酪氨酸激酶(c-Met)的结合可激发多种生物学反应,从而调节细胞的增殖、分化、形态发生和侵袭运动等。有多种因素参与了HGF/c-Met信号传导的调控,从而防止信号的过度放大,其中Cbl1、Rab、泛素化激酶和HGF/c-Met的内吞等发挥了重要的作用。因此,对HGF/c-Met内吞过程的研究,了解内吞对于HGF/c-Met的信号传导及其调控的影响,探讨HGF/c-Met信号传导通路的调控机理和相互作用模式,可进一步阐明HGF/c-Met信号传导的调控机制,从而验证肝细胞中内吞作用直接调节HGF/c-Met信号通路的作用机制。
- 赵亚力韩为东马学斌
- 关键词：肝细胞生长因子内吞
- 反义hTERT对人肺巨细胞癌细胞系P53表达的影响
- 目的本研究以端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse trascriptase,hTERT）基因的全长序列构建反义hTERT的真核表达载体,以此来转染肿瘤细胞PLA-801D,观察反义hTERT对...
- 马学斌赵亚力郝好杰李琦司艺玲徐周敏卢学春
- 关键词：癌基因基因表达肺肿瘤
- 文献传递
- 尿脱落细胞hTERT mRNA表达在早期膀胱癌无创诊断上的探索被引量：1
- 2008年
- 目的:通过检测尿脱落细胞的hTERT mRNA和端粒酶的活性,探讨建立膀胱癌早期诊断和术后检查的无创方法。方法:利用可提高灵敏度的巢式PCR技术,对尿脱落细胞中hTERT的mRNA进行RT-PCR检测,以TRAP方法加以验证。结果:28例膀胱癌患者尿脱落细胞hTERT的mRNA表达阳性率为93%(26/28)。20例泌尿系良性疾病组患者则为10%(2/20),TRAP方法有很好的一致性。结论:尿脱落细胞hTERT mRNA的检测敏感性高,特异性好,有望应用于膀胱癌的早期诊断和术后复发的无创检查。
- 赵亚力高江平马学斌伍志强司艺玲韩为东
- 关键词：端粒酶膀胱肿瘤细胞
