宋海静
- 作品数：38 被引量：209H指数：10
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人巨细胞病毒感染与先天性畸形关系的探讨被引量：22
- 1998年
- 目的探讨人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）宫内感染与先天性畸形的关系，并确定巨细胞病毒感染的组织细胞类型。方法利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对近８年来我院尸检畸形儿４１例（畸形组）及同期尸检非畸形儿１９例（对照组）进行了主要脏器的ＨＣＭＶ检测，对部分ＰＣＲ阳性的组织标本，用原位杂交技术（ＩＳＨ）确定ＨＣＭＶ易感组织细胞类型。结果畸形组ＨＣＭＶ阳性率为４６．３４％（１９／４１），对照组阳性率为５．２６％（１／１９），两者相比差异有显著性；畸形组中ＨＣＭＶ脏器阳性率为２０．４６％（３５／１７１），而对照组仅有１份肺组织呈ＨＣＭＶ阳性，阳性率为１．２８％（１／７８），两者相比差异有极显著性；ＨＣＭＶ感染在消化系统畸形中更多见，但各系统畸形阳性率差异无显著性；畸形儿脑组织中ＨＣＭＶ阳性率最高（４１．３８％，１２／２９），与其他组织相比，差异有显著性；ＰＣＲ阳性的１７份标本中仅６份ＩＳＨ阳性，位于脑组织的神经元细胞、神经胶质细胞、肾小管上皮细胞及部分间质细胞、肺上皮细胞等。结论ＨＣＭＶ宫内感染与先天性畸形密切相关；脑是ＨＣＭＶ最易侵犯的器官；ＰＣＲ与ＩＳＨ结合用于ＨＣＭＶ的诊断，既敏感。
- 卢彦平翁霞云谷志远宋海静赵海潞刘爽曾木英
- 关键词：巨细胞病毒畸形先天性畸形宫内感染
- 小干扰RNA抑制LRP16基因表达限制了MCF-7乳腺癌细胞增殖被引量：29
- 2005年
- 雌激素雌二醇上调人乳腺癌细胞MCF 7中LRP16基因表达 ,该基因过表达促进MCF 7细胞增殖 .为进一步探讨LRP16基因不同表达水平对MCF 7细胞增殖的影响以及对雌激素的反应性增殖能力 ,采用针对LRP16基因特异的小干扰RNA策略 ,通过逆转录病毒介导及抗性筛选构建了LRP16基因被稳定抑制的 2个MCF 7细胞系 ,针对绿色荧光蛋白的干扰序列作为阴性对照 .Northern印迹实验检测了LRP16基因在各个细胞株中mNRA的水平 ,与对照组细胞比较 ,针对LRP16基因不同位置的 2个小干扰RNA可分别将该基因抑制 90 %和 6 0 % .细胞增殖试验结果显示 ,MCF 7细胞中LRP16基因表达抑制率越高 ,细胞增殖速率减慢越显著 (P <0 0 5 ) ;软琼脂集落形成试验结果显示 ,抑制LRP16基因在MCF 7细胞中表达 ,限制了细胞锚定非依赖性生长 ;细胞周期分析结果表明 ,LRP16基因抑表达使MCF 7细胞G1 S周期转换受抑 ;Western印迹结果表明 ,LRP16基因表达抑制的细胞中细胞周期蛋白E及细胞周期蛋白D1蛋白水平显著下调 ,但未检测到P5 3及Rb蛋白表达水平的影响 .雌二醇刺激的增殖实验结果显示 ,抑制LRP16基因表达没有消除MCF 7细胞的反应性增殖特征 .上述结果表明 ,LRP16基因表达量与MCF 7细胞增殖能力密切相关 ,抑制其表达可有效限制MCF 7细胞的增殖能力 ,提?
- 韩为东李琦赵亚力母义明李雪宋海静陆祖谦
- 关键词：LRP16小干扰RNAMCF-7
- 应用通用引物聚合酶链反应技术检测结肠癌组织中人乳头瘤病毒DNA被引量：6
- 1995年
- 应用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）通用引物介导的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１５例结肠癌石蜡包埋病理组织切片中ＨＰＶＤＮＡ，其中１０例呈阳性扩增（阳性率为６６．７％）。１２例正常结肠组织经上述ＰＣＲ检测均呈阴性反应。阳性扩增产物经核酸斑点杂交进行ＨＰＶ型别分析，ＨＰＶ１６型占４例（４０．０％），１８型１例（１０．０％），１６／１８型５例（５０．０％），未检出其他ＨＰＶ型别。表明ＨＰＶ可能对结肠癌的发生具有病原相关性。
- 宋海静赵海潞谷志远李琦
- 关键词：聚合酶链反应结肠肿瘤DNA乳头状瘤病毒
- A549肿瘤细胞中特异性hTERT-siRNA的干扰作用研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究hTERT特异的siRNA对肿瘤细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用。方法 设计和构建由U6启动子驱动的产生特异hTERT的siRNA表达质粒 ,转染至A5 4 9肺肿瘤细胞 ,以TRAP ELISA方法观察细胞端粒酶活性 ,Westernblot检测端粒酶蛋白的表达 ,MTT法检测对细胞生长的影响。结果 构建的针对hTERT基因 74 5靶位点的U6表达质粒具有明显的干扰效果 ,受到特异hTERT siRNA干扰的A5 4 9肿瘤细胞端粒酶表达下调 ,细胞生长受抑。结论 应用RNA干扰技术可阻止hTERT基因的表达 ,有望成为肿瘤基因治疗新的研究方向。
- 赵亚力韩卫东宋海静李琦马学斌郝好杰
- 关键词：肿瘤细胞端粒酶RNA干扰
- 小干扰RNA特异性抑制肺肿瘤细胞A549中绿色荧光蛋白基因表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨绿色荧光蛋白 (greenfluorescenceprotein ,GFP)特异的小干扰RNA (smallinterferenceRNA ,siRNA)对肺肿瘤细胞A5 4 9中的GFP基因表达的抑制作用 ,建立以真核表达载体释放生成特异基因siRNA的方法。方法 :构建mU6启动子驱动的含有GFP特异siRNA的真核表达质粒 ,转染A5 4 9肺肿瘤细胞 ,观察共转染时不同剂量siRNA对GFP的抑制效应。结果 :针对GFP核酸序列设计的特异性siRNAGFP siRNA可有效抑制其表达 ,并当比例为 1∶1时效果最佳 ,而空质粒载体及无关RNAi无此效应。结论 :以mU6为启动子的含特异RNAi的质粒可作为抑制特异基因表达的一种新的技术手段 ,并且为研究基因功能的一条有效途径。
- 赵亚力韩为东宋海静李琦马学斌郝好杰
- 关键词：小干扰RNAA549细胞基因表达
- 三氧化二砷对人肺巨细胞癌细胞系(PLA-801D株)运动能力、尿激酶和其受体表达的影响
- 近来研究证明,三氧化二砷(AsO)不仅对急性早幼粒细胞白血病(APL)具有显著疗效,而且能抑制多种体外培养的人实体瘤细胞的生长及裸鼠移植瘤成瘤性,提示 AsO是一种新的、作用强的诱导分化剂之一,从而倍受关注。目前,有关 ...
- 宋海静谷志远郝好杰李琦赵亚力谈代明
- 文献传递
- 生殖器尖锐湿疣人乳头瘤病毒抗原检测及意义被引量：1
- 1992年
- 应用PAP免疫酶染色法检测了73例女性生殖器尖锐湿疣活检组织中HPV属共同抗原,阳性率为38%(28/73)。病人年龄为18～52岁,其中25～35岁占66%。本文讨论了HPV抗原检测对生殖器尖锐湿疣实验诊断的意义。认为该法可作为辅助性手段,作为常规实验诊断方法有待探讨。
- 宋海静谷志远朱力李宝珠
- 关键词：尖锐湿疣抗原乳头瘤状病毒
- 逆转录病毒介导的小干扰RNA稳定抑制了LRP16基因表达被引量：8
- 2004年
- RNA干涉是近年被广泛关注的一项技术,通过19～21nt的双链核酸介导使靶基因mRNA特异降解,目前已被广泛应用于细胞水平的基因功能研究。通过沉默LRP16基因表达介绍一项利用逆转录病毒介导发夹环样小干扰RNA的策略。首先选择了LRP16基因mRNA翻译起始位点下游+374nt和+668nt位置分别作为小干扰RNA作用靶位点,通过设计21nt的反义序列,构建了pL374和pL6682个以pLPC为骨架的逆转录病毒载体,针对绿色荧光蛋白序列构建pGFPi载体做阴性对照,茎环样结构小RNA由U6启动子驱动转录生成。3个载体分别与VSVG共转染293GP2细胞,包装假病毒,再分别感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定生成小干扰RNA的细胞。Northernblot实验表明pL374和pL668可分别将LRP16基因抑制90%和60%,为进一步研究LRP16基因功能奠定了基础。另外,首次将mU6启动子序列插入pLPC逆转录病毒载体骨架,将其改造为可介导发夹环样小干扰RNA产生的质粒载体。
- 韩为东李琦赵亚力母义明李雪宋海静郝好杰
- 关键词：逆转录病毒小干扰RNAMCF-7细胞LRP16基因
- 血小板因子4基因转染对肺癌细胞中血管生成因子基因表达的影响被引量：4
- 2001年
- 目的 :进一步探讨人血小板因子 4(hPF4)抑制血管生成的作用机制。方法 :构建含全长hPF4cDNA重组真核表达载体pcDNA3 hPF4,将其转染到人肺巨细胞癌细胞系PLA80 1D细胞内 ,应用RT PCR及免疫组化法观察肿瘤细胞自分泌的血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、白细胞介素 8(IL 8)等的mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 :导入pcDNA3 hPF4,PLA80 1D细胞能稳定表达hPF4mRNA ,其VEGF、bFGF、IL 8的mRNA和蛋白表达水平均明显降低 ,表明hPF4可直接调控VEGF、bFGF、IL 8等基因转录 ,影响其蛋白质生物合成。结论 :提示hPF4可直接下调肿瘤细胞自分泌的VEGF、bFGF及IL 8等血管生成因子基因转录 ,抑制肿瘤细胞释放肿瘤血管生成因子 。
- 郝好杰谷志远刘文英宋海静赵亚力李琦
- 关键词：肺肿瘤血管生成因子基因转染基因表达
- CD44异常表达与结肠直肠癌形成和转移的关系被引量：16
- 1997年
- ＣＤ４４异常表达与结肠直肠癌形成和转移的关系田文张国华谷志远宋海静赵亚力我们应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法，对结、直肠癌组织和癌旁正常粘膜的ＣＤ４４表达进行了观察。一、材料和方法１．２８例结、直肠癌组织和２５例癌旁...
- 田文张国华谷志远宋海静赵亚力
- 关键词：肠肿瘤结肠直肠CD44肿瘤转移
