陈琰
- 作品数：6 被引量：29H指数：4
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义hTR对舌鳞癌细胞系Tca8113作用的初步探讨
- 2002年
- 目的 观察反义hTR对人舌鳞癌细胞系Tca8113的影响及其与细胞周期和凋亡的关系。方法 脂质体介导真核表达载体PBBS2 12 -hTR转染Tca8113细胞系 ,运用流式细胞仪技术观察细胞周期的改变和凋亡 ,并结合免疫组化和原位杂交技术分析转染前后某些基因表达的变化。结果 转染反义hTR的Tca8113细胞克隆生长减缓 ,群体倍增时间较未转染组和转染空质粒组明显延长 ,流式细胞仪显示转染细胞PI指数下降 ,有亚二倍体凋亡峰出现 ,转染后细胞 p2 1基因表达水平显著增高 ,裸鼠移植瘤实验显示转染后的Tca8113致瘤性减弱。 结论 反义hTR可引起细胞通过细胞周期关卡受阻而显著抑制Tca8113细胞的生长 ,同时激活了某些凋亡程序而导致细胞凋亡 。
- 陈琰董绍忠杨连甲刘晓亮李伟丽
- 关键词：反义HTR舌鳞癌端粒酶原位杂交
- 脂质体介导反义hTR基因转染对腺样囊性癌细胞系SAcc83的影响
- 2002年
- 目的 检测SAcc83细胞系端粒酶活性并观察人端粒酶模板hTR封闭后细胞生长行为的改变及与凋亡的关系。方法TRAP-PCR-ELISA法检测SAcc83细胞系端粒酶活性,脂质体介导真核表达载体PBBS212-ahTR转染SAcc83,PCNA免疫组化染色以证实其增殖活性改变,TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果转染反义hTR后SAcc83细胞增殖能力明显下降,群体倍增时间延长,转染细胞约30天后死亡。各项凋亡检测均证明细胞凋亡的存在。结论hTR反义基因通过封闭端粒酶模板RNA抑制了端粒酶活性,并可能通过某种途径激活细胞的凋亡程序,这为以端粒酶为靶子治疗恶性肿瘤提供了方向。
- 陈琰董绍忠王秋枫张庆诗杨连甲
- 关键词：反义HTR腺样囊性癌端粒酶基因转染
- 强力霉素对腺样囊性癌细胞系SAcc83增殖及侵袭行为的影响被引量：5
- 2001年
- 目的 :研究强力霉素对腺样囊性癌细胞增殖、 型胶原酶活性及侵袭行为的影响。方法 :采用 MTT法研究不同浓度的强力霉素对 SAcc83细胞增殖的影响 ,明胶底物 SDS- PAGE凝胶电泳检查 型胶原酶活性 ,单层细胞器官培养进行细胞侵袭研究。结果 :不同浓度的强力霉素抑制了 SAcc83细胞的增殖 ,同时它也抑制了 型胶原酶 (MMP- 2 )活性和肿瘤细胞的侵袭。结论 :强力霉素对 SAcc83细胞的增殖具有抑制作用 ,同时也可抑制肿瘤细胞的侵袭 。
- 张庆诗刘斌杨连甲陈希哲陈琰
- 关键词：腺样囊性癌胶原蛋白酶肿瘤侵犯
- 人血管内皮生长因子165基因真核表达载体的构建及表达被引量：6
- 2003年
- 目的:构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达载体,并在大鼠骨髓基质细胞中进行表达。方法:利用基因克隆技术,将原核克隆载体pSP73中的目的基因VEGF165用 BamH I和Xho I双酶切后,再克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pcDNA3.1-VEGF165。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定。通过脂质体介导,用重组质粒转染SD大鼠骨髓基质细胞,然后以G418筛选阳性克隆,用免疫细胞化学鉴定。结果:经酶切鉴定及基因测序证实,重组体中已插入目的基因片段VEGF165。免疫细胞化学证实,重组质粒转染的骨髓基质细胞中有VEGF165基因的表达。结论:成功地构建真核表达载体pcDNA3.1-VEGF165,并在骨髓基质细胞中得到表达,为将表达VEGF基因的骨髓基质细胞作为骨组织工程的种子细胞的可能性提供了实验依据。
- 高全文董绍忠陈希哲陈琰杨连甲
- 关键词：基因表达人血管内皮生长因子165基因真核表达载体
- 自体成骨细胞-含孔磷酸钙陶瓷复合体修复颅骨极量缺损的实验研究被引量：12
- 2002年
- 目的 利用组织工程技术构建自体成骨细胞 -生物陶瓷复合体并应用于大鼠颅骨极量骨缺损模型的修复。 方法 30 0～ 35 0g雄性SD大鼠 2 0只随机分为细胞 -陶瓷复合体组和单纯生物陶瓷对照组。所有大鼠均在全麻及无菌条件下取其左侧股骨及胫骨 ,将骨髓冲入 75cm2培养瓶中 ,在诱导培养条件下进行体外扩增分化 ,其中实验组细胞在培养 14d后消化接种于经纤维连接蛋白表面修饰的含孔磷酸钙陶瓷上继续培养 15d ,再将细胞 -陶瓷复合体用于与细胞来源对应的大鼠颅骨极量缺损 (直径 8mm)的修复 ;而对照组仅植入经表面修饰的无细胞陶瓷。每隔 4周为 1个时相点分别处死每组 2只大鼠直至 2 0周 ,从形态学及组织学角度观察比较颅骨缺损修复愈合情况。 结果 无论X线摄片及组织切片均表明 ,实验组颅骨极量缺损修复优于同期对照组。 结论 以含孔磷酸钙陶瓷作为支架的自体成骨细胞移植具有明显的骨缺损修复能力。
- 陈希哲杨连甲陈琰张庆诗付崇建
- 关键词：颅骨缺损
- 口腔鳞癌中hTRT mRNA的表达及其与PCNA关系的探讨被引量：6
- 2002年
- 目的 :探讨端粒酶逆转录酶 (hTRT)在口腔鳞癌、癌旁组织的表达及其与增殖细胞核抗原 (PCNA)之间的关系。方法 :用原位杂交技术及免疫组化方法检测 5 2例口腔鳞癌标本。结果 :正常癌旁上皮、上皮异常增生组织及鳞癌hTRTmRNA阳性率分别为 2 0 %、41.7%、82 .7%。PCNA阳性组与阴性组间hTRT表达水平有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :hTRT在口腔鳞癌发生、发展中起重要作用 ,hTRT与PCNA阳性表达呈正相关 ,表明hTRT激活细胞多处于高增殖状态。
- 陈琰董绍忠杨连甲
- 关键词：人端粒酶逆转录酶增殖细胞核抗原口腔鳞状细胞癌端粒酶口腔鳞癌
