- 海南2株大肠埃希菌中发现新德里金属β-内酰胺酶1被引量：3
- 2013年
- 目的分离和确认2株耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌(E.coli)携带新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因。方法用法国生物梅里埃公司API20E生化鉴定条和Vitek 2全自动细菌鉴定仪和配套GNS卡鉴定出2株耐亚胺培南和美罗培南的E.coli;并对其进行亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验、IP/IPI E-test试条法协同试验检测金属β-内酰胺酶,对目的菌株进行NDM-1基因PCR特异性扩增,扩增产物测序鉴定;对目的菌株进行质粒接合转移试验分析其耐药机制。结果 2株测试菌亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验、IP/IPI E-test试纸条法协同试验均为阳性,PCR扩增及测序证实为携带NDM-1耐药基因;体外药敏试验除对多黏菌素B和替加环素敏感外,其他广谱抗菌药物包括头孢菌素类、β-内酰胺类加酶抑制剂类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和喹诺酮类均呈现高水平耐药,2株接合子E.coli对所有β-内酰胺类药物的MIC值高于受体菌E.coli J53,其中对美罗培南和亚胺培南MIC均提高了8倍以上,头孢他啶及头孢曲松则提高了64倍以上。结论海南地区出现携带NDM-1基因的E.coli,该基因可在不同菌株之间传递。
- 李天娇王旭明符生苗李成学陈淑萍蔡俊宏黄涛符惠群
- 关键词：大肠埃希菌
- 海南9株携带blaNDM-1基因肠杆菌科细菌的分离和确认被引量：6
- 2014年
- 目的分离和研究海南地区发现的携带blaNDM-1基因肠杆菌科细菌。方法回顾性研究。收集2012年海南省临床上对亚胺培南或美罗培南耐药或中介的肠杆菌科细菌30株；用法国生物梅里埃公司AP120E进行菌种鉴定和V1TEK2全自动细菌鉴定仪进行药敏试验；亚胺培南／亚胺培南和抑制剂复合物（IP／IPI）E—test试纸条法协同试验检测产金属B内酰胺酶的菌株，试验菌株进行NDM-1耐药基因PCR特异性扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析；将阳性菌株进行质粒接合试验，并对接合前后的药敏结果进行比较。结果30株目标细菌经IP／IPIE—test试纸条法协同试验检出阳性菌株21株，再经PCR扩增和测序获得9株携带blaNDM—1基因的耐药菌株，其中4株为肺炎克雷伯菌，2株为大肠埃希菌，2株为阴沟肠杆菌，1株为产气肠杆菌。这些携带blaNDM-1基因菌株对广谱抗生素B内酰胺酶抑制剂、头孢类、碳青霉烯类抗生素耐药；经质粒接合转移试验后，9株试验菌全部接合成功，这9株细菌的接合子药敏试验结果表示其对亚胺培南和美罗培南的药物敏感性有较大差异，对氨曲南、头孢吡肟和头孢替坦的药物敏感性有轻度差异，其他药物的敏感性无明显差异。结论海南发现的耐碳青霉烯酶类肠杆菌科细菌主要携带blaNDM-1基因，产碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一，且其NDM-1可通过质粒在不同菌株之间传递。
- 李天娇李成学陈淑萍王旭明符生苗李晓娟黄涛符惠群林翀吕叶
- 关键词：肠杆菌科Β内酰胺酶类
- 联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增值的影响被引量：11
- 2014年
- 为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA-CDK1shRNA重组载体,用脂质体Lipofectamine 2000法将其转染入CNE-2细胞株中,应用RT-PCR方法初步筛选具有干扰效应的重组载体,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平,Western blot检测Survivin和CDK1蛋白表达以及噻唑蓝溴化四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测癌细胞增殖活性的变化。结果表明:成功构建具有干扰效应的shRNAs表达载体;联合或单基因Survivin、CDK1的shRNAs表达载体干扰CNE-2细胞后,其对应的mRNA和目的蛋白表达均降低,CNE-2癌细胞增殖活性降低,联合基因shRNAs表达载体具有一定程度的干扰增强作用。
- 陈淑萍周红桃蔡俊宏王福利许茂轩符生苗
- 关键词：鼻咽癌CNE-2
- 联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响
- 目的：构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA, shRNA)表达载体,并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2干扰后,癌细胞的生物学行为(增殖、凋亡)的改...
- 陈淑萍
- 关键词：SURVIVIN基因鼻咽癌CNE-2
- 文献传递
- 靶向Survivin及CDK1的shRNAs载体对鼻咽癌细胞的干扰效应
- 目的构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应。方法根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1...
- 陈淑萍周红桃蔡俊宏李成学王福利许茂轩符生苗
- 关键词：SURVIVIN基因鼻咽癌CNE-2
- 文献传递
- 海南发现4株产NDM-1多重耐药的肺炎克雷伯菌
- 目的分离扣鉴定海南地区临床上发现的耐碳青酶烯类药物的肺炎克雷伯菌携带新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)基因的细菌。方法使用法国梅里埃API20E生化鉴定条和VITEK2全自动细菌鉴定仪及其配套的CNS试剂,鉴定出临...
- 李天娇王旭明符生苗李成学陈淑萍蔡俊宏黄涛符惠群
- 关键词：肺炎克雷伯菌
- 文献传递
- 海南发现两株新德里金属β-内酰胺酶-1阳性的阴沟肠杆菌
- 目的:了解临床分离的携带新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)基因的阴沟肠杆菌耐药性及NDM-1的鉴定.方法: 临床分离的2株阴沟肠杆菌用法国生物梅里埃公司的VITEK-2全自动细菌分析系统进行鉴定,用IP/IPI E...
- 符生苗李天娇陈淑萍李成学蔡俊宏王旭明黄涛符惠群
- 联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增值的影响
- 目的 构建具有干扰效应的靶向Survivin 和CDK1 基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,研究其靶向干扰后鼻咽癌细胞CNE-2 生物学行为的改变.方法 根据Gen...
- 陈淑萍符生苗
- Survivin基因及CDK1基因联合靶向shRNA真核表达载体的构建
- 目的 shRNA干扰技术可以使细胞出现靶基因沉默,具有高特异性、高效性、低毒性等特点现已广泛应用于生物医学研究的各个领域,为快速下调靶基因表达的有效手段之一.shRNA干扰技术有望成为治疗肿瘤治疗的新手段,但仍需解决诸多...
- 陈淑萍符生苗蔡俊宏李成学周红桃王福利许茂轩
- 关键词：SURVIVIN基因
- Constructing recombinant survivin and CDK1 tandem shRNAs pU6-M4 plasmid
- Objective:To construct recombinant survivin and CDK1 tandem shRNAs pU6-M4 plasmids.Methods:sequences carrying ...
- 陈淑萍周红桃蔡俊宏李成学王福利许茂轩符生苗
- 关键词：SURVIVIN
- 文献传递
