陈建晖
- 作品数:6 被引量:79H指数:4
- 供职机构:东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 胰岛素、催乳素和孕酮对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响被引量:25
- 2008年
- 具有泌乳功能的乳腺上皮细胞系可作为乳腺发育学、乳腺病理学、泌乳生物工程学研究的细胞模型,本研究测定了激素对奶牛乳腺上皮细胞系泌乳功能的影响,为阐述泌乳机制提供工作基础。应用HPLC方法对体外培养奶牛乳腺上皮细胞的酪蛋白和乳糖的分泌情况和细胞培养液中的酪蛋白、乳糖含量进行测定,以确定胰岛素、催乳素和孕酮处理后的奶牛乳腺上皮细胞的泌乳功能。试验结果表明:奶牛乳腺上皮细胞具有酪蛋白和乳糖的分泌能力,在72h内,随着细胞培养时间延长,胰岛素处理组细胞中的酪蛋白和乳糖的升高趋势不明显,孕酮处理组升高趋势较明显,催乳素处理组升高趋势很明显;胰岛素处理组、催乳素处理组和孕酮处理组细胞培养液中酪蛋白升高趋势均很明显,乳糖含量均很高,三组激素比较而言,胰岛素处理组乳糖含量最高。此外,三组激素对乳腺上皮细胞活力影响均很大,在72h之内,总体变化为:催乳素处理组和孕酮处理组细胞活力均升高,胰岛素处理组细胞活力下降。
- 陈建晖佟慧丽李庆章高学军
- 关键词:胰岛素催乳素孕酮奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能
- 奶山羊、奶牛乳腺上皮细胞系的建立
- 应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白是生物高新技术研究领域的热点。以牛羊等反刍动物制备乳腺生物反应器的前景十分诱人。目前建立的一些奶山羊、奶牛乳腺上皮细胞系往往丧失了泌乳功能,不适合作为研究泌乳机制及检测乳腺表达载体的细胞...
- 佟慧丽陈建晖高学军尹德云
- 文献传递
- 牛αS1-酪蛋白5′调控序列驱动人α-LA基因与LacZ基因在牛乳腺上皮细胞中的表达被引量:6
- 2008年
- 将牛αS1-酪蛋白5′调控序列约1.2kb的片段,连接到含SV40启动子调控下β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的PSV载体上,做为启动子,在其后连接0.76kb的人α-乳白蛋白基因(α-LA),构建真核表达载体αS1-LA-psv.采用组织块接种法,培养奶牛乳腺上皮细胞,经传代纯化后,对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状进行检测,用免疫荧光细胞染色法对培养的奶牛乳腺上皮细胞进行角蛋白18鉴定,结果表明,成功建立奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力.将构建的真核表达载体αS1-LA-psv转染奶牛乳腺上皮细胞,培养24~120h均检测到了β-半乳糖苷酶的表达;培养72h检测到细胞中人α-乳白蛋白的表达,表达量约为0.64g/L.实验结果表明,建立的奶牛乳腺上皮细胞系具有外源基因表达活性,得到的牛αS1-酪蛋白5′调控序列能作为启动子指导外源基因的表达,构建的真核表达载体能在体外培养的牛乳腺上皮细胞中同时表达人α-乳白蛋白和β-半乳糖苷酶.
- 张莉李庆章陈建晖高学军田雷
- 关键词:Β-半乳糖苷酶基因奶牛乳腺上皮细胞基因表达
- 奶牛乳腺上皮细胞系的建立
- 乳腺上皮细胞是特化的具有分泌性的功能细胞,是乳腺行使泌乳功能的细胞基础,亦是研究泌乳启动、功能维持、退化等生理过程中内外细胞因子调节、信号传导、功能基因的表达以及乳腺肿瘤的形成、癌变必不可缺少的实验材料。现有的研究显示反...
- 陈建晖
- 关键词:乳腺上皮细胞泌乳功能奶牛催乳素孕酮
- 文献传递
- 奶牛乳腺上皮细胞体外培养技术研究进展被引量:10
- 2009年
- 奶牛乳腺上皮细胞具有合成和分泌乳汁的特殊功能,是制作乳腺生物反应器的靶细胞。以奶牛乳腺上皮细胞为试验模型,能够真实反应乳腺生长、发育及泌乳的细胞或分子生物学机制,验证乳腺组织特异性表达载体构建的合理性和有效性,对研究奶牛乳腺生物反应器、乳蛋白基因表达具有重要的意义。文章主要从培养方法、培养体系的建立、形态结构与细胞增殖分化方面阐述乳腺上皮细胞体外培养技术研究进展。
- 陈建晖高学军李庆章
- 关键词:奶牛乳腺上皮细胞细胞培养
- 奶牛乳腺上皮细胞系的建立被引量:41
- 2009年
- 采用组织块种植法,成功地培养了奶牛乳腺上皮细胞,并利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状的检测,建立并鉴定了正常培养的奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力。通过对细胞传代及反复冻存,建立了奶牛乳腺上皮细胞系,获得了大量的乳腺上皮细胞。
- 陈建晖佟慧丽李庆章高学军
- 关键词:奶牛乳腺上皮细胞细胞系