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陆航
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1
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供职机构:
辽宁医学院附属第一医院
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相关领域:
生物学
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合作作者
李华
辽宁医学院附属第一医院
吴学敏
辽宁医学院
单颖
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作者
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陆航
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单颖
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李华
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解剖科学进展
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2010
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人防御素-5基因的克隆和真核表达载体的构建
2010年
目的对人防御素5(HD-5)基因进行克隆,构建真核表达载体HD5-pPICZαA。方法从人cDNA文库中PCR扩增HD-5基因片段,用EcoRⅠ和XbaⅠ分别双酶切HD-5基因扩增产物和毕赤酵母表达载体pPICZαA,用T4DNA连接酶连接目的基因片段和pPICZαA,然后转化到E.coli Top10中,Zeocin筛选转化子并进行PCR、酶切和序列鉴定。结果提取阳性克隆的重组质粒,EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后跑电泳获得预期条带;同时重组质粒经序列测定,证实HD-5基因正确插入pPICZαA中,插入位置、方向均正确。结论成功构建人防御素5基因的真核表达载体HD5-pPICZαA,为HD-5蛋白的真核真核表达奠定基础。
陆航
李华
吴学敏
单颖
关键词:
克隆
毕赤酵母
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