阚式绂 作品数:22 被引量:16 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院军事兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 吉林省重大科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体 研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP,构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK,利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP,与TTVV共转(感)染BHK细胞,通过同源... 阚式绂 金宁一 李霄 王宇航 刘立明 王卓越 齐延新 王金辉 刘广臣关键词:基因缺失 病毒载体 缺失E3L基因减毒天坛株痘苗病毒的构建及筛选 被引量:4 2011年 通过在E3L同源重组臂中插入含有增强型痘苗病毒早晚期启动子(pE/L)、增强型绿色荧光蛋白基因和同向Loxp(Locus of X-over P1)序列的表达盒构建穿梭质粒pTE-EGFP。利用pTE-EGFP和野生型天坛株痘苗病毒共转染仓鼠肾细胞(BHK-21),通过对绿色荧光蚀斑的10次筛选,构建缺失E3L基因并含有EGFP基因的重组痘苗病毒rTTVV-TE--EGFP+。利用rTTVV-TE--EGFP+和含有Cre(Cyclization recombination)重组酶基因的重组质粒pVAX1-Cre共转染BHK-21细胞,通过对无荧光蚀斑的10次筛选,构建无筛选标记的天坛株痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--,并利用聚合酶链式反应(PCR)对其进行鉴定。鉴定结果显示,rTTVV-TE--中无E3L基因转录和EGFP基因表达。以上结果说明,所构建的痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--完全缺失了E3L基因和外源筛选标记EGFP基因,且具有良好的遗传稳定性。 王宇航 李霄 王浩然 阚式绂 王卓越 齐延新 吴娜 杜寿文 金宁一关键词:病毒载体 表达Apoptin基因抗肿瘤双特异性重组腺病毒的构建及鉴定 为了开展靶向性重组腺病毒进行基因治疗的研究,构建了三种穿梭质粒pAd-VP3,pAd–VT和pAd-VP,每种载体均含有Apoptin基因,其中pAd–VT和pAd–VP为双特异性抗肿瘤重组腺病毒,他们分别含有hTERT... 王卓越 李霄 阚式绂 王宇航 齐延新 金宁一关键词:腺病毒载体 HTERT启动子 基因治疗 文献传递 天坛株痘苗病毒基因缺失弱毒株的构建及免疫原性研究 :近年来,痘苗病毒天坛株作为抵抗感染性疾病(如人免疫缺陷病毒)疫苗的载体方面得到极为广泛的应用.然而,因免疫痘苗病毒后产生的种痘后副作用较大,有少部分群体种痘后会并发脑炎等严重症状.因此,通过基因工程方法,获得更加安全有... 阚式绂 李霄 金宁一关键词:痘苗病毒天坛株 基因缺失 弱毒株 免疫原性 利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体 目的研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP,构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK,利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP,与TTVV共转(感)染BHK细胞,通过... 阚式绂 金宁一 李霄 王宇航 刘立明 王卓越 齐延新 王金辉 刘广臣痘苗病毒减毒载体的生物学特性及安全性试验研究 检测天坛株痘苗病毒缺失E3L基因减毒载体(E3L-ttVV)在体外以及体内毒力,及其作为病毒载体的安全性,为表达外源抗原的重组痘苗病毒载体更深入的研究奠定基础。同时指明痘苗病毒因本身具备稳定性好、基因组含大量非必需基因、... 王宇航 阚式绂 杜寿文 齐延新 李霄 金宁一关键词:痘苗病毒 生物学特性 动物免疫 痘苗病毒减毒载体的生物学特性及安全性试验研究 引言/目的痘苗病毒(Vaccina Virus,VACV)可作为载体广泛应用于多种疾病的防治,但其产生的副作用很可能在未来疫苗研究中复合出现,所以构建一种安全的、新型的载体是十分必要的。检测天坛株痘苗病毒缺失E3L基因减... 王宇航 阚式绂 杜寿文 齐延新 李霄 金宁一E3L缺失型天坛株痘苗病毒减毒载体的构建及筛选 利用PCR技术、DNA克隆技术构建携带有痘病毒早晚期强力复合启动子(PE/L)、天坛株痘苗病毒E3L基因外两侧同源重组臂、绿色荧光蛋白(EGFP)、loxp序列的穿梭质粒pSK-PTE-EGFP及用于敲除EGFP基因的质... 王宇航 李霄 阚式绂 王卓越 齐延新 杜寿文 金宁一关键词:重组痘苗病毒 减毒 文献传递 利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建基因缺失天坛株痘苗病毒载体 研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP,构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK,利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP,与TTVV共转(感)染BHK细胞,通过同源... 阚式绂 李霄 王宇航 王卓越 齐延新 贾鹏 杜寿文 金宁一关键词:TK基因 文献传递 利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建基因缺失天坛株痘苗病毒载体 研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP,构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK,利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP,与TTVV共转(感)染BHK细胞,通过同源... 阚式绂 李霄 王宇航 王卓越 齐延新 贾鹏 杜寿文 金宁一关键词:TK基因 文献传递