赵金梅
- 作品数:8 被引量:14H指数:3
- 供职机构:西华大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 层理鞭枝藻藻蓝蛋白β亚基的体内重组被引量:2
- 2006年
- 为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDu-et-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻蓝蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB(C155I)共同转入大肠杆菌.通过色素蛋白锌电泳和光谱检测,结果表明产生了有生物活性的CpcB(C155I)-PCB.而在裂合酶基因cpeS不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有7.6%的CpcB(C155I)-PCB产生.实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接,为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础.
- 赵金梅朱菁萍王锋周明赵开弘
- 关键词:C-藻蓝蛋白
- (R)-2-羟基-4-苯基丁酸及其乙酯的生物催化研究进展被引量:3
- 2008年
- (R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯是合成血管紧张肽转化酶抑制剂普利类系列(ACEI)的关键手性中间体。综述了(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的各种合成路线及国内外利用生物催化进行转化的研究进展。
- 赵金梅
- 关键词:手性中间体生物催化
- 别藻蓝蛋白的聚集态研究
- 2008年
- 为了研究鱼腥藻PCC7120(Anabaenasp.PCC7120)中别藻蓝蛋白(APC)α和β亚基(α-APC和β-APC)中藻蓝胆素(PCB)与脱辅基蛋白的生物合成,并在蓝藻体外对这两种色素蛋白PCB-ApcA和PCB-ApcB合成时聚集过程进行分析,通过多种组合的质粒在大肠杆菌体内共同表达进行重组。色素蛋白的吸收和荧光光谱以及Zn电泳表明,在大肠杆菌体内同时得到色素蛋白PCB-ApcA和PCB-ApcB,并且体内重组色素蛋白的细胞荧光光谱显示,色素蛋白以三聚体的形式存在,而破碎细胞后所得上清液所显示的光谱特征为单聚体的特征。
- 苏平赵金梅赵开弘周明
- 聚乙二醇沉淀猪胰蛋白酶的研究被引量:6
- 2011年
- 研究了从猪胰脏中用聚乙二醇(PEG)分离提取胰蛋白酶的条件。采用单因素实验考查了聚乙二醇分子量、聚乙二醇浓度、pH值和提取时间对胰蛋白酶活力的影响,并通过正交实验对提取工艺条件进行优化,在0.25g/mL聚乙二醇6000,pH7.5,4℃提取3 h条件下,胰蛋白酶酶活力达到1600 U/mL以上,比传统的盐析法提取率高,并且操作简单,是一种比较有效的分离猪胰蛋白酶的方法。
- 余武英赵金梅肖青虎王维香
- 海藻酸钠固定化胰蛋白酶的研究被引量:3
- 2011年
- 研究了以海藻酸钠为载体固定化胰蛋白酶的条件,并考察了固定化酶的最适pH、最适温度、储存时间及反复利用稳定性。结果表明:最适固定化条件为CaC12质量分数为3.0%,海藻酸钠质量分数为3.0%,酶液量与海藻酸钠体积比为1∶2,固定化时间为3.0 h;固定化胰蛋白酶最适pH为9.0,最适温度为60℃,较游离酶分别提高1.0和10℃;4℃下保存30 d,活性保留96%以上;连续反应6次,活性保留52%。
- 王刚强王维香赵金梅
- 关键词:固定化胰蛋白酶海藻酸钠
- 蓝藻细菌光敏色素AphA(26-320)的体内重组与摇瓶发酵优化
- 2008年
- 将蓝藻PCC7120细菌光敏色素缺失突变体AphA(26-320)基因和血红素氧化酶(ho1)及胆绿素还原酶(PcyA)的基因共同转化E.Coli BL21(DE3),在IPTG的诱导下实现体内共同表达,进行体内重组,生成了具有可逆光致变色活性的AphA(26-320)-PCB.对重组菌的培养条件,诱导条件进行优化,确定适合合成AphA(26-320)-PCB的培养时间,诱导温度,摇床振荡速度等.
- 赵金梅胡勋赵开弘
- 关键词:细菌光敏色素
- 藻红蓝蛋白β亚基体内重组及其色谱分析
- 2008年
- 藻胆蛋白是蓝藻中的捕光蛋白,其生物合成的重要一步是藻胆色素与脱辅基蛋白的连接。大多数藻胆色素的正确连接都需要结合位点专一和对色素的构象有选择性的裂合酶来催化完成,但是这方面的报道不是很多。藻红蓝蛋白由两个亚基组成,β亚基(简称β-PEC)含171个氨基酸残基及两个辅基色素藻蓝胆素(简称PCB),分别在Cys-84和Cys-155位以硫醚键共价相连。通过同源性分析获得的由编号为alr0617基因编码的蛋白为藻红蓝蛋白β亚基(β-PEC)中的Cys-84与PCB的连接的催化酶。为了研究层理鞭枝藻藻红蓝蛋白(PEC)β亚基(β-PEC)中藻蓝胆素(PCB)与脱辅基蛋白的连接机制,通过体内重组方式得到色素蛋白PCB-PecB(C155I),分析表明该色素蛋白与β-PEC的吸收光谱和荧光光谱一致。酸性尿素变性实验证明得到的色素蛋白中的藻蓝胆素PCB没有被破坏。使用胃蛋白酶对天然藻红蓝色素蛋白和重组藻红蓝色素蛋白进行相同条件的水解并得到各自的色素肽,高效液相色谱分析表明这两种色素肽相同,由此证明了编号为alr0617基因编码的蛋白质能催化PCB与PecB(C155I)正确共价偶联。
- 王锋周明赵金梅赵开弘
- 关键词:水解色谱分析
- 别藻蓝蛋白的细胞工程体内重组
- 藻胆体(phycobilisome)是存在于蓝藻和红藻中的一类捕光蛋白复合物,它由藻胆蛋白(phycobiliprotein)和连接蛋白组成。藻胆蛋白由藻胆色素(phycobilin)与相应的脱辅基蛋白中保守性半胱氨酸的...
- 赵金梅
- 关键词:别藻蓝蛋白细胞工程生物合成
- 文献传递