赵舟宙
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种ZNF268基因剪接异构体在抗白血病中的应用
- 本发明公开了一种ZNF268基因剪接异构体在抗白血病中的应用。其目的是提供人锌指蛋白ZNF268基因的一种剪接异构体在制备治疗或预防白血病的药物中的应用。该人ZNF268基因的剪接异构体，命名为ZNF268a，是ZNF2...
- 李文鑫郭明雄赵舟宙邵焕杰孙翀
- 文献传递
- 人补体调节蛋白DAF、MCP在哺乳动物细胞中的共表达及协同作用研究被引量：3
- 2008年
- 利用双启动子构建含人补体调节蛋白DAF和MCP cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-DAFMCP-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3 pcDNA3-DAFMCP-DP转化细胞。PCR实验结果显示人补体调节蛋白基因DAF和MCP整合在转化的异源细胞的染色体上。RT-PCR和Western blot印迹实验分别从RNA水平和蛋白质水平证实了人补体调节蛋白分子DAF和MCP在细胞系中皆获得同步表达。检测连续传代30次的NIH3T3 pcDNA3-DAFMCP-DP结果表明人DAF和MCP基因仍稳定整合在细胞基因组中,并未随着传代而丢失,为稳定的转双基因细胞系。补体依赖的细胞毒反应表明,pcDNA3-DAFMCP-DP转染细胞系由于DAF和MCP的共表达获得较DAF或MCP单一表达时更强的保护能力,能更好地抑制人补体依赖的细胞毒作用的发生,保护宿主细胞免受人补体的攻击。以上结果表明,DAF和MCP双基因重组表达载体实现了人补体调节蛋白基因高效转移和高水平共表达,为获得表达多种人补体调节蛋白的理想供体提供了有效策略。而且共表达的DAF和MCP具有协同效应,能更有效地阻止补体激活造成的细胞损伤,在克服超急性排斥反应的基因治疗中具有潜在的临床应用价值。
- 徐莉赵舟宙刘辉蒋达和李文鑫
- 关键词：共表达超急性排斥反应
- 人补体调节蛋白MCP、CD59共表达体系的构建及其功能研究被引量：1
- 2007年
- 利用双启动子构建含人补体调节蛋白MCP和CD59 cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-MCPCD59-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP转化细胞。PCR实验结果显示人MCP和CD59整合在转化的NIH3T3细胞的染色体上,RT-PCR和Western blot实验分别从RNA水平和蛋白质水平证实了人MCP和CD59在转化细胞中的共表达。检测连续传代30次的NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP结果表明人MCP和CD59基因仍稳定整合在细胞基因组中,并未随着传代而丢失,为稳定的转双基因细胞系。补体溶破实验表明,pcDNA3-MCPCD59-DP转染细胞由于人MCP和CD59的共表达获得了较MCP或CD59单一表达时更好的保护功效,能有效地保护NIH3T3细胞免受人补体的攻击,从而抑制补体依赖的细胞毒反应的发生。以上结果表明所构建的双基因重组表达载体实现了人补体调节蛋白基因高效转移和高水平共表达,在克服超急性排斥反应的基因治疗中有潜在的应用价值。
- 徐莉赵舟宙刘辉李文鑫
- 关键词：共表达超急性排斥反应
- 人衰变加速因子DAF基因真核表达系统的构建
- 2008年
- 目的:构建含人补体调节蛋白衰变加速因子DAF分子的cDNA编码区的真核重组表达载体pcDNA3-DAF,转染NIH3T3细胞,建立稳定表达人DAF的NIH3T3细胞模型。方法:将人DAF分子的cDNA编码区克隆到真核表达载体pcDNA3,经酶切和测序鉴定后用磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的NIH3T3细胞株。用PCR检测人DAF基因在NIH3T3细胞基因组中的整合;用RT-PCR、Westernblot实验和间接免疫荧光技术分别从RNA水平和蛋白质水平检测人补体调节蛋白分子DAF在细胞株中的表达。结果:成功构建了pcDNA3-DAF重组真核表达载体,并建立了稳定转染的NIH3T3细胞株,成功地表达了目的基因。PCR检测连续传代30次的NIH3T3pcDNA3-DAF细胞,结果显示人DAF基因仍稳定整合在异源细胞的染色体上,并未随着传代而丢失,为稳定的转染细胞株。结论:真核表达载体构建和稳定转染NIH3T3细胞株的建立为进一步研究人DAF功能和多种补体调节蛋白的协同作用奠定基础。
- 徐莉赵舟宙刘辉李文鑫
- 关键词：衰变加速因子NIH3T3细胞稳定转染真核表达
- 人早胚发育相关蛋白ZNF268的抗体制备
- 2007年
- 目的:获得纯化抗原用于制备ZNF268的多克隆抗体。方法:PCR扩增目的基因片Spacer区序列,亚克隆入融合蛋白表达载体pET28a+,构建了重组质粒pET28a+/SPA。然后将该重组质粒转化E.coliDE3(Rosseta),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分离,获纯化融合蛋白6His-SPA。用6His-SPA免疫家兔,颈动脉取血,分离血清,从血清中获得ZNF268特异的多克隆抗体。结论:通过构建融合蛋白重组表达质粒pET28a+/SPA,用获得的初步纯化融合蛋白6His-SPA,制备了特异的ZNF268的多克隆抗体6His-SPA Ab。
- 郭玉静许均华赵舟宙朱晨刚
- 关键词：锌指蛋白多克隆抗体抗体制备
- 靶向ZNF268基因的RNA干扰表达载体构建及应用
- 本发明属于分子生物学领域，公开了靶向ZNF268基因的RNA干扰表达载体构建方法及其应用，本发明方法是将筛选得到的靶向ZNF268基因的siRNA寡核苷酸片段插入到载体系统中，构建成靶向ZNF268基因的RNA干扰质粒载...
- 李文鑫郭明雄汪维赵舟宙曾艳
- ZNF268基因与恶性血液病/血细胞分化的相关性探讨
- 赵舟宙
- 关键词：C2H2型锌指蛋白可变剪接恶性血液病分化
- 锌指基因ZNF268两个新的差异剪接本克隆及鉴定
- 2006年
- ZNF268是一个典型的KRAB类锌指基因，含有24个C2H2型锌指基序和一个KRAB功能域，它在人胚胎发育早期表达，并与胚胎肝脏的发育相关。通过免疫组化的方法，发现ZNF268在3—5周龄人胚的造血干细胞中有表达；进一步通过RT—PCR的方法检测发现ZNF268在健康成人全血细胞中也有表达，并且表达有4个差异剪接本，从中克隆得到两个新的ZNF268差异剪接本ZNF268c和ZNF268d。推测ZNF268和血细胞生长发育相关。
- 孙翀赵舟宙高立孙燕邵焕杰李文鑫
- 关键词：锌指基因血细胞
- 一种ZNF268基因剪接异构体在抗白血病中的应用
- 本发明公开了一种ZNF268基因剪接异构体在抗白血病中的应用。其目的是提供人锌指蛋白ZNF268基因的一种剪接异构体在制备治疗或预防白血病的药物中的应用。该人ZNF268基因的剪接异构体，命名为ZNF268a，是ZNF2...
- 李文鑫郭明雄赵舟宙邵焕杰孙翀
- 文献传递
- 靶向ZNF268基因的RNA干扰表达载体构建及应用
- 本发明属于分子生物学领域，公开了靶向ZNF268基因的RNA干扰表达载体构建方法及其应用，本发明方法是将筛选得到的靶向ZNF268基因的siRNA寡核苷酸片段插入到载体系统中，构建成靶向ZNF268基因的RNA干扰质粒载...
- 李文鑫郭明雄汪维赵舟宙曾艳
- 文献传递
