赵可佳
- 作品数:17 被引量:46H指数:4
- 供职机构:浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金教育部基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 不同引物介导的聚合酶链反应对人乳头瘤病毒的快速检测与分型被引量:5
- 2007年
- 目的 比较通用引物、型特异性引物在检测人乳头瘤病毒(HPV)DNA中的应用。方法 104例尖锐湿疣组织中提取DNA后分别用HPV6b、11、16、18型特异性引物及通用引物MY09/11、GP5^+/6^+经聚合酶链反应(PCR)进行扩增。部分标本采用限制性内切酶Pst I来确定HPV11型。结果 GP5^+/6^+的检出率高于MY09/11,但差异无显著性(χ^2=3.78,P〉0.05)。GP5^+/6^+检出微量HPV DNA的敏感度高于MY09/11。型特异性引物检测HPV感染优于通用引物MY09/11结合酶切分型。结论 型特异性引物检出HPV11单一型感染显著多于HPV6b型,且发现HPV6b、11型同时感染有逐年增高之趋势。GP5^+/6^+引物结合型特异性引物可为临床上检测尖锐湿疣HPV型别提供方便易行的选择。
- 金纳姚晓红赵可佳王也玲程浩
- 关键词:人乳头瘤病毒聚合酶链反应
- 尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对IL-12和IFN-γ分泌的影响
- 目的:研究尖锐湿疣病损组织粗提蛋白对树突状细胞分泌细胞因子IL-12和蛋白刺激后的树突状细胞对T细胞分泌IFN-γ水平的影响。材料和方法材料:外周血来自健康自愿献血者;尖锐湿疣组织来自患者外阴皮损;包皮来自包皮过长儿童患...
- 芦桂青程浩吴金民张在云方向明王琦赵可佳
- 关键词:尖锐湿疣树突状细胞细胞因子
- 尖锐湿疣组织中端粒酶及端粒酶逆转录酶的表达被引量:1
- 2004年
- 叶俊张行程浩赵可佳陈大方岑建萍
- 关键词:尖锐湿疣端粒酶逆转录酶细胞端粒酶增殖性MRNA水平
- 淋病奈瑟菌外膜Porin I蛋白多价抗血清的黏附抑制功能被引量:3
- 2004年
- 岑建萍程浩曾凤英林洁张均张行叶俊芦桂青赵可佳
- 关键词:淋病奈瑟菌PORIN上皮细胞
- 小干预RNA对人乳头瘤病毒6bE6基因的沉默作用被引量:3
- 2004年
- 目的探讨小干预RNA(siRNA)对稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)6bE6基因的细胞株中靶基因的干预作用。方法建立并筛选稳定表达靶基因HPV6bE6的阳性细胞株,分别设计同源于HPV6bE6基因的不同序列的4对siRNA,采用实时定量PCR技术检测siRNA转染前后细胞内靶mRNA的表达情况。结果转染细胞中HPV6bE6基因表达最低有90%以上被抑制,低浓度siRNA水平(1nmol/L^150nmol/L)即能有效抑制靶基因表达,靶mRNA的沉默于转染siRNA后24h达到最强,且至少可维持4d。结论siRNA-HPV6bE6可以高效、特异地沉默HPV6bE6基因,可能为治疗HPV6b型感染提供实验室依据。
- 赵可佳程浩丁佳逸张行
- 关键词:E6基因RNA干预靶基因表达转染细胞
- 钙网蛋白基因120片段和人乳头瘤病毒6bE7基因诱导的小鼠细胞免疫反应
- 2005年
- 目的研究嵌合DNA疫苗钙网蛋白基因120片段(CRT120)和人乳头瘤病毒6b型E7基因(HPV6bE7)的免疫学特性。方法克隆、构建重组质粒即嵌合DNA疫苗pcDNA3.1-GFP-CRT120/ HPV6bE7、pcDNA3.1-GFP-HPV6bE7、pcDNA3.1-GFP-CRT120;经脂质体转染获得HPV6bE7转染阳性 B16细胞株;用肌内注射法对C57BL/6小鼠进行重组质粒DNA疫苗免疫;检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群变化、小鼠脾细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性以及与靶细胞共孵育后白介素2和干扰素γ的分泌水平。结果获得构建正确的嵌合DNA疫苗pcDNA3.1-GFP-CRT120/HPV6bE7以及稳定表达HPV6bE7 的阳性细胞株。CRT120/HPV6bE7较之HPV6bE7能引起免疫小鼠外周血中CD8+T淋巴细胞亚群分化和 TCRγδ T细胞上调(P<0.05),脾淋巴细胞与靶细胞共孵育上清液中白介素2和干扰素γ的浓度也明显高于HPV6bE7和CRT120组(P<0.05);CRT120/HPV6bE7免疫的小鼠淋巴细胞对靶细胞B16/HPV6bE7 有明显的杀伤活性。结论 CRT120/HPV6bE7嵌合DNA疫苗能够诱导免疫小鼠的病毒抗原特异性细胞免疫。
- 徐妍程浩赵可佳叶俊张行宋韬陈民利王琦
- 关键词:钙网蛋白
- HPV6b型E7基因与CRT基因真核融合表达质粒的构建
- 2004年
- 目的 采用HPV 6bE7基因与钙网蛋白 (Calreticulin ,CRT)基因共连接方法 ,构建高特异性、能更加活化细胞免疫的HPVDNA疫苗。方法 利用PCR技术分别获得HPV6bE7基因和CRT基因片段 ,与带GFP标记的真核表达质粒pCDNA 3.1+共连接。结果 获得阳性重组表达质粒pCDNA 3.1+ GFP HPV6bE7/CRT 180 ,经酶切鉴定及核酸序列测定证明真核融合表达质粒构建完成。结论 HPV 6b型E7基因与CRT基因真核融合表达质粒的成功构建为下一步建立高特异性、高效HPVDNA疫苗的研究打下基础。
- 宋韬叶俊程浩赵可佳
- 关键词:人类乳头瘤病毒真核表达质粒钙网蛋白
- CRT-HPV重组DNA疫苗和RNA干扰技术对HPV的抑制作用研究
- 尖锐湿疣(Condylomaacuminatum,CA)是我国发病率最高的性传播疾病之一,其临床上顽固难治,极易复发。
人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)是其病原体,迄今已有130多...
- 赵可佳
- 关键词:钙网蛋白小干扰RNA基因沉默
- 人乳头瘤病毒感染的免疫学致病机制及干预策略研究
- 程浩朱可建陈贤祯周强叶俊汤怡赵可佳林爱华徐妍
- 人乳头瘤病毒(HPV)感染引起人皮肤黏膜良性增生性病变和宫颈癌等恶性肿瘤。HPV感染发生率高,顽固难治,导致患者痛苦和较重的医疗负担。研究HPV感染的免疫学致病机制及其干预策略十分必要而紧迫。该课题组从事人乳头瘤病毒HP...
- 关键词:
- 关键词:人乳头瘤致病机制生物治疗
- 表达人乳头瘤病毒6b和11型E6/E7基因的小鼠肿瘤细胞株的建立被引量:6
- 2004年
- 目的构建含有人乳头瘤病毒(HPV)6b和11型E6/E7基因的表达质粒和建立这些基因的转染细胞株。方法分别将HPV6bE6、HPV6bE7、HPV11E6和HPV11E7克隆于含绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1,经脂质体介导转染B16细胞,以G418筛选阳性克隆,荧光显微镜观察,RT-PCR鉴定mRNA转录。结果通过酶切鉴定和基因测序证实,构建质粒中目的基因片段序列完全正确。转染后荧光显微镜下可观测到B16细胞发出绿色荧光。以G418筛选的抗性细胞克隆提取RNA并经RT-PCR扩增出与目的基因大小一致的基因片段。结论建立的小鼠肿瘤细胞B16表达HPV6bE6、HPV6bE7、HPV11E6和HPV11E7基因。提示转染的细胞株可移植于小鼠,利于体内研究这些基因的生物学作用和免疫学机制。
- 赵可佳程浩陈民利丁志山耿礼义方永明
- 关键词:人乳头瘤病毒11型E6基因E7基因小鼠基因转染