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袁志军: 作品数：11 被引量：19H指数：3; 供职机构：中国农业科学院茶叶研究所更多>>; 发文基金：科技基础性工作专项浙江省公益性技术应用研究计划项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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一种茶刺蛾核型多角体病毒的定量检测方法: 一种茶刺蛾核型多角体病毒的定量检测方法，属于生物制剂检测技术领域。其包括以下步骤：根据茶刺蛾核型多角体病毒的<I>Lef </I>11基因设计引物；获取目的片段，进行PCR扩增得到<I>Lef </I>11基因片段；构建...; 肖强袁志军付建玉毛腾飞周孝贵; 文献传递

EoNPV实时荧光定量PCR检测方法的优化及应用: 茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus,EoNPV)(杆状病毒科核型多角体病毒属)是茶尺蠖的病原性天敌,被茶尺蠖幼虫取食后在其体内迅速增殖,致其感染发病而死亡。该...; 袁志军肖强殷坤山; 关键词：RT-PCR

茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)实时荧光定量PCR检测方法的优化及应用被引量：7: 2013年; 选用茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)基因组中序列特异性很高的p16基因为目标基因,通过设计引物、PCR扩增、目的片段与载体连接转化获得含p16基因的重组质粒进行测序,进而以经测序鉴定的p16基因的PCR纯化产物作为实时荧光定量PCR标准品模板,稀释后建立SYBR Green I荧光定量标准曲线,统计分析显示标准品浓度的对数值与Ct值之间存在良好的线性关系(R2=0.9981)。该方法的检测灵敏度为102,扩增产物形成单一的特异性熔解峰,组内组间变异系数均小于3%。同时分别对含有其他茶树害虫病毒和不同浓度的茶尺蠖病毒产品的样品进行检测,能明确样品中是否含有EoNPV及含量。根据已建立的方法对感染病毒后不同时间段的茶尺蠖幼虫进行检测,每克幼虫样本内p16基因拷贝数的增殖倍数对数值与感染时间呈正相关(R2=0.9935),可以获得茶尺蠖幼虫感染病毒后不同时间的增殖动态。上述结果表明,该方法能定性定量鉴定茶尺蠖核型多角体病毒,可用于茶尺蠖核型多角体病毒类生物农药的检测和感染过程检测。; 袁志军张传溪肖强殷坤山; 关键词：SYBR

茶尺蠖类免疫球蛋白基因EoHML的克隆和表达分析: 2015年; 类免疫球蛋白(Hemolin)是一种鳞翅目昆虫特有的免疫相关蛋白,也是唯一的无脊椎动物免疫球蛋白家族成员。本实验应用RACE技术获得了茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)类免疫球蛋白基因的全长c DNA序列,命名为Eo HML(Gen Bank登录号:KM885983),并分析了相关生物信息学特性,检测了病毒感染后基因的表达水平。结果表明,Eo HML基因序列全长1 772 bp,包含1 239 bp的开放阅读框,编码412个氨基酸,预测蛋白分子量大小为45.8 k D,等电点(p I)为8.297,属于典型的分泌型蛋白,且具有昆虫Hemolin基因保守的4个Ig功能区和2个N-glycosylation位点。系统进化分析表明,该蛋白与目前已知的类免疫球蛋白氨基酸序列的亲缘关系都较远,与烟草天蛾(Manduca sexta)类免疫球蛋白氨基酸序列相似度最高,为53%。荧光定量检测结果表明,茶尺蠖核型多角体病毒(Eo NPV)感染茶尺蠖幼虫后该基因表达量显著升高,最高表达量是正常对照的36.5倍,表明茶尺蠖Eo HML基因可能参与了茶尺蠖对Eo NPV的免疫代谢反应。; 余玉庚袁志军殷坤山付建玉肖强; 关键词：茶尺蠖基因克隆

一种茶刺蛾核型多角体病毒的定量检测方法: 一种茶刺蛾核型多角体病毒的定量检测方法，属于生物制剂检测技术领域。其包括以下步骤：根据茶刺蛾核型多角体病毒的Lef 11基因设计引物；获取目的片段，进行PCR扩增得到Lef 11基因片段；构建重组质粒；建立检测茶刺蛾核型...; 肖强袁志军付建玉毛腾飞周孝贵

一种信息素组合物在防治灰茶尺蠖中的应用: 一种信息素组合物在防治灰茶尺蠖中的应用，属于灰茶尺蠖的防治技术领域。该信息素组合物由Z3Z9-6,7环氧-十八碳二烯和Z3Z6Z9-十八碳三烯组成。本发明的有益效果在于：本发明中的灰茶尺蠖性信息素组合物及其诱芯对灰茶尺蠖...; 肖强余玉庚马四国袁志军周孝贵郭华伟唐美君; 文献传递

基于线粒体基因、核糖体基因和遗传杂交的茶尺蠖不同地理种群遗传分化的研究: 本研究以mtDNACOI和rDNAITS2基因为分子标记，对分布在我国的8个省17不同地区的茶尺蠖种群的遗传结构进行了分析;基于分子系统发育分析的结果，选取茶尺蠖部分地理种群进行杂交实验。主要研究结果如下： 1.测定了1...; 袁志军; 关键词：茶尺蠖; 文献传递

一种茶毛虫核型多角体病毒的定量检测方法: 一种茶毛虫核型多角体病毒的定量检测方法，属于生物制剂检测技术领域。其包括：根据茶毛虫核型多角体病毒的A13-1基因设计引物；从感染茶毛虫核型多角体病毒的虫体中提取茶毛虫核型多角体病毒基因组DNA，通过PCR扩增得到A13...; 肖强袁志军付建玉唐美君葛超美; 文献传递

EoNPV实时荧光定量PCR检测方法的优化及应用: 茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus, EoNPV)(杆状病毒科核型多角体病毒属)是茶尺蠖的病原性天敌,被茶尺蠖幼虫取食后在其体内迅速增殖,致其感染发病而死亡。...; 袁志军肖强殷坤山; 关键词：SYBR RT-PCR

基于mtDNACOI的假眼小绿叶蝉系统发育研究被引量：11: 2014年; 克隆测定了12个茶树假眼小绿叶蝉Empoasca vitis（Gothe）种群84个样本和5个叶蝉近缘种外群62个虫体的线粒体DNA COI基因序列片段,利用生物信息学软件分析其序列同源性、遗传结构及系统进化关系.发现我国茶树假眼小绿叶蝉种群间的遗传距离为0.5%-1.2%,远小于昆虫物种2%的界限,未呈现明显遗传分化,ML分子系统树也显示其种群个体呈平行分布.假眼小绿叶蝉与几种外群叶蝉的遗传距离在14.8%-24.5%之间,依次为葡萄小绿叶蝉〈葡萄二星叶蝉〈桃一点斑叶蝉,说明它与葡萄小绿叶蝉亲缘关系最近,与系统进化树的聚类结果一致.本研究首次通过mtCOI基因序列分析,揭示了假眼小绿叶蝉遗传结构及它与近缘种叶蝉的系统进化关系,为解释它在茶园的起源及适应机制提供了基础.; 付建玉李乐袁志军唐美君肖强; 关键词：假眼小绿叶蝉系统发育