袁婧
- 作品数：38 被引量：143H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划引进国际先进农业科技计划中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学经济管理更多>>
- 胚胎水平上控制家畜性别的方法
- 2006年
- 家畜性别控制是生物学中重要的研究课题,依据畜牧业生产中不同的需要来决定不同家畜的性别在人类健康及畜牧业生产上有巨大的应用价值。实现对动物性别的控制一直是人类期望达到的目标之一。文章从胚胎水平出发对家畜性别控制最新进展作了简述,并着重就不同性别控制手段的理论基础、特点,及这些方法存在的问题进行了综述。
- 韩凤桐李武袁婧
- 关键词：胚胎性别
- 与猪轮状病毒VP6蛋白相互作用的细胞蛋白研究
- 猪轮状病毒(PoRV)是引起幼龄仔猪发生急性胃肠炎的主要病原，一般通过接触病畜的排泄物后经粪口途径进行传播，呈地方性流行。目前在我国流行范围较广的是A群PoRV，在猪群中流行率为3.3％～67.3％，其中G9型毒株呈再度...
- 袁婧
- 关键词：猪轮状病毒免疫反应
- 猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用被引量：51
- 2007年
- 本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay,IPMA),用于猪圆环病毒2型血清抗体检测,通过对IPMA反应条件的优化,组装了诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测猪圆环病毒2型人工感染猪血清,于感染后3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检出率为92.8%(52/56),对照组猪血清抗体检测均为阴性(33/33)。试剂盒在-20℃稳定保存18个月与其他几种猪病毒参考血清无交叉反应,与用重组蛋白抗原建立的rcELISA符合率为89.2%。对来自黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙古、云南、江西等地猪场健康成年猪血清480份和发病猪血清424份进行了检测,抗体检出率分别为91.7%和79.2%,表明我国猪群中猪圆环病毒2型污染相当严重。该试剂盒的研制为我国PCV2流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。
- 刘长明张超范危艳武张朝霞袁婧
- 关键词：猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析
- 临床“高热综合征”病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),随传代次数增加毒价...
- 刘长明危艳武张朝霞袁婧黄立平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性基因突变
- 文献传递
- 猪轮状病毒(G9型)TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2015年
- 为建立灵敏、特异的G9型猪轮状病毒(Po RV)Taq Man的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的G9型Po RV NMTL株的VP7基因保守区域设计一条特异性引物和探针。以104TCID50的病毒液所提取的总RNA进行10倍系列稀释作为标准品,通过对反应条件进行优化,建立了检测G9型Po RV的Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法的相关系数R2=0.991,对其它常见的Po RV(G5)、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型等猪病病原检测均为阴性,具有良好的特异性;该方法最低可以检测到的病毒滴度为10-3TCID50,比普通RT-PCR方法灵敏度高约1 000倍;组内和组间变异系数均小于0.87%,稳定性高,重复性好。对疑似感染Po RV的45份临床病料样品进行检测,结果表明,该方法阳性率(64.4%)高于普通RT-PCR(44.4%),两者总符合率为80%。本研究建立的方法为Po RV的流行病学调查和早期诊断奠定基础。
- 王宇飞时洪艳朱向东陈建飞袁婧张鑫石达刘建波王潇博高晶冯力
- 关键词：轮状病毒VP7基因
- 猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用
- 利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测.昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原...
- 张朝霞刘长明危艳武袁婧黄立平
- 关键词：猪圆环病毒2型重组蛋白间接ELISA抗体检测试剂盒
- 文献传递
- 猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救
- 用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组,将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalⅠ酶切位点作为分子靶标,拯救出带有分子标记的克隆病毒,命...
- 刘长明危艳武陆月华张朝霞袁婧黄立平
- 关键词：猪圆环病毒1型感染性克隆病毒拯救
- 文献传递
- 猪氨基肽酶N不是猪德尔塔冠状病毒入侵宿主细胞的受体被引量：8
- 2017年
- 猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)是一种新出现的冠状病毒,能够引起猪只发生呕吐和水样腹泻,临床症状与猪流行性腹泻(PED)和猪传染性胃肠炎(TGE)相似。相关研究表明猪氨基肽酶N(pAPN)是PED病毒(PEDV)和TGE病毒(TGEV)入侵宿主细胞的功能性受体。为研究pAPN是否是PDCoV入侵宿主细胞的受体,本研究以TGEV为指示病毒,通过BHK-pAPN细胞感染试验、pAPNRNA干扰试验、ST细胞过表达pAPN试验、可溶性pAPN阻断试验,发现BHK-pAPN细胞是PDCoV非易感细胞,在易感细胞ST上沉默和过表达pAPN对PDCoV的增殖并无影响,可溶性pAPN不能阻止PDCoV感染ST细胞。这些研究结果表明pAPN不是PDCoV入侵宿主细胞的受体,而且对PDCoV的增殖无影响。
- 卢曼曼张家林王洪峰时洪艳张鑫袁婧石达刘建波陈建飞冯力
- 关键词：受体
- 实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究被引量：12
- 2008年
- 根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-Green I嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107～101范围内具有良好的线性关系,相关系数为R2=0.997,扩增效率为E=0.920;对质粒标准品检测下限值为8.2拷贝/μL,检测变异系数低于2.0%。该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)比较,其敏感性提高103倍以上。采用该法对PCV2人工感染猪的心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明,在多种脏器中均可检测到病毒,其中腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高(为3.4×109拷贝/g～1.7×1010拷贝/g),这表明病毒主要在免疫器官增殖,导致淋巴细胞耗损。对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测,有半数以上病料的病毒载量达到109-10拷贝/g。实验表明,实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测,为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。
- 危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞
- 关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR
- 实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究
- 根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107-101范围内具...
- 危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞
- 关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR
- 文献传递
