黄立平
- 作品数:186 被引量:222H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生机械工程石油与天然气工程更多>>
- 猪圆环病毒2型病毒样颗粒的制备及其免疫原性研究被引量:3
- 2021年
- 利用真核细胞表达系统制备了猪圆环病毒2型(PCV2)重组Cap蛋白,旨在探索病毒样颗粒(VLPs)的形成及其免疫原性。以pCAGGS为表达载体构建了重组质粒pCAGGS-Cap-Flag,瞬时转染293T细胞,利用Flag标签对表达的Cap蛋白进行纯化。通过电镜观察重组Cap蛋白形成的VLPs形态表明,纯化的重组Cap蛋白以VLPs形式存在,其直径约17 nm,与自然PCV2病毒粒子一致。SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明,重组Cap蛋白为28.7 ku,分子质量符合预期,它与PCV2特异性单抗具有良好的免疫活性反应。捕获ELISA检测显示,重组Cap蛋白所组装的VLPs与纯化的自然PCV2具有相似的抗原活性。用制备的VLPs与经典的PCV2灭活疫苗分别免疫小鼠,这两种疫苗均能诱导良好的PCV2抗体应答反应,VLPs免疫组小鼠的抗体效价最高可达1∶12800,是PCV2灭活疫苗免疫组抗体效价的2倍。采用PCR检测免疫攻毒后小鼠肺组织中PCV2核酸,结果显示,VLPs免疫组和PCV2灭活疫苗免疫组均未检测到PCV2核酸,判定100%保护。本研究通过真核细胞表达系统制备的PCV2 VLPs具有与自然病毒粒子相似的形态结构,免疫小鼠可产生良好的免疫反应,可用于新型PCV2疫苗的研制。
- 边海桥黄立平危艳武夏德利朱红振吴洪丽于冲刘建行冯力刘长明
- 关键词:猪圆环病毒2型病毒样颗粒免疫原性
- 猪圆环病毒2型感染引起相关疾病诊断技术的研究进展
- @@由于PCV2引起的疾病类似于其它病原引起的症状,而且多病原的混合感染,为疾病的诊断带来困难,因此必须要有系统诊断的思路:根据流行病学资料、临床表现和组织病理变化作出初步诊断,再结合实验室技术来确诊,还要进行多病原的检...
- 黄立平刘长明
- 关键词:猪圆环病毒2型病毒感染疾病诊断
- 文献传递
- 表达PCV2-Cap蛋白的TK-/gE-/gG-重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性研究
- 伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属于疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科水痘病毒属。自2011年以来,临床上用经典Bartha-k61弱毒活疫苗免疫猪只频发伪狂犬病强毒感染的病例,经研究证实由PRV变异...
- 夏德利黄立平杜文娟王一平危艳武谢永兴刘丹吴红丽冯力刘长明
- 高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验
- 为阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的协同致病作用,澄清两种病毒不同时间顺序共感染与其协同致病力之间的关系。选取35日龄阴性健康猪30头,随机分6组,PCV2/HP-PRR...
- 范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明
- 关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型共感染
- 文献传递
- 表达O型口蹄疫VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生物学特性鉴定
- 张飞雁唐青海黄立平危艳武吴洪丽郭龙军付玉洁刘长明
- 关键词:猪圆环病毒2型VP1蛋白中和表位
- 猪圆环病毒病防控关键技术创新与应用
- 刘长明危艳武陆月华张超范黄立平郭龙军
- 猪圆环病毒病是继高致病性猪蓝耳病之后,国际上公认的危害养猪业的重要疫病。临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍和先天性震颤等多种疫病,死淘率达10%〜25%,给养猪业造成...
- 关键词:
- 关键词:养猪圆环病毒病
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株分离鉴定及遗传变异分析
- 临床“高热综合征”病例分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株,经细胞传代和蚀斑克隆,培育成功增殖性能稳定的新毒株,命名为PRRSV-HBR。该毒株接种细胞后能够产生细胞病变(CPE),随传代次数增加毒价...
- 刘长明危艳武张朝霞袁婧黄立平
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性基因突变
- 文献传递
- 几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用
- <正>1引言猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属,为单股环状共价闭合DNA病毒,基因组为1766~1768nt。该病毒被证实是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征...
- 张志慧危艳武吴洪丽黄立平李胜斌刘建波张辉王一平刘丹刘长明
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白保守序列突变可降低其表达量并阻碍Cap与Rep蛋白共定位抑制病毒复制
- 背景 猪圆环病毒2型(PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病给养猪业带来巨大的经济损失.PCV2 Cap蛋白上保守序列97RIRKVKV103可能是该病毒的受体结合位点,然而Cap蛋白的结构显示...
- 黄立平Nicolaas R.C.Van RenneDipongkor SahaJan Van DoorsselaereUladzimir Karniychuk刘长明Hans J.Nauwynck
- 抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定
- 为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备,以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501~2475 nt)...
- 张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明
- 关键词:重组CAP蛋白单克隆抗体抗性鉴定
- 文献传递