蔡立涛
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 外显子拼接法合成真菌灵芝漆酶基因cDNA被引量：6
- 2007年
- 为真菌漆酶基因cDNA的克隆提供了一种简便快速的新方法．从含有内含子的灵芝漆酶基因出发，采用外显子拼接PCR方法，合成了灵芝漆酶的cDNA．设计了10对引物分别经PCR扩增该基因的10个外显子，引物设计使前一个外显子的下游引物与下一个外显子的上游引物都有一段同源匹配序列，然后通过两两片段混合作为模板PCR扩增得到两两拼接的外显子片段，再将得到的5个片段前两个混合，后3个混合分别作为模板扩增获得拼接好的外显子1～4大片段和外显子5～10大片段，最后将这两个大片段混合作为模板扩增得到拼接好的全长cDNA序列．与常规方法相比，该方法既避免了RNA的操作，又不用摸索酶表达的条件，可以和基因组步行技术结合快速获得真菌漆酶基因的cDNA．
- 张桂敏王亚平蔡立涛马立新
- 关键词：漆酶基因合成CDNA
- 性激素类物质在农产品中的残留及检测被引量：6
- 2008年
- 近年来由于过量使用外源性激素作为动物饲料添加剂和植物生长调节剂,导致部分农产品受到性激素类物质污染并在农产品中残留,此外牛奶等乳制品中雌激素水平也有显著上升。这些性激素残留通过食物链在人体内积累,可诱发癌变,对生殖与神经等系统带来影响,还造成一定的环境问题。目前农产品中的性激素残留可用高效液相色谱法、酶联免疫吸附法等方法进行检测。
- 韩端丹洪琦蔡立涛吴永尧
- 关键词：性激素食品安全ELISA检测HPLC分析
- 纳豆激酶基因在毕赤酵母中的表达纯化及抗体制备被引量：14
- 2010年
- 目的实现纳豆激酶(NK)在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达,以纯化产物为抗原制备兔抗NK血清。为建立双抗夹心酶联免疫吸附反应法测定生物体内NK含量,进一步研究NK在体内代谢与功能奠定基础。方法将NK基因克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A中,鉴定后的重组质粒用SalⅠ酶切线性化后电转化到毕赤酵母宿主菌GS115中,甲醇诱导表达,经盐析和Millipore超滤膜过滤分离纯化表达产物。纤维蛋白法检测纯化产物的活性,并以纯化产物为抗原免疫新西兰大白兔制备兔抗NK血清。结果SDS-PAGE结果显示NK成功表达,其相对分子质量(Mr)约为27 000,纤维蛋白平板实验显示表达产物具有较好的纤溶活性。酶联免疫法测得多克隆抗体效价约为1∶8 000,Western blot结果显示在Mr27 000附近有1条特异带出现。结论NK在巴斯德毕赤酵母中实现了分泌表达,表达产物具有较好的纤溶活性和免疫原性。
- 蔡立涛徐祥王婷婷喻梅星杨艳燕
- 关键词：纳豆激酶巴斯德毕赤酵母纤溶活性
- 毕赤酵母产木聚糖酶工程菌P148n3发酵条件的控制与优化
- 木聚糖是植物细胞壁中的主要结构,属于非淀粉类多糖,其在植物细胞壁中的含量仅次于纤维素,它由 B—D一吡喃型木糖残基经 B-1,4-糖苷键相连形成主链,并由阿拉伯糖、乙酰基甘露糖和葡萄糖醛酸等复杂侧链组成.木聚糖酶(内切—...
- 熊少伶张静汪晓莉蔡立涛杨艳燕
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ_2基因多态性及其表达与糖尿病关系的研究被引量：1
- 2007年
- 通过PCR—RFLP与免疫组织化学方法,研究过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ_2基因Prol2Ala多态性与糖尿病(DM)易感性的关系,以及人皮下脂肪组织中PPARγ_2的表达与DM的相关性.实验结果表明,DM患者基因型Pro/Ala为9%,而对照组Pro/Ala为5%,DM患者与对照组之间Prol2Ala多态性频率存在差异,但不显著;用SABC方法处理皮下脂肪组织后,DM患者与正常对照组切片染色不同.PPARγ_2可能会在DM的诊断和治疗过程中起到一定作用.
- 沈轶石艳军蔡立涛胡峰杨艳燕
- 关键词：糖尿病过氧化物酶体增殖物激活受体基因多态性免疫组织化学法
- 高通量克隆真菌木质纤维素降解酶基因与表达研究
- 木质纤维素包括纤维素、半纤维素、木质素等,相应的木质纤维素降解酶包括纤维素酶 (内切葡聚糖酶,纤维二糖酶,葡萄糖苷酶等)、半纤维素酶(木聚糖酶、甘露聚糖酶等)、木质素降解酶(漆酶,木质素过氧化物酶,锰依赖过氧化物酶等)。...
- 张桂敏叶戋蔡立涛马立新
- 文献传递
- 外显子拼接法合成真菌灵芝漆酶基因cDNA
- 在对真菌基因的研究中,准确得到真菌基因的 cDNA 序列具有重要的意义。但是大多数真菌漆酶基因的表达受到调控,阻遏物和诱导物对于酶的生成和酶活水平的高低影响较大。不同的菌种,不同的培养条件,所产生的酶系差别较大。因此利用...
- 王亚平张桂敏蔡立涛马立新
- 关键词：漆酶基因合成CDNA
- 文献传递
