胡志亮
- 作品数：8 被引量：22H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅科技计划项目湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBx基因缺失突变体HBx-d382对L02细胞增殖及非锚定依赖生长能力的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:建立稳定表达HBx基因缺失突变体(HBx-d382)的L02肝细胞株,并探讨其对L02细胞增殖的影响.方法:含HBx-d382重组质粒(pcDNA3.0/HBx-d382)经过PCR扩增、双酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染和G418筛选获得稳定表达HBx-d382的L02肝细胞株.PCR鉴定基因组中HBx-d382基因整合.RT-PCR和Westernblot鉴定其表达,进一步通过MTT法,软琼脂克隆形成实验检测HBx-d382对L02细胞增殖及非锚定依赖生长能力的影响.用流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.结果:经PCR扩增、双酶切及测序鉴定HBx-d382重组质粒构建正确.稳定转染该质粒的L02细胞基因组存在HBx-d382整合.RT-PCR及Westernblot表明在RNA水平和蛋白水平存在HBx-d382表达,稳定表达HBx-d382的L02细胞其增殖能力和非锚定生长能力增强,S+G2期细胞比例升高.结论:成功构建了HBx缺失突变体的真核表达模型,证实HBx缺失突变体能影响细胞增殖,这种效应可能与其影响细胞周期调控相关.
- 胡志亮谭德明侯周华谢萍刘国珍欧阳奕刘菲刘洪波
- 关键词：HBX增殖细胞周期
- 食管胃底静脉曲张首次出血的药物预防被引量：7
- 2009年
- 食管胃底静脉曲张是肝硬化的严重并发症,大约有40%的静脉曲张病人发生自发破裂出血,尽管目前治疗手段在不断的改善,但出血后6周内的总病死率仍高达20%。食管胃底静脉曲张破裂出血是肝硬化最严重的致死性并发症,本文就目前预防食管胃底静脉曲张首次出血的药物治疗措施做一综述。
- 胡志亮谭德明
- 关键词：食管胃底静脉曲张药物预防首次出血
- HBx基因缺失突变体(HBx-d382)对L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达的影响
- 2011年
- 目的前期的研究成功构建了稳定表达HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)的L02细胞,分别命名为L02/HBx和L02/HBx-d382,并证实其可导致肝细胞恶性转化。该研究进一步探讨HBx-d382对L02细胞G1期细胞周期调控相关基因cyclinD1,cyclinG1和E2F1表达的影响。方法实验分为L02/pcDNA3.0(稳定转染pcDNA3.0)、L02/HBx和L02/HBx-d382(分别稳定转染质粒pcDNA3.0/HBx和pcDNA3.0/HBx-d382)3组。通过实时定量PCR以及wester-blot检测转染HBx基因及其缺失突变体HBx-d382后L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达的改变。方法实时定量PCR以及wester-blot结果表明稳定表达HBx基因或HBx-d382的L02细胞cyclinD1、cyclinG1和E2F1表达上调,表达HBx-d382的L02细胞上调最为明显。结论 HBx-d382可能通过上调cyclinD1、cyclinG1和E2F1从而影响细胞G1期调控,进一步导致肝细胞恶性转化。
- 胡志亮侯周华符小玉陈莉谢萍欧阳奕杨永峰谭德明
- 关键词：HBXCYCLIN
- 慢性丙型肝炎患者血液微量元素、氧应激水平及与病毒载量的关系被引量：1
- 2008年
- 目的 检测慢性丙型肝炎患者血液微量元素和氧应激水平以及评估它们与丙型肝炎病毒(HCV)载量的关系.方法 采用实时荧光定量PCR检测42例未经治疗的丙型肝炎患者血清中HCV-RNA水平.原子吸收分光光度法测定其血清微量元素(铜、铁、锌、硒)浓度.分光光度法测定其血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化物酶(GPX)活性.结果 慢性丙肝患者血清锌、硒水平明显低于对照组,相反铜的水平明显高于对照组.与对照组比较,慢性丙肝患者血清MDA水平显著增加,SOD和GPX活性显著下降.血液锌、硒、铜以及MDA、SOD、GPX与HCV载量相关.结论 血液锌、硒、铜以及MDA、抗氧化酶SOD和GPX对慢性丙肝感染者有重要影响,这些参数有可能作为HCV感染的生物学标志物.
- 郭光辉谭德明胡志亮
- 关键词：氧化性应激病毒载量
- 重型肝炎患者外周血单个核细胞中微小RNA表达的分析被引量：5
- 2011年
- 重型肝炎发病机制复杂，目前认为其发病与肠道菌群移位、机体受到内毒素血症的二次打击密切相关。微小RNA（miRNA）是一类非编码的小分子RNA，其源长度约为19～25个核苷酸。miRNA位于机体免疫调节的最上游，它可以与其特定靶mRNA的3’端非翻译区互补配对，对靶mRNA进行翻译抑制或降解，实现靶基因的转录后调控[1]。
- 陈莉谭德明胡志亮符小玉龚国忠蒋永芳
- 关键词：肝炎病毒乙型单核细胞肝炎重型微小RNA
- HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)影响着L02细胞microRNA表达谱
- 目的：研究转染HBx基因(hepatitis B virus X gene)及其缺失突变体(HBx-d382)后L02细胞microRNA表达谱变化。方法:通过脂质体转染和G418筛选获得102/HBx、L02/HBx-...
- 胡志亮谭德明侯周华刘国珍谢萍刘洪波欧阳奕刘菲
- 关键词：HBX基因基因突变L02细胞
- 文献传递
- MicroRNA在HBx缺失突变体致肝细胞增殖中的作用及其机制探讨
- 目的研究microRNA(miRNA)在HBx缺失突变体致人肝细胞异常增殖中的作用及其相关机制,试图探讨HBx致癌变新的机制。材料:脂质体lipofectmine2000和Trizol(Invitrogen),2100生...
- 符小玉谭德明侯周华胡志亮刘国珍欧阳奕刘菲
- 文献传递
- HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)对L02细胞microRNA表达谱的影响被引量：6
- 2010年
- 目的研究转染HBx基因(hepatitis Bvirus Xgene)及其缺失突变体(HBx-d382)后L02细胞Mi-croRNA表达谱的变化。方法通过脂质体转染和G418筛选获得L02/HBx、L02/HBx-d382阳性克隆,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和western blot鉴定目的基因表达,利用MicroRNA芯片技术检测其对L02细胞MicroRNA表达的影响。结果 RT-PCR及Western blot表明在L02/HBx和L02/HBx-d382细胞株中存在目的基因表达。MicroRNA芯片发现与L02细胞相比,L02/HBx-d382细胞有7个MicroRNA表达上调,5个MicroRNA表达下调,L02/HBx细胞有4个MicroRNA表达上调,12个MicroRNA表达下调。结论成功构建HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)的真核表达模型,该类病毒基因会影响L02肝细胞的MicroRNA表达谱。
- 胡志亮谭德明侯周华刘国珍谢萍欧阳奕刘菲刘洪波
- 关键词：HBX微小RNA
