胡小南
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 供职机构：浙江大学农业与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 以bar基因为筛选标记转基因大豆的获得及鉴定被引量：8
- 2011年
- 在已优化的大豆农杆菌介导转化体系基础上,以发芽1～2 d的成熟大豆子叶节为外植体,以bar基因作为筛选标记基因,采用农杆菌介导法将胰蛋白酶抑制剂基因(Sporamin)和几丁质酶基因(Chitinase KDEL)转入大豆品种YC-2中。T0代得到生根苗115株,其中采用除草剂叶片涂抹法和目的基因PCR检测法鉴定出阳性植株45株,其中选取的6个T0代植株中有4个独立株系外源基因在T1代遗传,其中2个T1代株系呈3∶1的遗传分离比例,2个T1代株系分离比例大于3∶1。T0和T1代经草丁膦叶片涂抹法鉴定为阳性的植株,通过bar试纸条法和目的基因PCR检测法鉴定也均表现为阳性,因此,135 mg.L-1草丁膦叶片涂抹法可用于草丁膦筛选标记转基因大豆植株的大规模筛选。
- 卢涛李红艳章洁琼胡小南寿惠霞唐桂香
- 关键词：BAR基因转基因大豆
- 农杆菌介导的RNAiCP基因在大豆中的转化被引量：8
- 2013年
- 花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病是大豆主要病害之一,生产上常采用种植抗性品种方法来防治。本研究以RNA干扰花叶病毒衣壳蛋白(coat protein,CP)基因为表达载体,Bar基因作为筛选标记基因,成熟子叶节为外植体,采用农杆菌介导法获得了22株T_0代转基因大豆生根苗,经草丁膦涂抹、Bar试纸条和PCR法鉴定,获得RNAi CP转基因植株18株;对转基因植株T_1代的遗传分析表明,外源基因能够稳定遗传到下一代且符合孟德尔遗传规律;T_1代Southern杂交表明,导入的干扰片段为单拷贝;花叶病毒摩擦接种表明,RNAi CP转基因大豆植株具有抗花叶病毒特性;摩擦接种后3周,DAS-ELISA检测进一步表明,RNAi CP转基因植株花叶病毒检出率仅为7.69%,而非转基因植株为100%。这表明RNAi花叶病毒CP基因可用于抗大豆花叶病毒的研究。
- 章洁琼李红艳胡小南单志慧唐桂香
- 关键词：大豆RNAI大豆花叶病毒病毒鉴定
